మొక్క-ఉత్పన్నమైన ఫ్లేవానాల్ (-) ఎపికాటెచిన్ ఎత్తైన హిప్పోకాంపల్ మోనోఅమైన్ మరియు బిడిఎన్ఎఫ్ స్థాయిలతో అనుబంధంగా ఆందోళనను తగ్గిస్తుంది, కానీ ఎలుకలలో నమూనా విభజనను ప్రభావితం చేయదు | అనువాద మనోరోగచికిత్స

మొక్క-ఉత్పన్నమైన ఫ్లేవానాల్ (-) ఎపికాటెచిన్ ఎత్తైన హిప్పోకాంపల్ మోనోఅమైన్ మరియు బిడిఎన్ఎఫ్ స్థాయిలతో అనుబంధంగా ఆందోళనను తగ్గిస్తుంది, కానీ ఎలుకలలో నమూనా విభజనను ప్రభావితం చేయదు | అనువాద మనోరోగచికిత్స

Anonim

విషయము

  • హిప్పోకాంపస్

నైరూప్య

కోకో మరియు గ్రీన్ టీ వంటి సహజ ఉత్పత్తులలో లభించే ఫ్లేవనోల్స్ మానసిక స్థితి మరియు జ్ఞానానికి ముఖ్యమైన మెదడు ప్రాంతమైన హిప్పోకాంపస్‌లో నిర్మాణ మరియు జీవరసాయన మార్పులను తెలియజేస్తాయి. ఎలివేటెడ్ ప్లస్ మేజ్ (ఇపిఎం) మరియు ఓపెన్ ఫీల్డ్ (ఆఫ్) లో ఆందోళన యొక్క కొలతలపై వయోజన మగ సి 57 బిఎల్ / 6 ఎలుకల ఫ్లేవనాల్ (-) ఎపికాటెచిన్ (నీటిలో రోజుకు 4 మి.గ్రా) రోజువారీ వినియోగం యొక్క ఫలితాన్ని ఇక్కడ మేము పరిశీలించాము. ఇంకా, నమూనా విభజన, హిప్పోకాంపల్ డెంటేట్ గైరస్ (డిజి) చేత మధ్యవర్తిత్వం వహించబడే దగ్గరి అంతరం గల ఒకేలా ఉద్దీపనల మధ్య తేడాను గుర్తించే సామర్థ్యాన్ని టచ్‌స్క్రీన్ ఉపయోగించి పరీక్షించారు. (-) ఎపికాటెచిన్ దాని ప్రభావాలను చూపించే యంత్రాంగాలను పరిశోధించడానికి, వయోజన హిప్పోకాంపల్ న్యూరోజెనిసిస్‌ను అంచనా వేయడానికి ఎలుకలను బ్రోమోడెక్యూరిడిన్ (50 మి.గ్రా కేజీ -1 ) తో ఇంజెక్ట్ చేశారు. అదనంగా, మోనోఅమినెర్జిక్ మరియు న్యూరోట్రోఫిన్ సిగ్నలింగ్ పాత్వే ప్రోటీన్లను సబ్జెక్ట్ కార్టిసెస్ మరియు హిప్పోకాంపి నుండి పొందిన కణజాలంలో కొలుస్తారు. ఫ్లావనాల్ వినియోగం OF మరియు EPM లో ఆందోళనను తగ్గించింది. ఎలివేటెడ్ హిప్పోకాంపల్ మరియు కార్టికల్ టైరోసిన్ హైడ్రాక్సిలేస్, నియంత్రణ లేని కార్టికల్ మోనోఅమైన్ ఆక్సిడేస్-ఎ స్థాయిలు, అలాగే పెరిగిన హిప్పోకాంపల్ మెదడు-ఉత్పన్నమైన న్యూరోట్రోఫిక్ కారకం (బిడిఎన్ఎఫ్) మరియు బిడిఎన్ఎఫ్ అనుకూల ఫ్లేవానాల్ యొక్క యాంజియోలైటిక్ ప్రభావాలకు మద్దతు ఇస్తుంది. అదనంగా, హిప్పోకాంపస్ మరియు కార్టెక్స్‌లో ఎలివేటెడ్ pAkt గమనించబడింది. (-) ఎపికాటెచిన్ తీసుకోవడం టచ్‌స్క్రీన్ పనితీరును లేదా డిజి న్యూరోజెనిసిస్‌ను సులభతరం చేయలేదు, ఇది న్యూరోజెనిక్ యంత్రాంగాన్ని సూచిస్తుంది. పరిపూరకరమైన న్యూరోట్రోఫిక్ మరియు మోనోఅమినెర్జిక్ సిగ్నలింగ్ మార్గాల యొక్క ఏకకాలిక మాడ్యులేషన్ ఈ ఫ్లేవానాల్ యొక్క ప్రయోజనకరమైన మూడ్-మాడ్యులేటింగ్ ప్రభావాలకు దోహదం చేస్తుంది.

పరిచయం

మానవులలో మరియు జంతు నమూనాలలో చేసిన అధ్యయనాలు మొక్కల పాలీఫెనాల్స్‌తో సమృద్ధిగా ఉన్న ఆహార జోక్యం ఒత్తిడి లేదా ఆందోళనను తగ్గించి, అభిజ్ఞా క్షీణతను తగ్గించగలదని తేలింది. 1, 2, 3 కోకో, గ్రీన్ టీ, బ్లూబెర్రీస్ మరియు ద్రాక్షలలో న్యూరోప్రొటెక్షన్, 4, 5, 6, 7 కాగ్నిషన్ 2, 8 మరియు మూడ్‌లో ప్లెయోట్రోపిక్ పాత్రలు కలిగిన ప్లాంట్ పాలిఫెనాల్స్ యొక్క ఉపవర్గం ఫ్లేవనోల్స్ ఉన్నాయి. 9, 10 ఈ ప్రయోజనాలను అందించే క్రియాశీల పదార్ధం తరచుగా అస్పష్టంగానే ఉంది, ఎందుకంటే చాలా పరిశోధనలు మొత్తం ఆహారాలు లేదా బహుళ ఫ్లేవనోల్స్ 11, 12, 13, 14 వృద్ధాప్య జంతువుల నమూనాలలో, 15, 16 సెరెబ్రోవాస్కులర్ స్ట్రెస్ 17 లేదా అల్జీమర్స్ వ్యాధిని పరిశీలిస్తాయి. 18, 19, 20, 21, 22 అందువల్ల, ప్రత్యేక ఆసక్తి ఉన్న స్వచ్ఛమైన ఫ్లేవనాల్ (-) ఎపికాటెచిన్ (ఇసి), ఇది రక్తం-మెదడు అవరోధం గుండా వెళుతుంది మరియు మెదడు పనితీరును నేరుగా ప్రభావితం చేస్తుంది. 22, 23, 24 EC వినియోగం ఎలుకలు 24 మరియు నత్తలలో జ్ఞాపకశక్తిని మెరుగుపరుస్తుంది. [25] దీని జీవక్రియలు అల్జీమర్స్ వ్యాధి-మోడలింగ్ ఎలుకల నుండి పొందిన హిప్పోకాంపల్ ముక్కలలో దీర్ఘకాలిక శక్తిని పెంచుతాయి. 22

ఈ ఫ్లేవానాల్ మూడ్ రెగ్యులేషన్‌ను కూడా ప్రభావితం చేస్తుందో తెలియదు. నిజమే, గ్రీన్ టీ మరియు ద్రాక్ష విత్తన ఫ్లేవనోల్స్ రెండూ ఎలుకలలో యాంటిడిప్రెసెంట్స్‌గా పనిచేస్తాయి, బలవంతంగా-ఈత మరియు తోక సస్పెన్షన్ పరీక్షలలో పనితీరును పెంచుతాయి. 26, 27, 28 కోకో పాలిఫెనాల్ (88.5% టానిన్లు, 11.5% ఫ్లేవనోల్స్) మిశ్రమాన్ని తినే ఎలుకలలో ఇలాంటి పరిశీలనలు జరిగాయి. వ్యక్తిగత ఫ్లేవానోల్స్ అధ్యయనాలు ఈ ఫలితాలను ధృవీకరిస్తాయి; గ్రీన్ టీ కాటెచిన్ (-) ఎపిగాల్లోకాటెచిన్ గాలెట్ ఆందోళన యొక్క బహుళ పరీక్షలలో మౌస్ పనితీరును మెరుగుపరిచింది, 9, 10 అయితే ఫ్లేవానాల్ లుటియోలిన్ ఎలుకలలో బలవంతంగా-ఈత పరీక్షలో స్థిరీకరణ సమయం తగ్గింది. [30 ] మానవులలో, ఫ్లేవానాల్ అధికంగా ఉన్న కోకో పానీయం యొక్క వినియోగం డిమాండ్ చేసే అభిజ్ఞా పని ద్వారా సంభవించే ఆందోళనను పెంచుతుంది. మోనోఅమినెర్జిక్ వ్యవస్థలను మాడ్యులేట్ చేయడం, న్యూరోట్రాన్స్మిటర్ సంశ్లేషణను పెంచడం మరియు ఎంజైమాటిక్ విచ్ఛిన్నం / తొలగింపును తగ్గించడం ద్వారా ఈ పాలీఫెనాల్స్ మానసిక స్థితిని ప్రభావితం చేస్తాయి. 17, 33 ఇంకా, మెదడు-ఉత్పన్నమైన న్యూరోట్రోఫిక్ కారకం (బిడిఎన్ఎఫ్) స్థాయిలు వయోజన మాంద్యంతో ముడిపడి ఉన్నందున, 34, 35 న్యూరోట్రోఫిన్ వ్యక్తీకరణ కూడా ఫ్లేవానాల్-నడిచే మూడ్ మెరుగుదలలకు లోనవుతుంది.

చైనీస్ హెర్బ్ జియాబక్సిన్-టాంగ్ (ఎక్స్‌బిఎక్స్‌టి -2) మరియు కర్కుమిన్ వంటి డైటరీ పాలీఫెనాల్స్, దీర్ఘకాలిక ఒత్తిడి యొక్క నమూనాలలో వయోజన డెంటేట్ గైరస్ (డిజి) న్యూరోజెనిసిస్‌ను పెంచింది, 32, 36, 37, 38, 39 చర్యల యొక్క మరొక విధానాన్ని సూచిస్తుంది. మూడ్-మాడ్యులేటింగ్ ప్రభావాలను చూపవచ్చు. ఆడ ఎలుకలలో EC తీసుకోవడం కొత్త DG కణాల మనుగడను ప్రభావితం చేయనప్పటికీ, మగ ఎలుకలలో వయోజన-జన్మించిన న్యూరాన్ల భేదంపై 24 ప్రభావాలు అంచనా వేయబడలేదు. నమూనా విభజనకు DG, మరియు ముఖ్యంగా వయోజన న్యూరోజెనిసిస్ ముఖ్యమైనవిగా పరిగణించబడతాయి. 40, 41 నిజమే, వృద్ధాప్య మానవులలో, ఫ్లేవానాల్ వినియోగం DG పనితీరును మెరుగుపరుస్తుంది మరియు చాలా సారూప్య దృశ్య ఉద్దీపనల మధ్య వివక్ష అవసరం. [42] చక్కటి వ్యత్యాసాలను చేయగల ఈ సామర్థ్యం మూడ్ రెగ్యులేషన్‌కు కూడా సంబంధించినది కావచ్చు, అధిక సాధారణీకరణను నివారించడం ద్వారా మరియు తద్వారా ఆందోళనను తగ్గించడం. ఏదేమైనా, EC వినియోగం యాంజియోలైటిక్ ప్రభావాలను రేకెత్తిస్తుందో లేదో నిర్ణయించాల్సి ఉంది. మొత్తంగా, ప్రస్తుత అధ్యయనం యొక్క లక్ష్యం నమూనా విభజన మరియు ఆందోళనపై EC యొక్క ప్రభావాలను అంచనా వేయడం మరియు అంతర్లీన సెల్యులార్ విధానాలను నిర్ణయించడం.

సామాగ్రి మరియు పద్ధతులు

విషయాలు మరియు సమ్మేళనం పరిపాలన

విషయాలు . మగ C57BL / 6J ఎలుకలు (ది జాక్సన్ లాబొరేటరీ, బార్ హార్బర్, ME, USA) ప్రామాణిక పంజరాల్లో 6 వారాల వయస్సులో ప్రామాణిక పగటి / రాత్రి చక్రంతో ఉంచబడ్డాయి: లైట్లు 0600 గంటలకు మరియు 1800 గంటలకు ఆపివేయబడ్డాయి. జంతువులు వారి ఉచిత-తినే బరువులో 90% అధ్యయనం అంతటా పరిమితం చేయబడ్డాయి. 18 వారాల వయస్సులో, ఎలుకలు రోజూ 5 రోజులు బ్రోమోడెక్యూరిడిన్ ఇంజెక్షన్ అందుకున్నాయి (BrdU; 0.9% సెలైన్‌లో కరిగి, 0.2 μm వద్ద ఫిల్టర్ చేసిన శుభ్రమైన, 50 mg kg −1 శరీర బరువు 10 μg ml −1 వద్ద; సిగ్మా ఆల్డ్రిచ్, సెయింట్. విభజన కణాలను లేబుల్ చేయడానికి లూయిస్, MO, USA). ప్రవర్తనా పరీక్ష పూర్తయిన తరువాత, జంతువులను ఐసోఫ్లోరేన్ పీల్చడం ద్వారా 28 వారాల వయస్సులో లోతుగా మత్తుమందు చేశారు మరియు 0.9% సెలైన్ (గది ఉష్ణోగ్రత) తో ట్రాన్స్‌కార్డియల్‌గా పెర్ఫ్యూజ్ చేశారు. హిప్పోకాంపి మరియు అధిక కార్టిసెస్ ఎడమ అర్ధగోళాల నుండి విడదీయబడ్డాయి మరియు ఇమ్యునోబ్లోటింగ్‌లో ఉపయోగించడానికి −80 ° C వద్ద నిల్వ చేయబడ్డాయి. తరువాతి ఇమ్యునోహిస్టోకెమికల్ ప్రయోగాల కోసం కుడి అర్ధగోళాలు 4 ° C వద్ద 4% పారాఫార్మల్డిహైడ్‌లో నిల్వ చేయబడ్డాయి. పారాఫార్మల్డిహైడ్‌లో 96 గం తరువాత, ఇమ్యునోహిస్టోకెమిస్ట్రీకి ఉపయోగించాల్సిన కణజాలం 30% సుక్రోజ్‌లో సమతుల్యం చేయబడింది. సీక్వెన్షియల్ కరోనల్ విభాగాలు (40 μm) హిప్పోకాంపస్ ద్వారా తీసుకోబడ్డాయి మరియు ఫాస్ఫేట్-బఫర్డ్ గ్లిసరాల్‌లో −20. C వద్ద నిల్వ చేయబడ్డాయి. నేషనల్ ఇన్స్టిట్యూట్ ఆఫ్ హెల్త్ మార్గదర్శకాల ప్రకారం జంతువులను నిర్వహించేవారు. విధానాల కోసం అన్ని ప్రోటోకాల్‌లను NIA యొక్క ఇనిస్టిట్యూషనల్ యానిమల్ కేర్ అండ్ యూజ్ కమిటీ ఆమోదించింది.

(-) EC పరిపాలన . 10 వారాల వయస్సులో, ఎలుకలు 4 వారాల పాటు టచ్‌స్క్రీన్ వ్యవస్థకు ఆకృతి మరియు కండిషనింగ్ చేయించుకున్నాయి. 14 వారాలలో, టచ్‌స్క్రీన్ షేపింగ్ సమయంలో పనితీరు ఆధారంగా ప్రతిసమతుల్యత కలిగిన నియంత్రణ (CON) లేదా EC- చికిత్స సమూహాలకు (సమూహానికి n = 15) ఎలుకలను కేటాయించారు. జంతువులను ప్రామాణిక నీరు లేదా EC (సిగ్మా, సెయింట్ లూయిస్, MO, USA) తో కూడిన చికిత్సా ద్రవం 0.667 mg ml −1 గా ration తతో నీటిలో కరిగించారు. ప్రతి రోజు తాజా పరిష్కారం తయారు చేయబడింది. నానోడ్రాప్ 2000 (థర్మో సైంటిఫిక్, వాల్తామ్, ఎంఏ, యుఎస్ఎ) ను ఉపయోగించి, అతితక్కువ వైవిధ్యాలను (వరుసగా 0.2% ± 0.3 మరియు 1.4% ± 0.3 తాజా ద్రావణాన్ని గ్రహించడం) ధృవీకరించడానికి 276 ఎన్ఎమ్ వద్ద ఇసి ద్రావణాన్ని 24 మరియు 48 గం తరువాత కొలుస్తారు. EC ఆక్సీకరణానికి. చికిత్స అందుబాటులో ఉంది మరియు రోజుకు సగటున 6 మి.లీ నీటి వినియోగం ఆధారంగా (అంటే రోజూ m 4 మి.గ్రా ఇసి). EC వినియోగం మొత్తం వ్యవధి 14 వారాలు.

టచ్‌స్క్రీన్‌లో ప్రాదేశిక నమూనా విభజన

టచ్‌స్క్రీన్ చాంబర్‌కు జంతువులు ఆకారంలో ఉన్నాయి, వీటిలో ఆరు-విండోల గ్రిడ్ మరియు రివార్డ్ పతనము (లాఫాయెట్ ఇన్స్ట్రుమెంట్స్, లాఫాయెట్, IN, USA), 10 వారాల వయస్సులో 4 వారాల పాటు ఉన్నాయి. ఎలుకలను గదికి 2 రోజులు అలవాటు చేయడం ద్వారా ఆకృతి ప్రారంభమైంది. పావ్లోవియన్ శిక్షణ, 1-హెచ్ సెషన్, జంతువులకు ఉద్దీపన పరస్పర చర్యను (అంటే ముక్కు ఒక ప్రకాశవంతమైన గ్రిడ్ చతురస్రాన్ని) ఒక స్వరం యొక్క శబ్దం మరియు ద్రవ బహుమతి (స్ట్రాబెర్రీ పాలు, నెస్క్విక్, వేవే, స్విట్జర్లాండ్) తో అనుసంధానించడానికి నేర్పింది. . రివార్డ్ ప్రెజెంటేషన్‌ను ప్రారంభించడానికి తరువాతి 3-రోజుల 'తప్పక తాకాలి' దశ ఉద్దీపన పరస్పర చర్య అవసరం. 'తప్పక ప్రారంభించాలి' శిక్షణ ఎలుకలకు ముక్కు దూర్పు ద్వారా తదుపరి ట్రయల్‌ను రివార్డ్ పతనానికి ప్రారంభించమని నేర్పింది. 'తప్పుగా శిక్షించడం' సమయంలో, ఆకృతి యొక్క చివరి దశ, ఉద్దీపన కాని గ్రిడ్ చతురస్రాలతో సంకర్షణ చెందడానికి ఒక విరక్తి ఇంటి కాంతిని విలోమం చేయడం ద్వారా మరియు ట్రయల్ పున umption ప్రారంభానికి ముందు స్వల్పకాలిక వ్యవధిని విధించడం ద్వారా చొప్పించబడింది.

షేపింగ్ తరువాత 14 వారాల వయస్సులో EC పరిపాలన ప్రారంభమైంది. అప్పుడు ఎలుకలు 5 రోజుల టాస్క్ ట్రైనింగ్‌లో పాల్గొన్నాయి. ఈ దశలో ప్రమాణాన్ని చేరుకోవడానికి, వరుసగా ఎనిమిది ప్రయత్నాలలో ఏడు ఒకేలా కాని ప్రాదేశికంగా వివిక్త ఉద్దీపనల నుండి సరైన (అనగా ద్రవ బహుమతిని ప్రేరేపించడానికి ప్రోగ్రామ్ చేయబడిన) ఎంపికను ఎంచుకోవలసి ఉంటుంది. తరువాతి దశకు చేరుకోవటానికి, వరుసగా నాలుగు రోజుల శిక్షణలో మూడు సమయంలో సబ్జెక్టులు కనీసం ఒక్కసారైనా ప్రమాణాన్ని పొందవలసి ఉంటుంది. ప్రోబ్ ట్రయల్స్ యొక్క వరుస 16 రోజుల విరామంలో, టాస్క్ ట్రైనింగ్ కంటే పెద్ద మరియు చిన్న దూరాలతో వేరు చేయబడిన ఉద్దీపనలతో జంతువులు ప్రినోమినేట్ ప్రమాణానికి చేరుకోవడానికి ప్రయత్నించాయి. అన్ని టచ్‌స్క్రీన్ ప్రోటోకాల్‌లు గతంలో వివరించిన విధంగా ప్రదర్శించబడ్డాయి. 44

ఆందోళన పరీక్షలు

ఓపెన్ ఫీల్డ్ . ఎలుకలను ఒక్కొక్కటిగా ఓపెన్-ఫీల్డ్ (OF) అరేనాలో (27.3 × 27.3 సెం.మీ., ఎత్తు 20.3 సెం.మీ.) ధ్వని-అటెన్యూటింగ్ క్యూబికల్ (మెడ్ అసోసియేట్స్, సెయింట్ ఆల్బన్స్, విటి, యుఎస్ఎ) లో ఉంచారు మరియు స్వేచ్ఛగా వెళ్ళడానికి అనుమతించారు. ట్రయల్స్ 30 నిమిషాలు కొనసాగాయి. జంతు కదలిక మరియు సంచిత మార్గం పొడవు మూడు 16-బీమ్ పరారుణ శ్రేణి ద్వారా స్వయంచాలకంగా ట్రాక్ చేయబడతాయి మరియు కార్యాచరణ మానిటర్ సాఫ్ట్‌వేర్ (వెర్షన్ 4.0, మెడ్ అసోసియేట్స్) ద్వారా రికార్డ్ చేయబడ్డాయి.

ఎలివేటెడ్ ప్లస్ చిట్టడవి . జంతువులను ఒక్కొక్కటిగా 60 సెంటీమీటర్ల ఎత్తైన స్టాండ్‌లో ఎలివేటెడ్ ప్లస్ మేజ్ (ఇపిఎం) (ఆన్-సైట్‌లో నిర్మించారు, వైట్ ప్లెక్సిగ్లాస్, టోటల్ ప్లాస్టిక్స్, బాల్టిమోర్, ఎమ్‌డి, యుఎస్‌ఎతో తయారు చేశారు) మధ్యలో ఉంచారు, ప్రతి చేయి 30 సెం.మీ × 5 సెం.మీ., మూసివేసిన చేతుల గోడ 16 సెం.మీ ఎత్తు, 5 సెం.మీ × 5 సెం.మీ సెంటర్ ప్లాట్‌ఫాం) మరియు 5 నిమిషాలు స్వేచ్ఛగా అన్వేషించడానికి అనుమతించబడుతుంది. ఓపెన్ మరియు క్లోజ్డ్ చేతుల్లో గడిపిన సమయాన్ని వీడియో ట్రాకింగ్ సాఫ్ట్‌వేర్ (ANY-maze, Stoelting, Wood Dale, IL, USA) ద్వారా సెమియాటోమాటిక్ పద్ధతిలో నమోదు చేశారు.

అడల్ట్ న్యూరోజెనిసిస్ హిస్టాలజీ

BrdU ఇమ్యునోహిస్టోకెమిస్ట్రీ మరియు సెల్ గణనలు . ఉచిత-తేలియాడే విభాగాల (40 μm) ఒకటి-ఆరు సిరీస్ ట్రిస్-బఫర్డ్ సెలైన్ (టిబిఎస్) లో కడుగుతారు మరియు ఎండోజెనస్ పెరాక్సిడేస్లను అణచివేయడానికి 30 నిమిషాలకు 0.6% H 2 O 2 తో ముందే పొదిగేది. ప్రక్షాళన చేసిన తరువాత, విభాగాలు 2 N HCl లో 37 ° C వద్ద 30 నిమిషాలు DNA ని సూచించడానికి పొదిగేవి మరియు తరువాత గది ఉష్ణోగ్రత వద్ద 0.1 M బోరేట్ బఫర్‌లో తటస్థీకరించబడతాయి. బాగా కడిగిన తరువాత, విభాగాలు గది ఉష్ణోగ్రత వద్ద 30 నిమిషాలు TBS ++ (3% గాడిద సీరం, 0.05 M ట్రిస్-బఫర్డ్ సెలైన్, 0.5% ట్రిటాన్-ఎక్స్ 100) తో నిరోధించబడ్డాయి మరియు ఎలుక యాంటీ బ్రూడూ (1: 200, ఖచ్చితమైన కెమికల్, వెస్ట్‌బరీ, NY, USA) రాత్రిపూట 4. C వద్ద. ఆ తరువాత, విభాగాలు బయోటిన్-ఎస్పి-కంజుగేటెడ్ గాడిద యాంటీ ఎలుక ఐజిజి (1: 250, జాక్సన్ ఇమ్యునో రీసెర్చ్, వెస్ట్ గ్రోవ్, పిఎ, యుఎస్ఎ) లో కడిగి, తరువాత ఎబిసి రియాజెంట్‌లో 2 గం (వెక్టస్టైన్ ఎలైట్; వెక్టర్ లాబొరేటరీస్, బర్లింగేమ్, CA, USA). BrdU ను కలుపుకున్న కణాలను దృశ్యమానం చేయడానికి ఈ విభాగాలు 5 నిముషాల పాటు 3, 3-డైమినోబెంజిడిన్ (సిగ్మా) తో కలుపుతారు. రోడ్రోకాడల్ కణిక కణ పొర వద్ద ప్రారంభమయ్యే జంతువుకు ఆరు విభాగాలలో BrdU- పాజిటివ్ కణాలు × 20 లక్ష్యం (ఒలింపస్, BX51, సెంటర్ వ్యాలీ, PA, USA) ద్వారా ఒకటి-ఆరు-వరుస విభాగాలలో (240 μm వేరుగా) లెక్కించబడ్డాయి. గతంలో వివరించినట్లు. 44

డబుల్-ఇమ్యునోఫ్లోరోసెన్స్ స్టెయినింగ్ మరియు కొత్త సెల్ ఫినోటైప్ విశ్లేషణ . పైన వివరించిన డీనాటరేషన్, న్యూట్రలైజేషన్, వాషింగ్ మరియు బ్లాక్ స్టెప్స్ తరువాత, ఫ్రీ-ఫ్లోటింగ్ విభాగాలు (1:12 సిరీస్, 480 apartm వేరుగా) ప్రాధమిక ప్రతిరోధకాలు, యాంటీ-ఎలుక BrdU (1: 100, ఖచ్చితమైన కెమికల్) మరియు న్యూరానల్ మార్కర్‌తో కలిసి పొదిగేవి. యాంటీ-మౌస్ న్యూయున్ (1: 100, మిల్లిపోర్, బిల్లెరికా, ఎంఏ, యుఎస్ఎ) 72 గంటలకు 4. C వద్ద. తరువాత, గది ఉష్ణోగ్రత వద్ద 2 గం వరకు గాడిద యాంటీ ఎలుక అలెక్సా ఫ్లోర్ 488 (1: 250, థర్మో ఫిషర్, వాల్తామ్, ఎంఏ, యుఎస్ఎ) మరియు గాడిద యాంటీ-మౌస్ సై 3 (1: 250, జాక్సన్ ఇమ్యునో రీసెర్చ్) తో విభాగాలు సహ-పొదిగేవి. ప్రతి జంతువుకు DG లోని ముప్పై BrdU + కణాలు యాదృచ్ఛికంగా ఎంపిక చేయబడ్డాయి మరియు సమలక్షణ విశ్లేషణ (ఒలింపస్ FV1000) కోసం చిత్రీకరించబడ్డాయి. BrdU + / NeuN + కణాల శాతం లెక్కించబడింది.

వెస్ట్రన్ బ్లాటింగ్

న్యూరోట్రోఫిన్లు, వాటి గ్రాహకాలు, కైనేసులు, ట్రాన్స్క్రిప్షన్ కారకాలు మరియు న్యూరోట్రాన్స్మిటర్ల యొక్క సాపేక్ష వ్యక్తీకరణపై దాని ప్రభావాలను నిర్ణయించడానికి సమ్మేళనం యొక్క వివో అడ్మినిస్ట్రేషన్ నుండి పొందిన నమూనాలలో ఇమ్యునోబ్లోటింగ్ ఉపయోగించబడింది. 14 వారాలపాటు సమ్మేళనాన్ని తీసుకున్న ఎలుకల ఎడమ అర్ధగోళాల నుండి తీసుకోబడిన కార్టిసెస్ మరియు హిప్పోకాంపి బ్రాడ్‌ఫోర్డ్ అస్సే (లిసిస్ బఫర్: RIPA లైసిస్ బఫర్ (మిల్లిపోర్) ద్వారా పూర్తి అల్ట్రా టాబ్లెట్లతో (రోచె, బాసెల్, స్విట్జర్లాండ్) సజాతీయమైంది మరియు లెక్కించబడ్డాయి. సజాతీయ కణజాలం నుండి ముప్పై మైక్రోగ్రాముల ప్రోటీన్ ఉడకబెట్టడం ద్వారా పాలియాక్రిలమైడ్ జెల్ మీద వేరుచేయబడింది. అప్పుడు ప్రోటీన్లు ఇమ్మోబిలోన్-ఎఫ్ఎల్ పొరలకు (మిల్లిపోర్) బదిలీ చేయబడ్డాయి, వీటిని కుందేలు యాంటీ β- ట్యూబులిన్ (1: 2500, లి-కోర్ బయోసైన్సెస్, లింకన్, ఎన్ఇ, యుఎస్ఎ), కుందేలు యాంటీ-అక్ట్, కుందేలు యాంటీ-ఫాస్ఫో- అక్ట్ (1: 1000, సెల్ సిగ్నలింగ్ టెక్నాలజీస్, డాన్వర్స్, ఎంఏ, యుఎస్ఎ), కుందేలు యాంటీ-ఫాస్ఫో-ఇఆర్కె 1/2, మౌస్ యాంటీ-ఇఆర్కె 1/2, మౌస్ యాంటీ-క్రెబ్, రాబిట్ యాంటీ-ఫాస్ఫో-క్రెబ్ (1: 1000, శాంటా క్రజ్ బయోటెక్నాలజీస్, శాంటా క్రజ్, సిఎ, యుఎస్ఎ), కుందేలు యాంటీ ఎంఓఓ-బి (1: 3000, సిగ్మా ఆల్డ్రిచ్), మేక యాంటీ ఎంఓఓ-ఎ (1: 1000, శాంటా క్రజ్ బయోటెక్నాలజీస్), మౌస్ యాంటీ-ప్రో-బిడిఎన్ఎఫ్ (1: 7500, జీన్‌కోపోయియా, రాక్‌విల్లే, ఎండి, యుఎస్‌ఎ), కుందేలు యాంటీ బిడిఎన్‌ఎఫ్ (1: 500, శాంటా క్రజ్ బయోటెక్నాలజీస్), కుందేలు యాంటీ టైరోసిన్ హైడ్రాక్సిలేస్ (1: 200, అబ్కామ్, కేంబ్రిడ్జ్, ఎంఏ, యుఎస్‌ఎ), మరియు కుందేలు వ్యతిరేక -గ్లైసెరాల్డిహైడ్ -3-ఫాస్ఫేట్ డీహైడ్రోజినేస్ (GADPH, 1: 1000, సిగ్మా ఆల్డ్రిచ్). పొరలను 800 CW ఫ్లోరోసెంట్ మేక యాంటీ-మౌస్ లేదా యాంటీ రాబిట్ IRDye (1:15 000) తో ట్యాగ్ చేశారు, ఒడిస్సీఆర్ ఇన్ఫ్రారెడ్ ఇమేజర్ (లి-కోర్ బయోసైన్సెస్, లింకన్, NE, USA) లో చదివి, ఒడిస్సీ 2.0 సాఫ్ట్‌వేర్ ( లి-కోర్ బయోసైన్సెస్). ప్రెసిషన్ ప్లస్ ప్రోటీన్ నిచ్చెన (బయో-రాడ్, హెర్క్యులస్, సిఎ, యుఎస్ఎ) ను మార్కర్‌గా ఉపయోగించారు.

గణాంక విశ్లేషణ

ప్రవర్తనా, ఇమ్యునోహిస్టోలాజికల్ మరియు ఇమ్యునోబ్లోటింగ్ ప్రయోగాలకు విద్యార్థుల టి -టెస్ట్ 0.05 యొక్క పి- వాల్యూ కటాఫ్‌తో ఉపయోగించబడింది. అన్ని గణాంక విశ్లేషణలు స్టాట్‌వ్యూ (అబాకస్ కార్పొరేషన్, బాల్టిమోర్, MD, USA) ఉపయోగించి జరిగాయి.

ఫలితాలు

(-) ప్రాదేశిక నమూనా విభజనపై EC ప్రభావం చూపదు

టచ్‌స్క్రీన్‌లో నమూనా-విభజన పనిలో ఎలుకలకు శిక్షణ ఇచ్చారు. [44] టచ్‌స్క్రీన్‌లో ప్రోటోకాల్‌లను రూపొందించిన 1 నెల తరువాత, ఎలుకలకు (సమూహానికి n = 15) ప్రామాణిక తాగునీరు లేదా ప్రయోగాల వ్యవధికి EC తో భర్తీ చేయబడిన నీరు ఇవ్వబడింది (మూర్తి 1a). జంతువుల బరువులు నెలవారీ వ్యవధిలో తీసుకోబడ్డాయి మరియు ఫ్లేవానాల్ చికిత్స ప్రారంభంలో (CON: 19.66 ± 0.29 గ్రా; EC: 19.43 ± 0.26 గ్రా) లేదా ముగింపు (CON: 27.0 ± 0.36 గ్రా; EC: 26.71 ± 0.39 గ్రా ) అధ్యయనం ( పి > 0.34).

Image

సరళి విభజన మరియు వయోజన హిప్పోకాంపల్ న్యూరోజెనిసిస్. ( ) ప్రయోగాల కాలక్రమం (టిఎస్, టచ్‌స్క్రీన్; టిటి, టాస్క్ ట్రైనింగ్; పిటి, ప్రోబ్ ట్రయల్స్; బి, బ్రూడూ ఇంజెక్షన్లు; ఆఫ్, ఓపెన్ ఫీల్డ్; ఇపిఎం, ఎలివేటెడ్ ప్లస్ మేజ్; w, వారాల వయస్సు). ( బి ) రెండు సారూప్య ఉద్దీపనల మధ్య పెద్ద మరియు చిన్న విభజన యొక్క టచ్‌స్క్రీన్ నమూనా నియంత్రణ (CON) మరియు (-) ఎపికాటెచిన్ (EC) చికిత్స చేయబడిన ఎలుకలలో పరీక్షించబడింది, వీటిని ఎనిమిది ప్రయత్నాలలో ఏడు సరిగ్గా నిర్వహించిన ప్రమాణానికి చేరుకోవడానికి శిక్షణ ఇవ్వబడింది. . ఉద్దీపనల మధ్య విభజన పెద్దది లేదా చిన్నది అయినప్పుడు నమూనా విభజన CON మరియు EC సమూహాల మధ్య తేడా లేదు. ( సి ) బ్రోమోడెక్యూరిడిన్ (BrdU) -పాజిటివ్ సెల్ సంఖ్య సమూహాల మధ్య తేడా లేదు. ( d ) కొత్త DG న్యూరాన్ల శాతం CON మరియు EC- చికిత్స చేసిన ఎలుకల మధ్య తేడాలు చూపించలేదు. ( E ) CON మరియు ( f ) EC- చికిత్స చేసిన విషయాల నుండి పొందిన కణజాలంలో, చివరి BrdU ఇంజెక్షన్ తర్వాత 9 వారాల తర్వాత కొత్త కణాల ఫోటోమిగ్రోగ్రాఫ్‌లు. ( G ) CON మరియు ( h ) EC- చికిత్స చేసిన ఎలుకలలో BrdU (ఆకుపచ్చ) మరియు న్యూయున్ (ఎరుపు) కోసం డబుల్ లేబులింగ్ ద్వారా న్యూరోనల్ ఫినోటైప్ నిర్ణయించబడింది. లోపం బార్లు సెమ్‌ను సూచిస్తాయి

పూర్తి పరిమాణ చిత్రం

ఆకృతి వ్యవధి తరువాత, సబ్జెక్టులు 6 రోజుల పని శిక్షణ పొందాయి, దీనిలో వారు ద్రవ బహుమతిని పొందటానికి దృశ్యపరంగా ఒకేలా, ప్రాదేశికంగా వివిక్త ఉద్దీపనల మధ్య వివక్ష చూపారు. ప్రతి సమూహం పని శిక్షణ పూర్తి చేయడానికి అవసరమైన సగటు రోజులలో తేడాలు కనుగొనబడలేదు (CON, 3.6 ± 0.16 రోజులు; EC, 3.6 ± 0.19 రోజులు; P = 1.00). పెద్ద మరియు చిన్న విభజనలను పరీక్షించడం మధ్య ప్రత్యామ్నాయంగా ఉన్న ప్రోబ్ ట్రయల్స్ సమయంలో, EC మరియు CON సహకారాలు పనితీరులో తేడాలు లేవు [చిన్న విభజన: CON, 49.04 ± 3.72; EC, 51.29 ± 4.02 ట్రయల్స్ టు క్రైటీరియన్ ( t (28) = 1.17, P > 0.70); పెద్ద విభజన: CON, 29.92 ± 2.30; EC, 26.11 ± 1.73 ట్రయల్స్ టు ప్రమాణం ( t (28) = 0.38, P > 0.25%], (మూర్తి 1 బి). మొత్తంమీద, ఈ డేటా డిజి-సంబంధిత నమూనా-విభజన పనితీరుపై EC యొక్క ఎంపిక ప్రభావం లేదని సూచిస్తుంది.

(-) EC వయోజన న్యూరోజెనిసిస్‌ను ప్రభావితం చేయదు

హిప్పోకాంపల్ నవజాత కణాల మనుగడలో (-) EC పరిపాలన పాత్ర ఉందో లేదో తెలుసుకోవడానికి, 18 వారాల వయస్సులో 5 రోజులు ఎలుకలను ప్రతిరోజూ BrdU తో ఇంజెక్ట్ చేశారు. కుడి DG లోని పోస్ట్‌మార్టం, ఇమ్యునోహిస్టోకెమికల్ స్టెయినింగ్ మరియు బ్రూడూ-లేబుల్ కణాల పరిమాణాన్ని చేపట్టారు (CON, 409 ± 42 కణాలు, n = 9; EC, 397 ± 32 కణాలు, n = 10; గణాంకాలు 1 సి, ఇ మరియు ఎఫ్). నవజాత నవజాత డిజి కణాల సంఖ్యలో తేడా కనిపించలేదు ( t (17) = 0.23, పి > 0.82). అదనంగా, న్యూరానల్ ఫినోటైప్ కోసం BrdU మరియు NeuN (CON, n = 6; EC, n = 6) యొక్క సహ-వ్యక్తీకరణ విశ్లేషణ జరిగింది. BrdU / NeuN- పాజిటివ్ కణాల శాతం ( t (10) = 0.65, P > 0.53; గణాంకాలు 1d, g మరియు h) సమూహాల మధ్య తేడా లేదు. న్యూరోజెనిక్ ప్రభావం లేకపోవడం ప్రాదేశిక నమూనా విభజనలో (-) EC వినియోగం ద్వారా మార్పు లేకపోవడం గమనించవచ్చు.

OF మరియు EPM ప్రవర్తనపై (-) EC పరిపాలన యొక్క ప్రభావాలు

గ్రీన్-టీ ఫ్లేవనోల్స్ 9 మరియు కోకో ఫ్లేవనాయిడ్ల కోసం నివేదించిన మాదిరిగానే యాంజియోలైటిక్ ప్రభావాలను EC కలిగి ఉందో లేదో తెలుసుకోవడానికి, 29 ఎలుకలను OF పారాడిగ్మ్‌లో 30 నిమిషాలు పరీక్షించారు. ప్రతి సమిష్టి ప్రయాణించిన మొత్తం దూరం మధ్య గణనీయమైన తేడా కనుగొనబడలేదు [CON, 102.8 m ± 5.1 m; EC, 100.4 m ± 5.5 m; ( t (28) = 0.29, పి > 0.77)]. ఏది ఏమయినప్పటికీ, CON సమూహంతో పోలిస్తే EC- చికిత్స జంతువులలో అంచులోని సమయంతో పోలిస్తే క్షేత్రంలోని మధ్య ప్రాంతంలో గడిపిన సమయం నిష్పత్తి గణనీయంగా ఎక్కువగా ఉంది [CON, 0.203 ± 0.009; EC, 0.249 ± 0.01 ( t (28) = 3.59, P <0.002)], అలాగే అంచున ఉన్న దూరంతో పోలిస్తే మధ్య ప్రాంతంలో ప్రయాణించిన దూరం యొక్క నిష్పత్తి [CON, 0.097 ± 0.006; EC, 0.119 ± 0.008 ( టి (28) = 2.31, పి <0.03)], (గణాంకాలు 2 ఎ మరియు బి). EC వినియోగం ఆందోళనను తగ్గిస్తుందని OF డేటా సూచిస్తుంది.

Image

మానసిక స్థితికి సంబంధించిన ప్రవర్తనా మరియు సెల్యులార్ పరీక్షలు. ( - సి ) బహిరంగ క్షేత్రంలో (ఆఫ్) మరియు ఎలివేటెడ్ ప్లస్ మేజ్ (ఇపిఎం) లో ఆందోళన జరిగింది. ( ) 7 వారాల (-) ఎపికాటెచిన్ (ఇసి) వినియోగం తరువాత 30 నిమిషాలు జంతువులను OF చాంబర్ లోపల ఉంచారు. చాంబర్ మధ్యలో EC సబ్జెక్టులు ప్రయాణించే సమయం మరియు దూరం (DIST) యొక్క నిష్పత్తి, అంచుకు సంబంధించి, నియంత్రణలు (CON) కంటే గణనీయంగా ఎక్కువ. ( బి ) OF లో ప్రయాణించిన మొత్తం దూరం సమూహాల మధ్య తేడా లేదు. ( సి ) EPM లో, EC వినియోగించే సబ్జెక్టులు ఓపెన్ లేదా క్లోజ్డ్ చేతుల మధ్య ఎటువంటి ప్రాధాన్యతను ప్రదర్శించవు, అయితే CON జంతువులు ఓపెన్ చేతుల్లో కంటే క్లోజ్డ్ చేతుల్లో ఎక్కువ సమయం గడిపాయి. ( d మరియు e ) టైరోసిన్ హైడ్రాక్సిలేస్ (TH), మోనోఅమైన్ ఆక్సిడేస్ (MAO) -A మరియు MAO-B ల కొరకు హిప్పోకాంపి మరియు కార్టిసెస్ పరీక్షించబడ్డాయి. ( డి ) EC- తినే జంతువులు TH యొక్క హిప్పోకాంపల్ వ్యక్తీకరణను గణనీయంగా చూపించాయి. ( ) EC- అనుబంధ జంతువుల కోర్టిసెస్‌లో TH యొక్క పెరిగిన వ్యక్తీకరణ మరియు MAO-A లో తగ్గింపు గమనించబడింది (* P <0.05). GADPH, గ్లైసెరాల్డిహైడ్ -3-ఫాస్ఫేట్ డీహైడ్రోజినేస్. లోపం బార్లు సెమ్‌ను సూచిస్తాయి

పూర్తి పరిమాణ చిత్రం

ఈ ఫలితాలకు EPM ట్రయల్స్‌లో సబ్జెక్ట్ మూల్యాంకనం యొక్క ఫలితం మద్దతు ఇచ్చింది, ఇది ఆందోళన లాంటి ప్రవర్తనను అంచనా వేయడానికి ఒక పరీక్ష. 45 నిమిషాల వ్యవధిలో EPM లో ఎలుకలను పరిశీలించారు. CON జంతువులు ఓపెన్ చేతుల్లో కంటే చిట్టడవి యొక్క మూసివేసిన చేతుల్లో ఎక్కువ సమయం గడిపారు [ఓపెన్ చేతులు, 90.2 ± 6.1 సె; క్లోజ్డ్ ఆర్మ్స్, 126.8 ± 6.5 సె ( టి (28) = 4.11, పి <0.0003)]. మరోవైపు, EC- చికిత్స ఎలుకలు, ఓపెన్ మరియు క్లోజ్డ్ చేతుల్లో సమాన సమయాన్ని గడిపాయి [ఓపెన్ చేతులు, 103.2 ± 6.8 సె; మూసిన చేతులు, 112.3 ± 6.1 సె; ( t (28) = 1.005, పి > 0.32)], (మూర్తి 2 సి). మొత్తంగా, (-) EC అన్వేషణాత్మక ప్రవర్తనను ప్రోత్సహించే యాంజియోలైటిక్ వలె పనిచేస్తుంది.

EC వినియోగం మూడ్-సంబంధిత ప్రోటీన్ల వ్యక్తీకరణను మాడ్యులేట్ చేస్తుంది

మూడ్ డిజార్డర్స్ చికిత్సలు సాధారణంగా మెదడులో మోనోఅమైన్స్ (నోర్పైన్ఫ్రైన్, సెరోటోనిన్ మరియు డోపామైన్) లభ్యతను పెంచాలని లక్ష్యంగా పెట్టుకుంటాయి. మోనోఅమినెర్జిక్ మెకానిజమ్స్ ద్వారా EC యొక్క ప్రభావాలు మధ్యవర్తిత్వం వహించాయో లేదో తెలుసుకోవడానికి, మేము సజాతీయ హిప్పోకాంపల్ మరియు కార్టికల్ టిష్యూ (CON, n = 5–7; EC, n = 5–7) తో ఇమ్యునోబ్లోటింగ్ ప్రయోగాలు చేసాము. EC వినియోగం హిప్పోకాంపస్ (1.51 రెట్లు EC / CON; t (12) = 2.63, P <0.03) మరియు కార్టెక్స్ (1.79 రెట్లు EC / CON; t (12) = 3.22, P <రెండింటిలోనూ టైరోసిన్ హైడ్రాక్సిలేస్ (TH) స్థాయిలను పెంచింది. 0.01), (గణాంకాలు 2 డి మరియు ఇ). సెరోటోనిన్, నోర్పైన్ఫ్రైన్ మరియు డోపామైన్లను జీవక్రియ చేసే మోనోఅమైన్ ఆక్సిడేస్-ఎ (MAO-A) యొక్క వ్యక్తీకరణలో తగ్గుదల కార్టెక్స్‌లో (0.69 రెట్లు, టి (11) = 2.22, పి <0.05) EC- తినే జంతువులతో పోలిస్తే గమనించబడింది. CON సమూహాలు, కానీ హిప్పోకాంపిలో కాదు (0.92 రెట్లు EC / CON; t (12) = 1.08, P > 0.30), అయితే డోపామైన్‌ను జీవక్రియ చేసే MAO-B, హిప్పోకాంపస్ ( t (11) = 1.31, పి > 0.21) మరియు కార్టెక్స్ ( టి (11) = 0.48, పి > 0.64), (గణాంకాలు 2 డి మరియు ఇ). మోనోఅమినెర్జిక్ న్యూరోట్రాన్స్మిటర్ సంశ్లేషణను పెంచడం ద్వారా మరియు వాటి ఎంజైమాటిక్ క్షీణతను ఏకకాలంలో నిరోధించడం ద్వారా EC తీసుకోవడం మానసిక స్థితిని మాడ్యులేట్ చేస్తుందని ఈ డేటా మొత్తం సూచిస్తుంది.

EC హిప్పోకాంపల్ ప్రో-బిడిఎన్ఎఫ్ మరియు పరిపక్వ బిడిఎన్ఎఫ్ ప్రోటీన్ స్థాయిలను పెంచుతుంది

BDNF (ప్రో-బిడిఎన్ఎఫ్) మరియు పరిణతి చెందిన బిడిఎన్ఎఫ్ యొక్క పూర్వగామి గమనించిన యాంజియోలైటిక్ ప్రభావాలను తక్షణం చేయవచ్చో లేదో తెలుసుకోవడానికి, మేము సజాతీయ హిప్పోకాంపల్ మరియు కార్టికల్ టిష్యూ (CON, n = 5–7; EC, n = 5–7) తో ఇమ్యునోబ్లోటింగ్ ప్రయోగాలు చేసాము. EC తో చికిత్స పొందిన జంతువుల నుండి హిప్పోకాంపల్ కణజాలం గణనీయంగా ఎక్కువ BDNF అనుకూల (1.74 రెట్లు; t (11) = 2.58, P <0.03) మరియు పరిపక్వ BDNF (1.34 రెట్లు; t (12) = 2.19, P <0.05) CON సమూహంతో పోలిస్తే (మూర్తి 3 ఎ). అయినప్పటికీ, న్యూరోట్రోఫిన్ ప్రోటీన్లు కార్టెక్స్‌లో మార్చబడలేదు (మూర్తి 3 బి), BDNF యొక్క మాడ్యులేషన్ హిప్పోకాంపస్‌కు ప్రత్యేకమైనదని సూచిస్తుంది. BDNF సిగ్నలింగ్ మార్గంపై EC యొక్క ప్రభావాలను మరింత పరిశోధించడానికి, మేము ప్రోటీన్ కినేస్ B (Akt), ఎక్స్‌ట్రాసెల్యులర్-సిగ్నల్-రెగ్యులేటెడ్ కినేస్ 2 (ERK2) మరియు cAMP స్పందన ఎలిమెంట్-బైండింగ్ ప్రోటీన్ (CREB) ఫాస్ఫోరైలేషన్ స్థాయిలను విశ్లేషించాము. EC తీసుకోవడం హిప్పోకాంపస్‌లో (1.47 రెట్లు; టి (12) = 2.20, పి <0.05; మూర్తి 3 సి) మరియు కార్టెక్స్‌లో (2.33 రెట్లు; టి (11) = 2.79, పి <0.02 ; మూర్తి 3 డి). PERK2 [హిప్పోకాంపస్ ( t (12) = 0.58, P > 0.57); కార్టెక్స్ ( టి (11) = 0.14, పి > 0.89)] లేదా పిసిఆర్‌ఇబి [హిప్పోకాంపస్ ( టి (12) = 0.37, పి > 0.72); కార్టెక్స్ ( t (12) = 1.32, పి > 0.21)] EC తీసుకోవడం ద్వారా సవరించబడింది (గణాంకాలు 3 ఇ మరియు ఎఫ్).

Image

న్యూరోట్రోఫిన్ మెదడు-ఉత్పన్నమైన న్యూరోట్రోఫిక్ కారకం (BDNF) మరియు సంబంధిత సిగ్నలింగ్ పాత్వే ప్రోటీన్లు. ( మరియు బి ) ప్రవర్తనాత్మకంగా పరీక్షించిన జంతువుల నుండి పొందిన హిప్పోకాంపల్ మరియు కార్టికల్ కణజాలం యొక్క ఇమ్యునోబ్లోటింగ్. ( ) (-) ఎపికాటెచిన్ (ఇసి) - హిప్పోకాంపస్‌లోని BDNF అనుకూల మరియు BDNF ప్రోటీన్ల యొక్క అధిక వ్యక్తీకరణను జంతువులు గుర్తించాయి. ( బి ) కార్టెక్స్‌లో వృద్ధి కారకాల స్థాయిలు మారలేదు. ( సి మరియు డి ) నియంత్రణ సమూహానికి సంబంధించి హిప్పోకాంపస్ మరియు కార్టెక్స్‌లో pAkt యొక్క వ్యక్తీకరణను EC పెంచింది. ( మరియు ఎఫ్ ) హిప్పోకాంపస్ మరియు కార్టెక్స్‌లో EC తీసుకోవడం ద్వారా PERK2 లేదా pCREB స్థాయిలు సవరించబడలేదు. (* పి <0.05). లోపం బార్లు సెమ్‌ను సూచిస్తాయి

పూర్తి పరిమాణ చిత్రం

చర్చా

ఈ అధ్యయనంలో, EC వినియోగం OF మరియు EPM లో ఆందోళనను తగ్గించిందని మేము చూపించాము. ఈ ప్రవర్తనా మార్పులు సంబంధిత సిగ్నలింగ్ మార్గాల్లో మార్పులకు కారణమని చెప్పవచ్చు. ప్రత్యేకంగా, EC తీసుకోవడం ఏకకాలంలో హిప్పోకాంపల్ మరియు కార్టికల్ టిహెచ్ స్థాయిలను పెంచింది మరియు కార్టికల్ MAO-A ఉత్పత్తిని తగ్గించింది, కాని MAO-B కాదు. మోనోఅమైన్ స్థాయిలు పెరగడం EC- అనుబంధ జంతువుల హిప్పోకాంపిలో అనుకూల BDNF మరియు BDNF ప్రోటీన్ స్థాయిలలో గమనించవచ్చు. అదనంగా, హిప్పోకాంపస్ మరియు కార్టెక్స్ రెండింటిలో pAKT స్థాయిలు పెరిగాయి, కాని pCREB లేదా PERK కాదు. వయోజన హిప్పోకాంపల్ న్యూరోజెనిసిస్ మరియు ప్రాదేశిక నమూనా విభజన మారలేదు, ఈ ఫ్లేవానాల్ యొక్క చర్య యొక్క న్యూరోజెనిక్ యంత్రాంగాన్ని సూచిస్తుంది. మొత్తంగా, మా డేటా EC కి యాంజియోలైటిక్ సమ్మేళనం వలె మద్దతునిస్తుంది, ఇది ఏకకాలంలో బహుళ పరిపూరకరమైన సెల్ సిగ్నలింగ్ మార్గాలను ప్రభావితం చేస్తుంది.

సరళి విభజన, ఇది చాలా సారూప్య సంఘటనలు లేదా ఉద్దీపనల యొక్క ప్రత్యేకమైన ఎన్కోడింగ్, [ 46] వయోజన న్యూరోజెనిసిస్ 44 మరియు BDNF ప్రోటీన్ స్థాయిలతో దగ్గరి సంబంధం ఉన్నట్లు భావించబడుతుంది, [ 47] మరియు జ్ఞాపకశక్తి మరియు మానసిక స్థితి నియంత్రణ రెండింటికీ సంబంధించినది. టచ్‌స్క్రీన్ నమూనా-విభజన పనులలో మెరుగుదల లేకపోవడంతో, వయోజన న్యూరోజెనిసిస్‌పై EC ప్రభావం చూపలేదని మా ఫలితాలు సూచిస్తున్నాయి. న్యూరోజెనిక్ ప్రభావం లేకపోవడం మా మునుపటి అధ్యయనం 24 మరియు ఇతరుల ఇటీవలి పరిశోధనలకు అనుగుణంగా ఉంటుంది. [48] కణాల విస్తరణను పెంచడానికి చైనీస్ హెర్బ్ జియాబక్సిన్-టాంగ్ (ఎక్స్‌బిఎక్స్ టి -2) మరియు కర్కుమిన్ వంటి ఇతర ఆహార పాలీఫెనాల్స్ ప్రదర్శించబడ్డాయి. 32, 36, 37, 38, 39 అయినప్పటికీ, ఈ అధ్యయనాలు దీర్ఘకాలిక ఒత్తిడి 32, 36, 38 యొక్క ఎలుకల నమూనాలను ఉపయోగించాయి , న్యూరోజెనిసిస్ యొక్క తక్కువ బేస్లైన్ రేటుతో. ఫ్లేవనాయిడ్లు వాటి యాంటీఆక్సిడెంట్ మరియు యాంటీ ఇన్ఫ్లమేటరీ లక్షణాల ద్వారా ఒత్తిడి మరియు పాథాలజీ యొక్క నమూనాలలో న్యూరోజెనిసిస్ను మెరుగుపరుస్తాయి, కణాల మనుగడ మరియు భేదాన్ని ప్రోత్సహించడానికి ఆక్సీకరణ నష్టాన్ని తగ్గిస్తాయి. అయినప్పటికీ, యువ ఆరోగ్యకరమైన జంతువులలో 3 నెలల సమ్మేళనం వినియోగం తర్వాత న్యూరోజెనిసిస్‌లో ఎటువంటి మార్పు కనిపించలేదు, పాలీఫెనాల్-సుసంపన్నమైన ఆహారం యొక్క ఇతర భాగాలు సంభావ్య న్యూరోజెనిక్ ప్రభావాలకు మధ్యవర్తిత్వం వహించవచ్చని సూచిస్తున్నాయి.

ఆహార పాలిఫెనాల్స్ యొక్క యాంజియోలైటిక్ మరియు యాంటిడిప్రెసెంట్ ప్రభావాలు పెరుగుతున్న అధ్యయనాలలో, మానవులలో 50 మరియు జంతు నమూనాలలో నివేదించబడ్డాయి. 29, 36, 51 పాలిఫెనాల్ తినిపించిన జంతువులలో ఆందోళన-ప్రేరిత ప్రవర్తనలో తగ్గుదల చూపించడానికి EPM ఉపయోగించబడింది; ఉదాహరణకు, గ్రీన్ టీ ఆకులతో అనుబంధంగా ఉన్న OF1 ఎలుకలు EPM పరీక్షలో వాటి పనితీరును మెరుగుపర్చాయి. 9 OF మరియు EPM నుండి వచ్చిన మా ఫలితాలు EC డోపామినెర్జిక్ లేదా సెరోటోనెర్జిక్ వ్యవస్థలను ప్రభావితం చేశాయి, యాంజియోలైటిక్ .షధాల యొక్క సాధారణ లక్ష్యాలు. మోనోఅమైన్ సంశ్లేషణకు కీలకమైన ఎంజైమ్ అయిన టిహెచ్, CON కంటే EC- అనుబంధ ఎలుకల కార్టిసెస్ మరియు హిప్పోకాంపిలలో చాలా ఎక్కువ మొత్తంలో ఉత్పత్తి చేయబడిందని ఇమ్యునోబ్లోటింగ్ డేటా చూపించింది. ఈ అన్వేషణ మునుపటి అధ్యయనాలకు అనుగుణంగా ఉంటుంది , విట్రోలో పాలిఫెనాల్-ప్రేరిత TH అధిక ప్రసరణను చూపిస్తుంది , ఉదాహరణకు రోస్మరినస్ అఫిసినాలిస్ యొక్క రోస్మరినిక్ ఆమ్లం , 53 మరియు బ్లాక్ టీ యొక్క టీఫ్లావిన్ చేత C57 ఎలుకలలో వివోలో . [54] అంతేకాకుండా, సినాప్టిక్ సెరోటోనిన్ మరియు డోపామైన్లను డీమినేట్ చేసి, ఉత్ప్రేరకపరిచే ఎంజైమ్ అయిన MAO-A, 55 EC- చికిత్స చేయబడిన ఎలుకల కార్టిసెస్‌లో గణనీయంగా తక్కువ స్థాయిలో వ్యక్తమవుతుందని కనుగొనబడింది. నిజమే, బెర్రీ ఆంథోసైనిన్స్ 56 మరియు అన్‌కారియా రైన్‌కోఫిల్లా, ఫ్లేవనోల్స్‌తో సమృద్ధిగా ఉన్న 57 పదార్దాలు, విట్రోలో MAO లను నిరోధిస్తాయి. ఈ ఫలితాలు EC వినియోగం డోపామైన్ ఉత్పత్తికి దారితీస్తుందని, సినాప్టిక్ డోపామైన్ మరియు సెరోటోనిన్ యొక్క అధిక లభ్యతతో పాటు ఆందోళనను తగ్గించడానికి సహాయపడతాయని సూచిస్తున్నాయి. మా డేటా ఇన్ విట్రో అస్సేస్‌తో స్థిరంగా ఉంటుంది, ఫ్లేవనోల్స్ సెరోటోనెర్జిక్ పనితీరును మెరుగుపరుస్తాయని నిరూపిస్తుంది. 27, 33 (-) ఎపిగాల్లోకాటెచిన్ గాలెట్, కర్కుమిన్ మరియు ట్రాన్స్- రెస్వెట్రాల్ MAO ల యొక్క కార్యకలాపాలను నిరోధించాయని కనుగొనబడింది, తద్వారా ఎలుక మాంద్యం యొక్క పరీక్షలలో పనితీరు పెరుగుతుంది. 26, 50, 58 (-) EC హిప్పోకాంపల్ యాంజియోజెనిసిస్‌ను పెంచుతుందని గమనించాలి, [ 24] బహుశా నైట్రిక్ ఆక్సైడ్ సింథేస్ నియంత్రణ ద్వారా. 59, 60 ఆసక్తికరంగా, నైట్రిక్ ఆక్సైడ్ ఆందోళన మరియు సెరోటోనిన్ రిసెప్టర్ సిగ్నలింగ్ 61 తో ముడిపడి ఉంది మరియు ఈ అధ్యయనంలో గమనించిన ఏకకాల MAO-A నిరోధం మరియు TH నియంత్రణకు అదనంగా మరొక యంత్రాంగం కావచ్చు, ఇది (-) EC యొక్క యాంజియోలైటిక్ ప్రభావాలను మధ్యవర్తిత్వం చేస్తుంది . వివో .

ఎలివేటెడ్ మోనోఅమైన్ స్థాయిలు న్యూరోట్రోఫిన్ స్థాయిలను పెంచవచ్చు. [62 ] డిప్రెషన్ యొక్క న్యూరోట్రోఫిన్ పరికల్పన హిప్పోకాంపస్‌లో BDNF నియంత్రణ ద్వారా యాంటిడిప్రెసెంట్ మరియు యాంజియోలైటిక్ చికిత్సా మందులు వాటి ప్రభావాలను చూపుతాయని పేర్కొంది (సమీక్ష కోసం, మార్టినోవిచ్ మరియు ఇతరులు 63 చూడండి ). రసాయన యాంటిడిప్రెసెంట్స్ యొక్క పరిపాలన ద్వారా హిప్పోకాంపల్ BDNF మెసెంజర్ RNA స్థాయిలు పెరుగుతాయి, 64 మరియు ఎలుకలలో BDNF పరిపాలన ఎలుకలలో నిరాశ-సంబంధిత ప్రవర్తనలను తిప్పికొడుతుంది. 65, 66 కార్టికల్ న్యూరోట్రోఫిన్ స్థాయిల కంటే హిప్పోకాంపల్‌ను EC పెంచడానికి కారణం ప్రస్తుతం అస్పష్టంగా ఉంది. వృద్ధాప్య ఎలుకలలో, EC మరియు (+) కాటెచిన్ మిశ్రమాన్ని కలిగి ఉన్న ఆహారం యొక్క పరిపాలన అదేవిధంగా BDNF మెసెంజర్ RNA స్థాయిలలో హిప్పోకాంపస్‌ను పెంచుతుంది. [13 ] అదనంగా, ఫ్లేవానాల్ కలిగిన ఆహారం ఎలుకలలో హిప్పోకాంపల్ BDNF స్థాయిలను ప్రవర్తనాత్మకంగా పరీక్షించలేదు. ఆసక్తికరంగా, EC పరిపాలన తర్వాత మౌస్ హిప్పోకాంపస్‌లో BDNF అనుకూల స్థాయిలు కూడా గణనీయంగా పెరిగాయని మా డేటా చూపిస్తుంది. మొత్తంగా BDNF అనుకూల పాత్ర, 68 మరియు ముఖ్యంగా నిరాశలో, బాగా అర్థం కాలేదు, [ 69] అయినప్పటికీ, పరిపక్వమైన BDNF స్థాయిలను ఇంకా నిర్వచించబడని యంత్రాంగం ద్వారా పెంచడానికి పూర్వగామిని ప్రాసెస్ చేయడానికి EC కారణమవుతుందని మా డేటా సూచిస్తుంది.

హిప్పోకాంపస్‌లో EC చేత అనుకూల BDNF మరియు BDNF లలో కలిపి పెరుగుదల ఆందోళనను తగ్గిస్తుంది. బిడిఎన్ఎఫ్ యొక్క స్రావం మరియు అక్రమ రవాణాకు ఆటంకం కలిగించే సింగిల్-న్యూక్లియోటైడ్ మ్యుటేషన్ అయిన వాల్ 66 మెట్ పాలిమార్ఫిజం సందర్భంలో EC ని పరీక్షించడం ఆసక్తికరంగా ఉంటుంది. [70] కలుసుకున్న యుగ్మ వికల్పం కోసం పురుషులు హోమోజైగస్ వయోజన నిరాశకు గురవుతారు మరియు క్యారియర్లు కానివారి కంటే తీవ్రమైన లక్షణాలతో బాధపడుతున్నారు; మ్యుటేషన్ సాధారణంగా బాల్యం మరియు వృద్ధాప్య మాంద్యం యొక్క అధిక ప్రమాదంతో సంబంధం కలిగి ఉంటుంది. 35, 71, 72, 73 ఎలుకలు మరియు మానవులలో, ఈ పాలిమార్ఫిజం ఎపిసోడిక్ మెమరీ 70 మరియు విలుప్త అభ్యాసంలో తగ్గుదలకు కారణమవుతుంది, [ 74] అయితే మౌస్ నమూనాలు యాంటిడిప్రెసెంట్స్ ద్వారా ప్లాస్టిసిటీని రక్షించడానికి వక్రీభవనమని రుజువు చేస్తాయి. [75 ] Val66Met మ్యుటేషన్ వల్ల కలిగే ప్రభావాలు దీర్ఘకాలిక EC పరిపాలన యొక్క ప్రతిరోధకాల వద్ద ఉన్నట్లు అనిపిస్తుంది. ఈ అధ్యయనాలు BDNF యొక్క పెరిగిన వ్యక్తీకరణ ఆందోళనను తగ్గిస్తుందని లేదా జ్ఞాపకశక్తిని మెరుగుపరుస్తుందని సూచించనప్పటికీ, హిప్పోకాంపల్ BDNF అనేది EC వినియోగాన్ని జ్ఞానం మరియు మానసిక స్థితికి అనుసంధానించే ఉచ్చారణ బిందువు అని hyp హించడం సమంజసం కాదు. నిజమే, ఫైటోకెమికల్ వినియోగం 13, 24, 76 తో అనుబంధించబడిన మెమరీ పనితీరు మెరుగుదల BDNF మాడ్యులేషన్ ఫలితంగా తగ్గిన ఆందోళన ద్వారా కొంతవరకు మధ్యవర్తిత్వం చేయవచ్చు.

BDNF ఫాస్ఫాటిడైలినోసిటైడ్ -3 కినేస్-ఆధారిత సిగ్నలింగ్‌ను ప్రేరేపిస్తుంది, 77 యాంటిడిప్రెసెంట్ ప్రభావాలకు సంబంధించినది. [78 ] ఈ సిగ్నలింగ్ మార్గంలో ఒక ప్రధాన భాగం ప్రోటీన్ కినేస్ బి (సినాప్టిక్ ప్లాస్టిసిటీ 68 కి ముఖ్యమైనదిగా భావించే కారకం అక్ట్ అని కూడా పిలుస్తారు), ఇది గ్లైకోజెన్ సింథేస్ కినేస్ 3 (జిఎస్కె 3) ను లక్ష్యంగా చేసుకుని నిరోధిస్తుంది. మౌస్ మోడళ్లలో, GSK3 యొక్క అక్ట్-ప్రేరిత నిరోధం ఆందోళన తగ్గింది మరియు నిరాశను అభివృద్ధి చేసే ధోరణిని తగ్గించింది. [79] మా ఇమ్యునోబ్లోటింగ్ ఫలితాలు హిప్పోకాంపి మరియు EC- అనుబంధ ఎలుకలలోని కోర్టిసెస్ రెండింటిలోనూ యాక్టివేట్ అక్ట్‌ను చూపించాయి. ఈ డేటా, BDNF మరియు BDNF అనుకూల పెరుగుదల మరియు ERK మరియు CREB వంటి ఇతర BDNF- ఆధారిత మార్గ మార్గాలలో మార్పు లేకపోవటంతో, హిప్పోకాంపస్‌లోని అక్త్ మార్గం యొక్క BDNF క్రియాశీలత ద్వారా EC యాంజియోలైటిక్ ప్రభావాలను చూపుతుందనే othes హకు మద్దతు ఇస్తుంది. వాస్తవానికి, PIK3-Akt సిగ్నలింగ్ మార్గం యొక్క భాగాలు మరియు లక్ష్యాలను నిశితంగా అధ్యయనం చేయడం వలన హిప్పోకాంపస్ మరియు కార్టెక్స్‌లో వేర్వేరు ఐసోఫామ్‌లు 80 నియంత్రించబడతాయో లేదో తెలుసుకోవడానికి ఆసక్తి ఉంటుంది. ఉదాహరణకు, అక్ట్ 1 బైపోలార్ డిజార్డర్ 81 మరియు పెరుగుదలలో పాల్గొంటుంది. మెదడు అభివృద్ధికి అక్ట్ 3 చాలా ముఖ్యమైనది, [ 83] అయితే ఎలుకలలో ఆందోళన మరియు నిరాశ ప్రవర్తనకు అక్ట్ 2 ప్రధాన ఐసోఫార్మ్‌గా గుర్తించబడింది. వివిధ మెదడు ప్రాంతాలలో EC వినియోగం ద్వారా అక్ట్ ఐసోఫామ్‌ల యొక్క విభిన్న నియంత్రణ ఉందా అని అధ్యయనం చేయడం ఆసక్తికరంగా ఉంటుంది. నిజమే, కార్టెక్స్‌లో అక్ట్ ప్రేరణకు సంబంధించిన విధానం అస్పష్టంగా ఉంది. ధమనుల ఎండోథెలియల్ కణాలు 85 లో వివరించబడిన ఒక నిర్దిష్ట ఫ్లేవానాల్ గ్రాహకం మెదడు 8 లో వ్యక్తీకరించబడవచ్చు మరియు ఆందోళన నియంత్రణలో పాత్రను కలిగి ఉన్న అక్ట్ సిగ్నలింగ్ మార్గాన్ని సక్రియం చేస్తుంది.

మొత్తంమీద, మోనోఅమినెర్జిక్ మరియు న్యూరోట్రోఫిక్ వ్యవస్థల మాడ్యులేషన్ ద్వారా దీర్ఘకాలిక (-) EC పరిపాలన మూడ్-సంబంధిత ప్రయోజనాలను ప్రేరేపిస్తుందని మా పరిశోధనలు సూచిస్తున్నాయి. ఈ పని ఈ ఫ్లేవానాల్ యొక్క పనితీరును వెలికితీసే భవిష్యత్ ప్రయత్నాలకు రాచీగా ఉపయోగపడుతుందని, అలాగే మానవ మానసిక రుగ్మతలను మెరుగుపరచడానికి మరింత సహజమైన మార్గం కోసం బహిరంగ ఎంపికలు ఉపయోగపడతాయని మా ఆశ.