స్కిజోఫ్రెనియా కోసం జంతువుల నమూనా యొక్క ప్రవర్తనా బలహీనతలను ఎర్బ్ ఇన్హిబిటర్స్ మెరుగుపరుస్తాయి: వాటి డోపామైన్-మాడ్యులేటరీ చర్యల యొక్క చిక్కులు | అనువాద మనోరోగచికిత్స

స్కిజోఫ్రెనియా కోసం జంతువుల నమూనా యొక్క ప్రవర్తనా బలహీనతలను ఎర్బ్ ఇన్హిబిటర్స్ మెరుగుపరుస్తాయి: వాటి డోపామైన్-మాడ్యులేటరీ చర్యల యొక్క చిక్కులు | అనువాద మనోరోగచికిత్స

Anonim

విషయము

  • జంతు వ్యాధి నమూనాలు
  • క్లినికల్ ఫార్మకాలజీ
  • మనోవైకల్యం

నైరూప్య

ఎపిడెర్మల్ గ్రోత్ ఫ్యాక్టర్ (ఇజిఎఫ్) మరియు న్యూరేగులిన్ -1 తో సహా ఎర్బిబి గ్రాహకాల కోసం లిగాండ్స్ మిడ్‌బ్రేన్ డోపామినెర్జిక్ న్యూరాన్‌లపై న్యూరోట్రోఫిక్ చర్యను కలిగి ఉంటాయి మరియు స్కిజోఫ్రెనియా యొక్క పాథోఫిజియాలజీలో చిక్కుకున్నాయి. ఎలుక పిల్లలను హిప్పోకాంపల్ గాయం చేయడం ద్వారా స్థాపించబడిన స్కిజోఫ్రెనియా మోడల్ యొక్క ప్రవర్తనా లోటులను ఎర్బిబి కినేస్ ఇన్హిబిటర్స్ మెరుగుపరుస్తున్నప్పటికీ, ఎర్బిబి కినేస్ ఇన్హిబిటర్స్ యొక్క యాంటిసైకోటిక్ చర్య మరియు ఇతర మోడళ్లకు దాని సాధారణ వర్తకత పూర్తిగా వర్గీకరించబడలేదు. వేరే జంతు నమూనాను ఉపయోగించి, స్కిజోఫ్రెనియాకు సంబంధించిన ప్రవర్తనా ఎండోఫెనోటైప్‌లను ఎర్బి కినేస్ ఇన్హిబిటర్లు ఎలా మరియు ఎలా మెరుగుపరుస్తాయో పరిశీలించాము. సైటోకైన్ ఇజిఎఫ్‌కు నియోనాటల్ ఎలుకలను బహిర్గతం చేయడం ద్వారా స్కిజోఫ్రెనియా కోసం జంతు నమూనాను తయారు చేశారు. ఈ జంతువులలోని ఎర్బిబి 1 ఇన్హిబిటర్స్ జెడ్డి 1839 మరియు పిడి 153035 యొక్క ఇంట్రావెంట్రిక్యులర్ ఇన్ఫ్యూషన్ ఆశ్చర్యకరమైన ప్రతిస్పందనలో లోపాలను మరియు మోతాదు-ఆధారిత పద్ధతిలో ప్రిపల్స్ నిరోధాన్ని తగ్గించింది. శరీర బరువు పెరుగుట లేదా లోకోమోటర్ కార్యకలాపాలపై పరిమిత ప్రభావాలతో ZD1839 చేత భయం అభ్యాసం యొక్క గుప్త నిరోధం యొక్క లోపాలను కూడా తగ్గించారు. ZD1839 ఇన్ఫ్యూషన్ కూడా నైగ్రల్ డోపామైన్ (DA) న్యూరాన్ల యొక్క వినాశన కార్యకలాపాలను తగ్గించింది మరియు పాలిడల్ DA జీవక్రియను తగ్గించింది, దీని ఫలితంగా ఈ మెదడు ప్రాంతంలో రిస్పెరిడోన్ మరియు హలోపెరిడోల్ యొక్క యాంటీ-డోపామినెర్జిక్ ప్రొఫైల్‌ను అనుకరిస్తుంది. స్కిజోఫ్రెనియా కోసం జంతు నమూనాలకు సాధారణమైన ప్రవర్తనా లోటులను తగ్గించడానికి ఎర్బిబి ఇన్హిబిటర్స్ యాంటీ-డోపామినెర్జిక్ చర్యలను కలిగి ఉన్నట్లు కనిపిస్తాయి.

పరిచయం

రిసెప్టర్ టైరోసిన్ కినాసెస్ యొక్క ఎర్బిబి కుటుంబం నలుగురు సభ్యులను కలిగి ఉంటుంది; ErbB1-4 ఉపకణాలు వాటి సంకేతాలను ప్రసారం చేయడానికి హోమో- లేదా హెటెరో-డైమర్ కాంప్లెక్స్‌లను ఏర్పరుస్తాయి. ఎర్బిబి గ్రాహకాల కోసం లిగాండ్స్ ఎపిడెర్మల్ గ్రోత్ ఫ్యాక్టర్ (ఇజిఎఫ్) మరియు న్యూరేగులిన్లచే ప్రాతినిధ్యం వహించే పరమాణు సూపర్ ఫ్యామిలీలలో సభ్యులు, మరియు స్కిజోఫ్రెనియా యొక్క ఎటియాలజీ లేదా పాథాలజీలో ఇమిడి ఉంటాయి. 1, 2 ఎర్బిబి గ్రాహకాలలో, ఎర్బిబి 1 మరియు ఎర్బిబి 4 రెండూ మిడ్‌బ్రేన్ డోపామినెర్జిక్ న్యూరాన్‌లలో 3, 4, 5 తో సమృద్ధిగా ఉన్నాయి మరియు డోపామైన్ (డిఎ) పనితీరు మరియు అభివృద్ధిని నియంత్రిస్తాయి. 6, 7, 8, 9, 10, 11 నిజమే, ట్రాన్స్‌జెనిక్ ఎలుకలు న్యూరేగులిన్ -1 ను అధికంగా ఎక్స్ప్రెస్ చేయడం లేదా ఎర్బిబి గ్రాహకాలు లేకపోవడం డోపామినెర్జిక్ వ్యవస్థలో లేదా డిఎ-అనుబంధ ప్రవర్తనా లక్షణాలలో లోపాలను ప్రదర్శిస్తాయి. 2, 10, 12, 13, 14, 15 ఈ పరిశీలనలు స్కిజోఫ్రెనియా యొక్క న్యూరోపాథాలజీలో లేదా దాని జంతు నమూనాల ప్రవర్తనా లోటులలో డోపామినెర్జిక్ బలహీనతలకు అసాధారణమైన ఎర్బిబి సిగ్నలింగ్ కారణమవుతుందనే othes హను పెంచుతుంది. 16, 17, 18 నైగ్రల్ డోపామినెర్జిక్ న్యూరాన్లలో ఎర్బిబి 1 మరియు ఎర్బిబి 4 యొక్క వ్యక్తీకరణ ఈ కణ జనాభాపై ఎర్బిబి లిగాండ్ల యొక్క ప్రత్యక్ష చర్యలకు అనుకూలంగా ఉంటుంది. 5 ఉదాహరణకు, EGF లేదా న్యూరేగులిన్ -1 యొక్క మెదడు కషాయం DA విడుదల మరియు జీవక్రియను ప్రేరేపిస్తుంది మరియు ఎలుకలలో DA- అనుబంధ ప్రవర్తనలను రేకెత్తిస్తుంది. 7, 8 దీనికి విరుద్ధంగా, డోపామినెర్జిక్ న్యూరోట్రాన్స్మిషన్ యొక్క c షధ అవకతవకలు మెదడులోని ఎర్బిబి 1 సిగ్నలింగ్‌ను మారుస్తాయి. 19, 20 ఈ వాదనకు మానవ మెదడు వ్యాధులపై మునుపటి పోస్టుమార్టం అధ్యయనాలు మద్దతు ఇస్తున్నాయి; పార్కిన్సన్ వ్యాధి ఉన్న రోగులలో ఎర్బిబి 1 మరియు దాని లిగాండ్ యొక్క వ్యక్తీకరణ తగ్గిపోతుంది. [21] దీనికి విరుద్ధంగా, స్కిజోఫ్రెనియా రోగుల ముందరి భాగంలో ఎర్బిబి 1 మరియు ఎర్బిబి 4 వ్యక్తీకరణ యొక్క నియంత్రణ కనుగొనబడింది. 1, 22 డోపామినెర్జిక్ పనిచేయకపోవడం కలిగిన మెదడు వ్యాధులలో ఎర్బిబి సిగ్నలింగ్ యొక్క న్యూరోపాథలాజికల్ చిక్కులు ఉన్నప్పటికీ, [ 23] ఎర్బిబి మాడ్యులేటర్స్ (యాక్టివేటర్స్ మరియు ఇన్హిబిటర్స్) యొక్క చికిత్సా సామర్థ్యాన్ని అన్వేషించాల్సి ఉంది.

నియోనాటల్ హిప్పోకాంపల్ లెసియోనింగ్ మరియు మెథాంఫేటమిన్ చేత స్థాపించబడిన స్కిజోఫ్రెనియా కోసం జంతువుల నమూనాలలో ఎర్బిబి కినేస్ ఇన్హిబిటర్లు కొన్ని ప్రవర్తనా లోపాలను తీర్చగలవని ఇటీవల మేము కనుగొన్నాము. 24, 25, 26 స్కిజోఫ్రెనియా ఎండోఫెనోటైప్‌లకు సంబంధించిన ప్రవర్తనా బలహీనతల చికిత్సకు ఎర్బిబి 1 లేదా ఇతర ఎర్బిబి గ్రాహకాల యొక్క c షధ దిగ్బంధం సాధారణ ప్రయోజనాలను కలిగి ఉంటుందని ఈ పరిశోధనలు సూచిస్తున్నాయి. అయినప్పటికీ, ఎర్బ్‌బి కినేస్ ఇన్హిబిటర్స్ యొక్క గమనించిన చర్యలు DA వ్యవస్థను లక్ష్యంగా చేసుకుంటాయా లేదా వాటి ప్రభావాలు ఇతర జంతు నమూనాలకు సార్వత్రికమా కాదా అనేది తెలియదు. ఈ ప్రశ్నలను పరిష్కరించడానికి, సైటోకైన్ EGF తో ఎలుక పిల్లలను చికిత్స చేయడం ద్వారా మేము స్కిజోఫ్రెనియా నమూనాను సిద్ధం చేసాము, దీని ఫలితంగా వివిధ ప్రవర్తనా అసాధారణతలు ఏర్పడతాయి. 6, 27 ఈ జంతు నమూనాను ఉపయోగించి, ఎర్బ్‌బి 1 (జెడ్‌డి 1839) లేదా ఎర్బిబి 1-4 (పిడి 153035), 28, 29 ను లక్ష్యంగా చేసుకుని రెండు క్వినజోలిన్ ఉత్పన్నాల యొక్క c షధ చర్యలను మేము అన్వేషించాము మరియు సెన్సోరిమోటర్ గేటింగ్‌లో వాటి శక్తిని పోల్చాము. ఎర్బ్‌బి ఇన్హిబిటర్లలో ఒకదాన్ని స్వీకరించిన తర్వాత ఈ జంతు నమూనాలో నైగ్రల్ డోపామినెర్జిక్ న్యూరాన్లు మరియు మెదడు డిఎ జీవక్రియ యొక్క యూనిట్ కార్యాచరణను కూడా మేము పర్యవేక్షించాము. ZD1839 యొక్క యాంటిసైకోటిక్ చర్యల యొక్క c షధ ప్రొఫైల్ సాంప్రదాయ యాంటిసైకోటిక్స్-హలోపెరిడోల్ మరియు రిస్పెరిడోన్లతో పోల్చబడింది.

సామాగ్రి మరియు పద్ధతులు

విషయము

ఆనకట్టలతో మగ స్ప్రాగ్-డావ్లీ ఎలుకలు (ప్రసవానంతర రోజు (పిఎన్‌డి) 2) ఎస్‌ఎల్‌సి (హమామాట్సు, జపాన్) నుండి కొనుగోలు చేయబడ్డాయి. లిట్టర్స్ పిఎన్డి 1 న జన్మించారు మరియు విక్రేత వారి ఆనకట్టతో 10 మగ పిల్లలకు ఎంపిక చేశారు. ఎలుకలను (8-10 పిల్లలతో పాటు వారి ఆనకట్ట లేదా తల్లిపాలు పట్టే తర్వాత 3-4 ఎలుకలు) పాలీప్రొఫైలిన్ బోనులలో (58 సెం.మీ పొడవు × 28 సెం.మీ వెడల్పు × 24 సెం.మీ ఎత్తు) ఉంచారు మరియు ఆహారం మరియు నీటికి ఉచిత ప్రవేశం కల్పించారు. బోనులను ఉష్ణోగ్రత-నియంత్రిత కాలనీ గదిలో (22.0 ± 1.0 ° C) ఉంచారు మరియు 12-h లైట్-డార్క్ సైకిల్ (0700 ఆన్ -1900 ఆఫ్) కింద ఉంచారు. మేము EGF లేదా సైటోక్రోమ్ సి (కంట్రోల్ ప్రోటీన్; మొత్తం n = 263) తో చికిత్స పొందిన ఏడు స్వతంత్ర నియోనాటల్ ఎలుకలను ఉపయోగించాము. ఇక్కడ వివరించిన జంతు ప్రయోగాలన్నీ నీగాటా విశ్వవిద్యాలయం యొక్క జంతు ఉపయోగం మరియు సంరక్షణ కమిటీ ఆమోదించాయి మరియు ప్రయోగశాల జంతువుల సంరక్షణ మరియు ఉపయోగం కోసం మార్గదర్శక సూత్రాలకు అనుగుణంగా ప్రదర్శించబడ్డాయి (NIH, USA). ఈ అధ్యయనంలో ఉపయోగించిన జంతువుల బాధ మరియు సంఖ్య రెండింటినీ తగ్గించడానికి అన్ని ప్రయత్నాలు జరిగాయి.

నియోనాటల్ EGF చికిత్స

పున omb సంయోగం చేసిన మానవ EGF (శరీర బరువులో 0.875 mg kg; 1; హిగేటా షోయు, చిబా, జపాన్) సెలైన్‌లో కరిగించి, మెడ యొక్క మెడ వద్ద, ప్రతి లిట్టర్‌లోని సగం జంతువులకు సబ్కటానియస్గా ఇవ్వబడుతుంది. ఇది PND ల నుండి 2-10 వరకు ప్రతిరోజూ సంభవించింది. లిట్టర్‌మేట్స్ సైటోక్రోమ్ సి యొక్క అదే పరిమాణాన్ని అందుకున్నారు మరియు అన్ని విశ్లేషణలకు నియంత్రణలుగా పనిచేశారు. 6

Administration షధ పరిపాలన

సోడియం పెంటోబార్బిటల్ (ఇంట్రాపెరిటోనియల్ (ఐపి) ఇంజెక్షన్ (డైనిప్పన్-సుమిటోమో ఫార్మాస్యూటికల్, ఒసాకా, జపాన్) ద్వారా 50 mg kg −1 తో లోతైన అనస్థీషియాను నిర్ధారించిన తరువాత, మేము ప్రతి ఎలుకను (PND 54-60) ఒక స్టీరియోటాక్సిక్ ఉపకరణానికి (నరిషిగే, టోక్యో, జపాన్). మేము పుర్రెను బహిర్గతం చేశాము, ఒక రంధ్రం వేసి, 30-G క్యాన్యులా (టెరుమో, టోక్యో, జపాన్) ను పార్శ్వ జఠరిక యొక్క కుడి వైపున అమర్చాము (0.3 మిమీ పృష్ఠ మరియు 1.2 మిమీ కుడి పార్శ్వం బ్రెగ్మా నుండి కొలుస్తారు, దురా క్రింద 4.5 మిమీ ) లేదా గ్లోబస్ పాలిడస్ యొక్క రెండు అర్ధగోళాలలోకి (1.0 మిమీ పృష్ఠ మరియు 3.2 మిమీ పార్శ్వం బ్రెగ్మా నుండి కొలుస్తారు, దురా కంటే 6.0 మిమీ). కాన్యులాను పుర్రెకు అతుక్కొని, ఆల్జెట్ ఓస్మోటిక్ మినీపంప్ (0.5 μl h −1, మోడల్ 2002; అల్జా, పాలో ఆల్టో, CA, USA) తో అనుసంధానించబడింది. మినీపంప్ PD153035 (1.0, 0.1 లేదా 0.01 mg ml −1 ), ZD1839 (1.0, 0.2, 0.1 లేదా 0.01 mg ml −1 ) లేదా 10-20% డైమెథైల్ సల్ఫాక్సైడ్ (DMSO) ఒంటరిగా (వాహనం) నిండి ఉంది. నెత్తిమీద కోత శస్త్రచికిత్సా స్టేపుల్స్‌తో మూసివేయబడింది మరియు సమయోచిత క్రిమినాశక మందు (రోజుకు 50 మి.గ్రా, సాన్క్యో ఫార్మాస్యూటికల్స్, టోక్యో, జపాన్) సెఫ్మెటాజోన్‌తో చికిత్స చేయబడింది. ప్రవర్తనా పరీక్షలు పూర్తయిన తర్వాత మేము కాన్యులా యొక్క స్థానాన్ని ధృవీకరించాము. ఎర్బిబి 1 ఇన్హిబిటర్స్, పిడి 153035 (4- (3-బ్రోమోఫెనిలామైన్) -6, 7-డైమెథాక్సి-క్వినజోలిన్; కాల్బియోకెమ్, శాన్ డీగో, సిఎ, యుఎస్ఎ) మరియు జెడ్డి 1839 (జిఫిటినిబ్; 4- (3-క్లోరో -4-ఫ్లోరోఫెనిలామైన్) -7- మెథాక్సీ- 6 (3- (4-మోర్ఫోలినిల్) -క్వినజోలిన్), ఆస్ట్రాజెనెకా ఫార్మాస్యూటికల్స్, ఒసాకా, జపాన్), DMSO లో కరిగించి, సెలైన్‌తో కరిగించి ఓస్మోటిక్ మినీపంప్‌లో చేర్చబడ్డాయి.

ప్రత్యామ్నాయంగా, ఎలుకలను సాంప్రదాయిక యాంటిసైకోటిక్స్‌తో ఉపక్రోనిక్‌గా చికిత్స చేశారు: హలోపెరిడోల్ లేదా రిస్పెరిడోన్ 14 రోజులు. హలోపెరిడోల్ (వాకో ప్యూర్ కెమికల్, టోక్యో, జపాన్) సోడియం అసిటేట్ బఫర్ (0.15 mg ml −1, pH 5.5) లో కరిగిపోయింది. రిస్పెరిడోన్ (జాన్సెన్ ఫార్మాస్యూటికల్స్, టోక్యో, జపాన్) ను రిస్పాడల్ 1 mg ml −1 నోటి ద్రావణంగా పొందారు. ఎలుకలకు (నాచుమ్ సీసాకుషో, టోక్యో, జపాన్) నోటి జోండే సహాయంతో పిఎన్‌డి 56 తర్వాత హలోపెరిడోల్ (రోజుకు 0.3 మి.గ్రా కేజీ -1 ) మరియు రిస్పెరిడోన్ (రోజుకు 1.0 మి.గ్రా కేజీ -1 ) మౌఖికంగా ఇవ్వబడ్డాయి.

ప్రవర్తనా పరీక్ష, treatment షధ చికిత్స మరియు విచ్ఛేదనం యొక్క షెడ్యూల్

ఎర్బ్‌బి ఇన్హిబిటర్‌లపై (శస్త్రచికిత్స తర్వాత 14 రోజులు) మినీపంప్ క్షీణించక ముందు, మినీపంప్ ఇంప్లాంటేషన్ తరువాత కనీసం 7 రోజుల పొడవు రికవరీ వ్యవధి తర్వాత ఎలుకలను ప్రవర్తనా పరీక్షలకు గురిచేసేవారు. స్వతంత్ర ప్రవర్తనా పరీక్షల మధ్య పరస్పర చర్యలను నివారించడానికి, ఒత్తిడిని పెంచే క్రమంలో ఎలుకలను 2 రోజుల కన్నా ఎక్కువ విరామంతో పరీక్షలకు గురి చేశారు: లోకోమోటర్ కార్యాచరణ పరీక్ష, సామాజిక సంకర్షణ మరియు శబ్ద ప్రారంభ పరీక్ష. సందర్భానుసార భయం కండిషనింగ్‌కు EGF ఎలుకల స్వతంత్ర సెట్‌లు కేటాయించబడ్డాయి. Erb షధాలను పంపు నుండి క్షీణించే ముందు ఎర్బిబి ఇన్హిబిటర్లను అందుకున్న ఎలుకలు విచ్ఛిన్నమయ్యాయి.

ఫాస్ఫోరైలేటెడ్ ఎర్బిబి 1 ప్రోటీన్ కోసం ఎంజైమ్ ఇమ్యునోఅస్సే

ఎర్బిబి 1 (పివై 1173) యొక్క ఫాస్ఫోరైలేషన్ స్థాయిలను నిర్ణయించడానికి, ఎంజైమ్ ఇమ్యునోఅస్సే కిట్ (బయోసోర్స్ టిఎమ్; ఇన్విట్రోజెన్, కామరిల్లో, సిఎ, యుఎస్ఎ) తో అందించబడిన 10 వాల్యూమ్ల సజాతీయీకరణ బఫర్‌లో మెదడు కణజాలం సజాతీయమైంది. మెదడు సజాతీయతలను 30 నిమిషాలకు 4 ° C వద్ద 14, 000 గ్రా వద్ద సెంట్రిఫ్యూజ్ చేశారు మరియు వెంటనే రెండు-సైట్ ఎంజైమ్ ఇమ్యునోఅస్సేకు లోబడి ఉంటుంది. నమూనాలలో ప్రోటీన్ సాంద్రతలు మైక్రో BCA కిట్ (పియర్స్, రాక్‌ల్యాండ్, IL, USA) ను ఉపయోగించి బోవిన్ సీరం అల్బుమిన్‌తో ప్రమాణంగా నిర్ణయించబడ్డాయి. EGF- ఉత్తేజిత A431 కణాల నుండి సెల్ లైసేట్‌ను ఒక ప్రమాణంగా ఉపయోగించడం ద్వారా, ఫాస్ఫోరైలేటెడ్ ఎర్బ్‌బి 1 కొరకు ఇమ్యునోఅస్సే కిట్ కనీసం 100 రెట్లు కవరింగ్ సాంద్రతలు కనీసం 100 రెట్లు కవరింగ్ సాంద్రతలను కలిగి ఉంటుంది. ప్రోటీన్ గా ration త ఆధారంగా ఒక నమూనాకు సగటున రెండు కొలతలు సాధారణీకరించబడ్డాయి. ఫాస్ఫోరైలేటెడ్ ఎర్బిబి 1 కొరకు ఎలిసా యొక్క విశిష్టత గతంలో వివరించబడింది. 30

డోపామినెర్జిక్ మార్కర్ల కోసం ఇమ్యునోబ్లోటింగ్

ప్రతి ప్రయోగాత్మక సమూహంలోని 10 కంటే ఎక్కువ ఎలుకల నుండి మొత్తం మెదడులను తీసుకొని 1-మిమీ మందపాటి కరోనల్ విభాగాలుగా ముక్కలు చేశారు. ప్రతి ఎలుక మెదడులోని ఒక విభాగం నుండి బాహ్య గ్లోబస్ పాలిడస్ (సుమారు 5 మి.గ్రా తడి కణజాలం) గుద్దబడింది. నమూనా కణజాలం 100 μl (62.5 m M Tris-HCl pH 6.8, 2% SDS, 0.5% NP-40, 5 m M EDTA) మరియు ప్రోటీజ్ ఇన్హిబిటర్ కాక్టెయిల్ (రోచె డయాగ్నోస్టిక్స్ జపాన్, టోక్యో, జపాన్) లో కణజాలం సజాతీయమైంది. మరియు హీట్-డినాచర్డ్. ప్రోటీన్ నమూనాలను SDS- పాలియాక్రిలమైడ్ జెల్ ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్ ద్వారా వేరు చేసి నైట్రోసెల్యులోజ్ పొరకు బదిలీ చేశారు. టైరోసిన్ హైడ్రాక్సిలేస్ (1: 1000, మిల్లిపోర్, బెడ్‌ఫోర్డ్, ఎంఏ, యుఎస్‌ఎ), డిఎ ట్రాన్స్‌పోర్టర్ (1: 1000, శాంటా క్రజ్ బయోటెక్నాలజీ, శాంటా క్రజ్, సిఎ, యుఎస్‌ఎ), వెసిక్యులర్ మోనోఅమైన్ ట్రాన్స్‌పోర్టర్ 2 (1: 1000, మిల్లిపోర్), కాటెకాల్- ఓ -మెథైల్ట్రాన్స్ఫేరేస్ (1: 2000, మిల్లిపోర్) లేదా డిఎ మరియు చక్రీయ AMP- నియంత్రిత ఫాస్ఫోప్రొటీన్ 32 (DARPP32; 1: 500, శాంటా క్రజ్ బయోటెక్నాలజీ). ప్రత్యామ్నాయంగా, ఇమ్యునోబ్లోట్‌లను న్యూరాన్-స్పెసిఫిక్ ఎనోలేస్ (1: 2000, మిల్లిపోర్) మరియు యూకారియోటిక్ పొడుగు కారకం 2 (రిఫరెన్స్ 31) కోసం అంతర్గత నియంత్రణలుగా ప్రతిరోధకాలతో పరిశోధించారు. ఈ అణువుల యొక్క రోగనిరోధక శక్తిని పెరాక్సిడేస్-కంజుగేటెడ్ యాంటీ ఇమ్యునోగ్లోబులిన్ యాంటీబాడీస్ దృశ్యమానం చేశాయి, తరువాత కెమిలుమినిసెన్స్ రియాక్షన్ (ECL, GE హెల్త్‌కేర్, టోక్యో, జపాన్). ఇమ్యునోరేయాక్టివిటీ యొక్క తీవ్రత, ప్రామాణికమైన పరమాణు బరువుకు సరిపోయేది, ఇమేజ్ ప్రాసెసింగ్ సాఫ్ట్‌వేర్ జెనెటూల్స్ (సింజీన్, కేంబ్రిడ్జ్, యుకె) తో కలిపి సిసిడి కెమెరా ద్వారా కొలుస్తారు.

శబ్ద ఆరంభం మరియు ప్రిపల్స్ నిరోధం యొక్క కొలత

ఎలుకల కోసం స్వీకరించబడిన స్టార్టెల్ చాంబర్ (ఎస్ఆర్-ల్యాబ్ సిస్టమ్స్, శాన్ డియాగో ఇన్స్ట్రుమెంట్స్, శాన్ డియాగో, సిఎ, యుఎస్ఎ) లో ఎకౌస్టిక్ స్టార్టెల్ మరియు ప్రిపల్స్ ఇన్హిబిషన్ (పిపిఐ) ప్రతిస్పందనలను కొలుస్తారు. [32 ] 120 dB యొక్క శబ్ద ఉద్దీపనలతో ఆశ్చర్యకరమైన వ్యాప్తి, అలవాటు మరియు పిపిఐ ప్రతిస్పందనను అంచనా వేయడానికి ఎంచుకున్న ఉదాహరణ ఉపయోగించబడింది, ఒకే ప్రిపల్స్ విరామం (100 ఎంఎస్) మరియు మూడు వేర్వేరు ప్రిపల్స్ ఇంటెన్సిటీలు (నేపథ్య శబ్దం పైన 5, 10 మరియు 15 డిబి (తెలుపు శబ్దం, 70 dB)). పిపిఐ పరీక్షలో, ఐదు ట్రయల్ రకాలు 40 ట్రయల్స్ ఇవ్వడానికి ఒక సూడోరాండం క్రమంలో ఎనిమిది సార్లు పునరావృతమయ్యాయి. ప్రతి ట్రయల్ రకాన్ని ఐదు ట్రయల్స్ బ్లాక్‌లో ఒకసారి ప్రదర్శించారు.

లోకోమోటర్ కార్యాచరణ యొక్క కొలత

మేము గతంలో వివరించిన విధంగా నవల వాతావరణంలో లోకోమోటర్ కార్యాచరణను కొలిచాము. ప్రతి ఎలుకను ఓపెన్ ఫీల్డ్ బాక్స్‌లో (45 సెం.మీ పొడవు × 45 సెం.మీ వెడల్పు × 30 సెం.మీ ఎత్తు, MED అసోసియేట్స్, సెయింట్ ఆల్బన్స్, VA, USA) మితమైన కాంతి స్థాయి (400 Lx) కింద ఉంచారు. 60 నిమిషాల పాటు ఫోటో-బీమ్ సెన్సార్లు (క్షితిజ సమాంతర అక్షానికి 25 మిమీ విరామాలు మరియు నిలువు అక్షానికి 150 మిమీ) ద్వారా లైన్ క్రాసింగ్‌లు మరియు పెంపకం గణనలు కొలుస్తారు.

సందర్భ భయం అభ్యాసం మరియు గుప్త నిరోధం

సందర్భోచిత కండిషనింగ్ యొక్క పరీక్షా నమూనా జాంగ్ మరియు ఇతరులు చేసిన అధ్యయనం ఆధారంగా రూపొందించబడింది . క్లుప్తంగా, భయం కండిషనింగ్‌కు కనీసం 30 నిమిషాల ముందు ఎలుకలను ప్రయోగశాలకు రవాణా చేశారు. ఎలుకలను స్టెయిన్లెస్ స్టీల్ గ్రిడ్ ఫ్లోర్ (21.5 సెం.మీ వెడల్పు × 20.5 సెం.మీ లోతు × 30 సెం.మీ ఎత్తు పెట్టె; ఓహారా మెడికల్ ఇండస్ట్రీ, టోక్యో, జపాన్) తో 2 నిమిషాలు బేస్లైన్ కదలిక / గడ్డకట్టడాన్ని పర్యవేక్షించడానికి ఉంచారు మరియు తరువాత ఒక స్వరానికి గురయ్యారు క్యూ (కండిషనింగ్ ఉద్దీపన (సిఎస్): 60 డిబి, 10 హెర్ట్జ్, 30 సె) కలిసి 0.8-ఎంఏ విద్యుత్ షాక్‌లు (షరతులు లేని ఉద్దీపన: 2-సె వ్యవధి, 1-నిమిషాల విరామంతో రెండుసార్లు). కండిషనింగ్ తర్వాత ఒక రోజు, ఎలుకలను అదే గదికి తిరిగి ఇచ్చి, అదే సి.ఎస్. సిఎస్ ప్రారంభించిన తర్వాత గడ్డకట్టే సమయం వీడియో కెమెరా ద్వారా రికార్డ్ చేయబడింది మరియు ఇమేజింగ్ సాఫ్ట్‌వేర్ (ఓహారా మెడికల్ ఇండస్ట్రీ) సహాయంతో ప్రతి 30 సెకన్లకు సగటున ఉంటుంది. ప్రీ-ఎక్స్పోజ్డ్ గ్రూపులోని జంతువులు నేరుగా పై కండిషనింగ్‌కు లోబడి ఉన్నాయి. కండిషనింగ్‌కు ఒక రోజు ముందు, ప్రీక్స్‌పోజ్డ్ గ్రూపులోని ఎలుకలను షాక్ చాంబర్‌లో 20 నిమిషాలు ఉంచి అదే సందర్భోచిత క్లూ (సిఎస్) కు గురిచేస్తారు కాని విద్యుత్ ఉద్దీపనలను (షరతులు లేని ఉద్దీపన) పొందకుండా.

నిగ్రా డోపామినెర్జిక్ న్యూరాన్ల నుండి వివో యూనిట్ రికార్డింగ్‌లో

8-10 వారాల వయస్సులో క్లోరల్ హైడ్రేట్ అనస్థీషియా (400 mg kg -1 ip) కింద ఎక్స్‌ట్రాసెల్యులర్ సింగిల్-యూనిట్ రికార్డింగ్ జరిగింది. రికార్డింగ్ విధానాలు మరియు విశ్లేషణలు మామెలి-ఎంగ్వాల్ మరియు ఇతరుల నుండి సవరించబడ్డాయి . మత్తుమందు ఎలుకలను స్టీరియోటాక్సిక్ ఉపకరణంపై అమర్చారు, మరియు వాటి శరీర ఉష్ణోగ్రత నిరంతరం 37.0 ± 0.5 to C కు నియంత్రించబడుతుంది. మిడ్‌బ్రేన్‌పై ఉన్న పుర్రె తొలగించబడింది. 2% పొంటమైన్ స్కై బ్లూ (నిరోధకత: 15-25 MΩ) కలిగిన 0.5 M NaCl తో నిండిన గాజు మైక్రోఎలెక్ట్రోడ్‌ను సబ్‌స్టాంటియా నిగ్రా పార్స్ కాంపాక్టాలో చేర్చారు. స్టీరియోటాక్సిక్ కోఆర్డినేట్లు 5.0–5.4 మిమీ పృష్ఠ మరియు 1.2–1.4 మిమీ పార్శ్వం బ్రెగ్మా నుండి కొలుస్తారు, దురా కంటే 7.5–8.5 మిమీ. న్యూరోనల్ సిగ్నల్స్ 3–5 నిమిషాలు రికార్డ్ చేయబడ్డాయి మరియు అధిక-లాభ యాంప్లిఫైయర్ (AVH-11, నిహాన్ కోహ్డెన్, టోక్యో, జపాన్) తో అనుసంధానించబడిన యాంప్లిఫైయర్ (ఆక్సోక్లాంప్ 2 బి, మాలిక్యులర్ డివైజెస్, సన్నీవేల్, సిఎ, యుఎస్ఎ) ఉపయోగించి విస్తరించబడ్డాయి. విండో డిస్క్రిమినేటర్ (121 విండో డిస్క్రిమినేటర్, వరల్డ్ ప్రెసిషన్ ఇన్స్ట్రుమెంట్స్, సరసోటా, ఎఫ్ఎల్, యుఎస్ఎ) ద్వారా ఒకే యూనిట్లను నిరంతరం పర్యవేక్షించేవారు. సిగ్నల్స్ డిజిటైజర్ (డిజిడాటా 1200, మాలిక్యులర్ డివైజెస్) ద్వారా రికార్డింగ్ సాఫ్ట్‌వేర్ (ఆక్సోస్కోప్ 1.1, మాలిక్యులర్ డివైజెస్) కలిగిన కంప్యూటర్‌కు బదిలీ చేయబడ్డాయి.

డోపామినెర్జిక్ మరియు నాన్-డోపామినెర్జిక్ న్యూరాన్లు వాటి లక్షణ తరంగ రూపం మరియు కాల్పుల నమూనాల ద్వారా వేరు చేయబడ్డాయి: (1) గుర్తించదగిన ప్రతికూల విక్షేపణతో ఒక సాధారణ త్రిపాసిక్ చర్య సంభావ్యత; (2) ఒక లక్షణం దీర్ఘకాలిక వ్యవధి (> 2.0 ఎంఎస్), చర్య సంభావ్య వెడల్పు ప్రారంభం నుండి ప్రతికూలంగా> 1.1 ఎంఎస్ ద్వారా; (3) క్రమరహిత సింగిల్ స్పైకింగ్ నమూనా మరియు అప్పుడప్పుడు పగిలిపోయే చర్యతో నెమ్మదిగా కాల్పుల రేటు (0.5–10 హెర్ట్జ్). 35 DA సెల్ కాల్పులు పేలుడు వ్యవధి యొక్క సగటు నిష్పత్తి మరియు పేలుడులో వచ్చే స్పైక్‌ల శాతానికి సంబంధించి విశ్లేషించబడ్డాయి; పేలుళ్లలోని వచ్చే చిక్కుల సంఖ్య గతంలో వివరించిన విధంగా మొత్తం వచ్చే చిక్కుల సంఖ్యతో విభజించబడింది. 36 పేలుళ్లు ఈ క్రింది ప్రమాణాలతో గుర్తించబడ్డాయి: (1) 80 ఎంఎస్‌ల కన్నా తక్కువ విరామంలో వరుసగా రెండు స్పైక్‌ల ద్వారా వాటి ఆరంభం నిర్వచించబడుతుంది మరియు (2) 160 ఎమ్‌ఎస్‌ల కంటే ఎక్కువ విరామంతో ముగించబడినప్పుడు. 36

మోనోఅమైన్ విషయాల నిర్ధారణ

ప్రతి మెదడు ప్రాంతం 0.1 m పెర్క్లోరిక్ ఆమ్లంలో 0.1 m M EDTA మరియు 100 n M ఐసోప్రొట్రెనాల్ కలిగి ఉంటుంది. సెంట్రిఫ్యూజేషన్ తరువాత, సూపర్నాటెంట్లు మరియు గుళికలు పండించబడ్డాయి. DA మరియు దాని జీవక్రియల సాంద్రతలు, 3, 4-డైహైడ్రాక్సిఫెనిలాసిటిక్ ఆమ్లం (DOPAC) మరియు హోమోవానిలిక్ ఆమ్లం (HVA), సూపర్నాటెంట్లలో అధిక-పనితీరు గల ద్రవ క్రోమాటోగ్రఫీ-ఎలక్ట్రోకెమిస్ట్రీ ద్వారా విశ్లేషించబడ్డాయి. 50 m M ట్రైసోడియం సిట్రేట్ (pH 3.2), 25 m M NaH 2 PO 4, 10 m M డైథైలామైన్, 0.03 m M EDTA, 2.5 m M 1-ఆక్టేన్ సల్ఫోనిక్ ఆమ్లం సోడియం ఉప్పు, 6% మిథనాల్ మరియు 1% డైమెథైలాసెటమైడ్ కలిగిన మొబైల్ దశ 0.5 ml min −1 వద్ద పంపిణీ చేయబడింది. మోనోఅమైన్‌లను విశ్లేషణాత్మక అధిక-పనితీరు గల లిక్విడ్ క్రోమాటోగ్రఫీ కాలమ్ (CA-50DS, 4.6 × 150 mm 2, Eicom, క్యోటో, జపాన్) పై వేరు చేసి గ్రాఫైట్ ఎలక్ట్రోడ్ (WE-3G, Eicom) తో కనుగొనారు. డేటా సేకరణ కంప్యూటర్ (పవర్‌క్రోమ్, ఐకామ్) తో డేటా విశ్లేషణ జరిగింది. కణజాల గుళికలు 0.5 N NaOH లో సజాతీయపరచబడ్డాయి మరియు మైక్రో BCA కిట్ (పియర్స్) తో ప్రోటీన్ నిర్ణయానికి లోబడి ఉన్నాయి. కణజాల మోనోఅమైన్ విషయాలు ప్రోటీన్ సాంద్రతలతో సాధారణీకరించబడ్డాయి.

గణాంక విశ్లేషణ

ఫలితాలు రెండు సమూహాల నుండి మాత్రమే పొందినప్పుడు, రెండు తోక గల టి -టెస్ట్ లేదా మాన్-విట్నీ యొక్క యు -టెస్ట్ పోలిక కోసం ఉపయోగించబడింది. బిహేవియరల్ స్కోర్‌లను మొదట నియోనాటల్ EGF చికిత్స (రెండు స్థాయిలు), drug షధ సవాలు లేదా మోతాదు (రెండు నుండి నాలుగు స్థాయిలు), మరియు / లేదా CS (రెండు స్థాయిలు) మధ్య విషయాల కారకాలు మరియు ప్రిపల్స్ మాగ్నిట్యూడ్ (మూడు స్థాయిలు) తో కారకమైన ANOVA ఉపయోగించి విశ్లేషించారు. సబ్జెక్ట్ కారకంగా. పిల్లి పరిహారంతో వ్యత్యాసం యొక్క మల్టీవియారిట్ విశ్లేషణ ద్వారా విషయాల మధ్య కారకాలతో పరస్పర చర్య అంచనా వేయబడింది. తదనంతరం, బహుళ పోలికల యొక్క పోస్ట్-హాక్ పరీక్ష కోసం ఫిషర్ యొక్క LSD పరీక్ష ఉపయోగించబడింది. 0.05 కన్నా తక్కువ పి- విలువ గణాంకపరంగా ముఖ్యమైనదిగా పరిగణించబడింది. SPSS సాఫ్ట్‌వేర్ (SPSS, యోకోహామా, జపాన్) ఉపయోగించి గణాంక విశ్లేషణలు జరిగాయి. ప్రతి ప్రయోగంలో ( n ) ఉపయోగించిన జంతువుల సంఖ్య కుండలీకరణాల్లో జాబితా చేయబడింది.

ఫలితాలు

ఎర్బిబి 1 ఇన్హిబిటర్ ZD1839 యొక్క శబ్ద ఆశ్చర్యకరమైన మరియు ప్రిపల్స్ నిరోధం యొక్క ప్రభావాలు

నియోనేట్లు స్కిజోఫ్రెనియాకు సంబంధించిన అనేక ప్రవర్తనా లోటులను ప్రదర్శిస్తాయి, వీటిలో ఆశ్చర్యకరమైన ప్రతిస్పందనలు, పిపిఐ, గుప్త నిరోధం మరియు సామాజిక సంకర్షణలు ఉన్నాయి, అందువల్ల ఎర్బిబి ఇన్హిబిటర్స్ యొక్క ఈ మూల్యాంకన అధ్యయనం కోసం ఉపయోగించబడ్డాయి. 6, 27, 37, 38, 39 EGF- చికిత్స చేసిన ఎలుకలలో (ఇకపై EGF ఎలుకలు అని పిలుస్తారు) మరియు నియంత్రణలలో ఎర్బిబి ఇన్హిబిటర్లలో ఒకటైన ZD1839 ను పరీక్షించడానికి మేము నాలుగు సమూహ జంతువులను సిద్ధం చేసాము. క్వినజోలిన్ ఉత్పన్నం ZD1839 అనేది కొత్తగా అభివృద్ధి చేయబడిన క్యాన్సర్ నిరోధక drug షధం, ఇది ప్రత్యేకంగా ఎర్బిబి 1 ను లక్ష్యంగా చేసుకుంటుంది. 40, 41 మేము ఓస్మోటిక్ మినీ-పంప్ నుండి పార్శ్వ జఠరికకు ZD1839 ను సబ్‌క్రోనిక్‌గా ఇచ్చాము, ఎందుకంటే ఈ నిరోధకం రక్త-మెదడు అవరోధం ద్వారా పరిమిత పారగమ్యతను కలిగి ఉంటుంది. 42 drug షధ కషాయం ప్రారంభించిన పది రోజుల తరువాత మరియు శస్త్రచికిత్స గాయం మరియు ఒత్తిడి తగ్గినప్పుడు, మేము శబ్ద ఆశ్చర్యకరమైన ప్రతిస్పందనలను మరియు పిపిఐని కొలిచాము. ZGF1839 EGF ఎలుకలలో పల్స్-ఒంటరిగా శబ్ద ఆశ్చర్యకరమైన ప్రతిస్పందనలను తగ్గించిందని మేము కనుగొన్నాము (మూర్తి 1a); EGF మరియు drug షధ (ZD1839) యొక్క విషయ కారకాలతో రెండు-మార్గం పునరావృతమయ్యే ANOVA EGF చికిత్స (F 1, 36 = 11.8, P = 0.002) మరియు drug షధ (F 1, 36 = 18.4, P <0.001) మరియు EGF మరియు drug షధాల మధ్య పరస్పర చర్య (F 1, 36 = 4.7, P = 0.038). కంట్రోల్ ఎలుకలను స్వీకరించే వాహనంతో పోల్చితే EGF ఎలుకలను స్వీకరించే వాహనం (అంటే 10% DMSO) యొక్క పల్స్-ఒంటరిగా ఆశ్చర్యకరమైన ప్రతిస్పందనల యొక్క గణనీయమైన పెరుగుదలను పోస్ట్-హాక్ పరీక్షలు గుర్తించాయి. EGF ఎలుకల పల్స్-ఒంటరిగా ఆశ్చర్యకరమైన ప్రతిస్పందనల పెరుగుదల ZD1839 ఇన్ఫ్యూషన్ ద్వారా ఆకర్షించబడింది.

Image

పల్స్-ఒంటరిగా స్టార్టెల్ మరియు ఎపిడెర్మల్ గ్రోత్ ఫ్యాక్టర్ (ఇజిఎఫ్) ఎలుకల ప్రిపల్స్ ఇన్హిబిషన్ పై ZD1839 యొక్క ఇంట్రావెంట్రిక్యులర్ ఇన్ఫ్యూషన్ యొక్క ప్రభావాలు. ( ) ZD1839 (1 mg ml −1 ; రోజుకు 12 μg) లేదా వాహనం (10% డైమెథైల్ సల్ఫాక్సైడ్) 8-10 రోజులు పార్శ్వ సెరెబ్రోవెంట్రికల్‌కు ఇవ్వబడుతుంది. వాహనం లేదా ZD1839 పంపుతో EGF లేదా కంట్రోల్ ఎలుకల పల్స్-ఒంటరిగా ఆశ్చర్యంగా 120-dB టోన్‌తో పెద్దలుగా కొలుస్తారు. ( బి ) 75-, 80- మరియు 85-డిబి ప్రిపల్స్ ఉద్దీపనల సమక్షంలో ప్రిపల్స్ నిరోధం నిర్ణయించబడింది. బార్లు సూచిస్తాయి అంటే ± sem ( n = 10 ఒక్కొక్కటి). ** P <0.01, *** P <0.001, వాహనాన్ని స్వీకరించే కంట్రోల్ ఎలుకలతో పోలిస్తే మరియు ++ P <0.01, +++ P <0.001, EGF ఎలుకలను స్వీకరించే వాహనంతో పోలిస్తే (ఫిషర్ LSD చేత).

పూర్తి పరిమాణ చిత్రం

పిపిఐ స్థాయిల కోసం, ఇజిఎఫ్ మరియు డ్రగ్ (జెడ్డి 1839) ల మధ్య విషయాల కారకాలతో మూడు-మార్గం పునరావృతమయ్యే ANOVA మరియు ప్రిపల్స్ యొక్క సబ్జెక్ట్ కారకం EGF చికిత్స యొక్క ప్రధాన ప్రభావాన్ని వెల్లడించింది (F 1, 36 = 8.53, P = 0.006) మరియు EGF మరియు drug షధాల మధ్య పరస్పర చర్య (F 1, 36 = 10.6, P = 0.003) (మూర్తి 1 బి). EGF మరియు ప్రిపల్స్ మధ్య ముఖ్యమైన పరస్పర చర్య లేదు, అయితే (F 6, 72 = 0.840, P = 0.543). పోస్ట్-హాక్ విశ్లేషణలు EGF సమూహంలో ZD1839 యొక్క గణనీయమైన ప్రభావాన్ని గుర్తించాయి, కానీ నియంత్రణ సమూహంలో కాదు. ఈ విధంగా, ZD1839 ఇన్ఫ్యూషన్ EGF ఎలుకల PPI లోటులను మెరుగుపరిచింది.

ఆశ్చర్యకరమైన ప్రతిస్పందన మరియు పిపిఐల మధ్య సంభావ్య గణిత పరస్పర చర్యను ధృవీకరించడానికి, మేము పిజిఐ యొక్క మోతాదు-ప్రతిస్పందనను EGF ఎలుకలలో ZD1839 కు నిర్ణయించాము. ZD1839 యొక్క నాలుగు మోతాదులు (అంటే, రోజుకు 0, 0.12, 1.2 మరియు 12 μg) EGF ఎలుకలకు ఉప కాలక్రమంగా ఇవ్వబడ్డాయి (గణాంకాలు 2a మరియు b). ZD1839 మోతాదు-ఆధారిత పద్ధతిలో పల్స్-ఒంటరిగా ఆశ్చర్యకరమైన ప్రతిస్పందన యొక్క వ్యాప్తిని తగ్గించిందని మేము కనుగొన్నాము (F 1, 18 = 28.9, P = 0.002; Figure 2a). పోస్ట్-హాక్ విశ్లేషణలు అత్యధిక మోతాదు (రోజుకు 12 μg) మాత్రమే ఆశ్చర్యకరమైన ప్రతిస్పందన ( P <0.003) తగ్గుతాయని వెల్లడించాయి. పరస్పరం, ZD1839 (F 3, 28 = 10.4, P <0.001; Figure 2b) మోతాదులను పెంచడం ద్వారా EGF ఎలుకల PPI స్థాయిలు పెంచబడ్డాయి .

Image

ఎపిడెర్మల్ గ్రోత్ ఫ్యాక్టర్ (ఇజిఎఫ్) ఎలుకల ప్రిపల్స్ ఇన్హిబిషన్ లోటుపై ఎర్బిబి ఇన్హిబిటర్స్ యొక్క ఇంట్రావెంట్రిక్యులర్ అడ్మినిస్ట్రేషన్ యొక్క ప్రభావాలు. ZD1839 ( a, b ) లేదా PD153035 ( c, d ) (రోజుకు 0.12, 1.2 లేదా 12 μg రెండూ) లేదా వాహనం (10% డైమెథైల్ సల్ఫాక్సైడ్) EGF ఎలుకల పార్శ్వ సెరెబ్రోవెంట్రికల్‌కు 10 రోజులు నిర్వహించబడతాయి. ( , సి ) 120-డిబి టోన్‌కు ఇజిఎఫ్ ఎలుకల పల్స్-ఒంటరిగా ఆశ్చర్యంగా కొలుస్తారు మరియు ప్లాట్ చేయబడింది. ( బి, డి ) 75-, 80- మరియు 85-డిబి ప్రిపల్స్ ఉద్దీపనల సమక్షంలో ZD1839 లేదా PD153035 మోతాదులను స్వీకరించే EGF ఎలుకల ప్రిపల్స్ నిరోధం నిర్ణయించబడింది. బార్లు అంటే ± sem ( n = 6-10 ప్రతి). ** పి <0.01, *** పి <0.001, ఫిషర్ ఎల్‌ఎస్‌డి వాహనాన్ని స్వీకరించే ఇజిఎఫ్ ఎలుకలతో పోలిస్తే.

పూర్తి పరిమాణ చిత్రం

PD153035 (గణాంకాలు 2 సి మరియు డి) యొక్క మరొక ఎర్బిబి ఇన్హిబిటర్ యొక్క ప్రవర్తనా ప్రభావాలను మేము అదేవిధంగా పరీక్షించాము. ఈ నిరోధకం ఎర్బిబి 1-4 గ్రాహకాల కోసం విస్తృత వర్ణపటాన్ని కలిగి ఉంది. PD153035 మోతాదులను పెంచడం ద్వారా EGF ఎలుకల ప్రారంభ స్పందనలు గణనీయంగా ఆకర్షించబడ్డాయి (F 1, 36 = 49.3, P <0.001; Figure 2c). పోస్ట్-హాక్ విశ్లేషణలు EGF ఎలుకల ఆశ్చర్యకరమైన ప్రతిస్పందనలు అధిక మోతాదులో గణనీయంగా తగ్గాయని సూచిస్తున్నాయి (రోజుకు 1.2 మరియు 12 μg). PD153035 యొక్క మోతాదు PPI స్థాయిలపై (F 3, 18 = 30.2, P <0.001) గణనీయమైన ప్రధాన ప్రభావాన్ని ప్రదర్శిస్తుందని రెండు-మార్గం పునరావృత ANOVA వెల్లడించింది, అయితే ప్రిపల్స్ (F 6, 72 = 1.72, P = 0.128; మూర్తి 2 డి). PD153035 (రోజుకు 0.12–12) g) EGF ఎలుకల PPI లోటులను గణనీయంగా మెరుగుపరుస్తుందని పోస్ట్-హాక్ పరీక్షలు కనుగొన్నాయి. గమనించదగినది, PD153035 యొక్క అతి తక్కువ మోతాదు (రోజుకు 0.12 μg) మరియు ZD1839 యొక్క మధ్య మోతాదు (రోజుకు 1.2 μg) రెండూ EGF ఎలుకల పిపిఐ లోటులను వారి ఆశ్చర్యకరమైన వ్యాప్తిని మార్చకుండా మెరుగుపరుస్తాయి, ఇది PPI స్థాయిల యొక్క స్వతంత్రతను సూచిస్తుంది ఈ ప్రయోగాలలో పల్స్-ఒంటరిగా ఆశ్చర్యకరమైన ప్రతిస్పందనలు.

వివోలో ZD1839 యొక్క ఎర్బిబి 1 నిరోధం, కానీ పిడి 153035 కాదు, మా మునుపటి అధ్యయనంలో ధృవీకరించబడింది. PD153035 ను నియంత్రించడానికి, ఇక్కడ, EGF ఎలుకల వాహనం (10% DMSO) లేదా PD153035 (రోజుకు 12 μg; టేబుల్ 1) యొక్క వివిధ మెదడు కణజాలాలలో ఎర్బిబి 1 ఫాస్ఫోరైలేషన్ స్థాయిలను కొలిచాము. రెండు-మార్గం ANOVA PD153035 (F 1, 40 = 8.94, P = 0.005) మరియు మెదడు ప్రాంతం (F 1, 40 = 11.3, P <0.001) యొక్క ముఖ్యమైన ప్రధాన ప్రభావాలను వెల్లడించింది, అయితే EGF మరియు మెదడు ప్రాంతం (F 1, 40 = 1.61, పి = 0.190); ఇది ఎర్బిబి 1 ఫాస్ఫోరైలేషన్ పై పిడి 153035 యొక్క నిరోధక చర్యను నిర్ధారిస్తుంది. పోస్ట్-హాక్ విశ్లేషణలు బేసల్ గాంగ్లియాలో ఎర్బ్బి 1 ఫాస్ఫోరైలేషన్ మరియు సమూహాల మధ్య హిప్పోకాంపస్ యొక్క ముఖ్యమైన తేడాలను గుర్తించాయి, ఇది వివోలో పిడి 153035 చర్య యొక్క ప్రామాణికతను నిర్ధారిస్తుంది.

పూర్తి పరిమాణ పట్టిక

ZD1839 తో గుప్త నిరోధక స్కోర్‌ల మెరుగుదల

భయం నేర్చుకోవడం మరియు గుప్త నిరోధంపై ఎర్బిబి 1 ఇన్హిబిటర్ జెడ్డి 1839 యొక్క ప్రభావాన్ని కూడా మేము పరిశీలించాము. EGF మరియు కంట్రోల్ ఎలుకలు టోన్ క్యూ (సిఎస్; మూర్తి 3) కు ప్రీక్స్పోజర్ లేకపోవడం లేదా లేకపోవడంతో భయం కండిషనింగ్‌కు గురయ్యాయి. EGF (+/−), drug షధ (+/−) మరియు CS (+/−) కు ప్రీఎక్స్పోజర్ యొక్క అంశాలతో కండిషనింగ్ సమయంలో గడ్డకట్టే స్థాయిల కోసం ప్రారంభ మూడు-మార్గం ANOVA ఈ కారకాల యొక్క ప్రధాన ప్రభావాలను కనుగొనలేదు (F 1, 72 = 0.016–2.62, పి = 0.110–0.900) మరియు పరస్పర చర్యలు లేవు (ఎఫ్ 1, 72 = 0.016–0.180, పి = 0.673–0.900) (మూర్తి 3 ఎ). ఇజిఎఫ్ లేదా డ్రగ్ అడ్మినిస్ట్రేషన్ లేదా సిఎస్‌కు ప్రీక్స్‌పోజర్ షాక్ సున్నితత్వాన్ని మార్చలేదని ఇది సూచిస్తుంది. దీనికి విరుద్ధంగా, పరీక్ష వ్యవధిలో స్కోర్‌లను నేర్చుకోవటానికి మూడు-మార్గం ANOVA EGF (F 1, 72 = 5.92, P = 0.018), ప్రీక్స్‌పోజర్ (F 1, 72 = 34.0, P <0.001) మరియు drug షధ (F 1, 72 = 8.92, పి = 0.004) EGF మరియు ప్రీక్స్పోజర్ (F 1, 72 = 5.92, P = 0.018) మధ్య ముఖ్యమైన పరస్పర చర్యతో సహా. పోస్ట్-హాక్ పోలికలు కంట్రోల్ ఎలుకలు వాహనం మరియు drug షధ-చికిత్స సమూహాలలో నేర్చుకునే స్కోర్‌లలో ప్రీక్స్‌పోజర్-నడిచే తగ్గుదలని ప్రదర్శించాయని వెల్లడించింది, అయితే EGF ఎలుకలు drug షధ-చికిత్స సమూహంలో మాత్రమే తగ్గుదల చూపించాయి (మూర్తి 3 బి). ఈ ఫలితాలు EGF ఎలుకలలో భయం అభ్యాసం యొక్క గుప్త నిరోధం దెబ్బతిన్నాయని సూచిస్తున్నాయి, కాని లోటు ZD1839 చికిత్స ద్వారా తీర్చబడింది.

Image

టోన్-ఆధారిత భయం-కండిషనింగ్ యొక్క గుప్త నిరోధంపై ZD1839 ప్రభావాలు. ZD1839 (రోజుకు 1 mg ml; 1 ; 12 μg) లేదా వాహనం (10% డైమెథైల్ సల్ఫాక్సైడ్) ఎపిడెర్మల్ గ్రోత్ ఫ్యాక్టర్ (EGF) లేదా నియోనేట్లుగా ఒక కంట్రోల్ ప్రోటీన్‌తో చికిత్స చేయబడిన ఎలుకల పార్శ్వ సెరెబ్రోవెంట్రికల్‌కు ఇవ్వబడింది. EGF మరియు కంట్రోల్ ఎలుకలలో అభ్యాస సామర్థ్యం మరియు గుప్త నిరోధం టోన్-జత చేసిన భయం-కండిషనింగ్ విధానంతో నిర్ణయించబడ్డాయి మరియు వాహనం- మరియు ZD1839- ప్రేరేపిత సమూహాల మధ్య పోల్చబడ్డాయి. కండిషనింగ్‌కు ఒక రోజు ముందు, ప్రీక్స్‌పోజర్ సమూహంలోని ఎలుకలు షాక్ లేకుండా అదే టోన్ క్యూకు ప్రీక్స్‌పోజ్ చేయబడ్డాయి (+ PRE; n = 10 ఒక్కొక్కటి). నాన్-ప్రీక్స్పోజర్ సమూహంలోని ఎలుకలు నేరుగా 8 వ రోజు ( n = 10 ఒక్కొక్కటి) కండిషనింగ్‌కు లోబడి ఉన్నాయి. కండిషనింగ్ ( ) సమయంలో లేదా పరీక్షా నమూనాలో టోన్ ఎక్స్పోజర్ సమయంలో మీన్ గడ్డకట్టే రేట్లు (%) కొలుస్తారు ( బి ) డేటా ప్రాతినిధ్యం అంటే ± సెమ్ * పి <0.05, ** పి <0.01, *** పి <0.001, ప్రీ-ఎక్స్పోజ్డ్ మరియు ప్రీ-ఎక్స్పోజ్డ్ గ్రూపుల మధ్య మరియు + పి <0.05, వాహన- మరియు drug షధ-చికిత్స సమూహాల మధ్య (ఫిషర్ ఎల్ఎస్డి చేత) పోలిస్తే.

పూర్తి పరిమాణ చిత్రం

వివోలోని నైగ్రల్ డిఎ న్యూరాన్ల కాల్పుల చర్యపై ZD1839 ప్రభావాలు

మా మునుపటి అధ్యయనాలు పాలిడల్ DA విడుదల మరియు DA న్యూరాన్ల యొక్క నాడీ చర్య EGF ఎలుకలలో నియంత్రించబడిందని సూచిస్తున్నాయి. EGF ఎలుకలలో నైగ్రల్ DA న్యూరాన్లపై ZD1839 పరిపాలన యొక్క ప్రత్యక్ష ప్రభావాన్ని అంచనా వేయడానికి, మేము ఈ న్యూరాన్ల నుండి సింగిల్-యూనిట్ రికార్డింగ్‌ను మత్తుమందు స్థితిలో ప్రదర్శించాము (మూర్తి 4). ZD1839 ఇన్ఫ్యూషన్ డోపామినెర్జిక్ న్యూరాన్ల యొక్క కాల్పుల సరళిని మార్చింది, అయినప్పటికీ సగటు కాల్పుల రేటులో గణనీయమైన తేడా లేదు; వాహనాన్ని స్వీకరించే EGF ఎలుకలలో 4.43 ± 0.22 Hz మరియు ZD1839 అందుకున్న EGF ఎలుకలలో 4.05 ± 0.22 Hz. ZD1839 ఇన్ఫ్యూషన్ ఫలితంగా పేలుడులో వచ్చే చిక్కుల సూచిక గణనీయంగా తగ్గింది; వాహనాన్ని స్వీకరించే EGF ఎలుకలకు 32.4 ± 3.3% మరియు ZD1839 ( U = 1505, P = 0.037) అందుకున్న EGF ఎలుకలకు 23.7 ± 3.2%. పేలుడు వ్యవధి యొక్క సగటు శాతం తగ్గింపు ( U = 1531, P = 0.051) వైపు ఉపాంత ప్రాముఖ్యతను ప్రదర్శించింది. DA న్యూరాన్ల యొక్క పేలుడు కాల్పులు వారి టెర్మినల్స్ నుండి దశల DA విడుదలను నడిపిస్తాయి. 34, 35, 36 కాబట్టి, ఈ ఫలితాలు మెదడులోని ఎర్బ్‌బి 1 నిరోధం ఇజిఎఫ్ ఎలుకలలో నైగ్రల్ డిఎ న్యూరాన్‌ల పగిలిపోయే చర్యను పెంచుతుందని సూచిస్తుంది, ఇది ఈ మోడల్‌పై డోపామినెర్జిక్ వ్యతిరేక ప్రభావాలకు దారితీస్తుంది.

Image

ఎపిడెర్మల్ గ్రోత్ ఫ్యాక్టర్ (ఇజిఎఫ్) ఎలుకలలో నైగ్రల్ డోపామైన్ న్యూరాన్ల కాల్పుల చర్యలపై ZD1839 యొక్క ప్రభావాలు. ZD1839 (రోజుకు 0.2 mg ml; 1 ; 2.4 μg) లేదా వాహనం (10% డైమెథైల్ సల్ఫాక్సైడ్) 10-13 రోజులు EGF ఎలుకల పార్శ్వ సెరెబ్రోవెంట్రికిల్‌కు ఇవ్వబడింది. వివో ఎక్స్‌ట్రాసెల్యులర్ రికార్డింగ్‌ను సబ్‌స్టాంటియా నిగ్రా పార్స్ కాంపాక్టాలో (ఐదు ఎలుకల నుండి n = 61–63 కణాలు) ప్రదర్శించారు. డోపామైన్ న్యూరాన్ల యొక్క ఆకస్మిక యూనిట్ కార్యాచరణ స్పైక్ లక్షణాలు మరియు నమూనాల ప్రమాణాలతో గుర్తించబడింది (పదార్థం మరియు పద్ధతులను చూడండి). 34, 35, 36 ( ) సింగిల్-యూనిట్ కార్యాచరణ యొక్క సాధారణ జాడలు ప్రదర్శన కోసం చూపించబడ్డాయి. ( బి ) ఒక పేలుడులో వచ్చే స్పైక్‌ల శాతం మరియు పేలుడు వ్యవధి యొక్క నిష్పత్తి వ్యక్తిగత కణాల కోసం లెక్కించబడ్డాయి మరియు మాన్-విట్నీ యొక్క యు -టెస్ట్ చేత సమూహాల మధ్య పోల్చబడ్డాయి; * పి <0.05. క్షితిజసమాంతర పంక్తులు పంపిణీ యొక్క సగటు విలువలను సూచిస్తాయి.

పూర్తి పరిమాణ చిత్రం

ZD1839 మరియు యాంటిసైకోటిక్ మందులు పాలిడల్ డోపామినెర్జిక్ జీవక్రియను సాధారణీకరిస్తాయి

ఎర్బ్‌బి 1 ఇన్హిబిటర్ మిడ్‌బ్రేన్ డోపామినెర్జిక్ న్యూరాన్‌లపై పనిచేస్తుందని పై ఎలక్ట్రోఫిజియోలాజికల్ ఫలితాలు సూచిస్తున్నాయి. వారి లక్ష్య ప్రాంతాలలో డోపామినెర్జిక్ రాష్ట్రాల కోసం ZD1839 ఇన్ఫ్యూషన్ యొక్క c షధ పరిణామాలను అంచనా వేయడానికి, మేము ఫ్రంటల్ కార్టెక్స్, స్ట్రియాటం, న్యూక్లియస్ అక్యూంబెన్స్, గ్లోబస్ పాలిడస్ మరియు హిప్పోకాంపస్‌లోని DA మరియు దాని జీవక్రియల (DOPAC మరియు HVA) యొక్క కణజాల కంటెంట్‌ను కొలిచాము. గ్లోబస్ పాలిడస్ మినహా, వాహన-ప్రేరేపిత EGF ఎలుకల అన్ని ఇతర ప్రాంతాలు వాహన-ప్రేరేపిత నియంత్రణ ఎలుకలతో పోలిస్తే (DA), DOPAC మరియు / లేదా HVA స్థాయిలలో పెరుగుదల యొక్క సంక్లిష్ట నమూనాలను ప్రదర్శించాయి (అనుబంధ పట్టిక 1). ఆ మెదడు ప్రాంతాలలో, EGF ఎలుకలకు ZD1839 కషాయం అన్ని DA, HVA మరియు DOPAC స్థాయిలలో పాలిడల్ అసాధారణతలను మెరుగుపరిచింది (మూర్తి 5a). ఈ మెదడు ప్రాంతంలో యాంటీ-డోపామినెర్జిక్ ప్రభావాలు చాలా గొప్పవి. పాలిడల్ హైపర్‌డోపామినెర్జిక్ స్థితి EGF ఎలుకల పిపిఐ లోటులకు లోబడి ఉందనే వాస్తవం ప్రాంతీయ ప్రభావాలకు అనుగుణంగా ఉంటుంది. [43 ] అయితే, ఇతర మెదడు ప్రాంతాలలో, met షధ పరిపాలన జీవక్రియల మధ్య లేదా EGF మరియు నియంత్రణ ఎలుకల మధ్య అటువంటి స్థిరత్వాన్ని ప్రదర్శించడంలో విఫలమైంది.

Image

పాలిడల్ డోపామైన్ జీవక్రియపై ZD1839 మరియు సాంప్రదాయ యాంటిసైకోటిక్స్ యొక్క ప్రభావాలు. ( ) ZD1839 (రోజుకు 12 μg, ఇంట్రావెంట్రిక్యులర్), ( బి ) రిస్పెరిడోన్ (రోజుకు 1.0 మి.గ్రా) లేదా హలోపెరిడోల్ (రోజుకు 0.3 మి.గ్రా) ఎపిడెర్మల్ గ్రోత్ ఫ్యాక్టర్ (ఇజిఎఫ్) మరియు నియంత్రణ ఎలుకలకు 10–13 రోజులు ఉపశీర్షికగా ఇవ్వబడింది. గ్లోబస్ పాలిడస్ నుండి మోనోఅమైన్‌లను సేకరించారు, మరియు డోపామైన్, 3, 4-డైహైడ్రాక్సిఫెనిలాసిటిక్ ఆమ్లం (డోపాక్) మరియు హోమోవానిలిక్ ఆమ్లం (హెచ్‌విఎ) యొక్క కణజాల సాంద్రతలు ఎలక్ట్రోకెమికల్ డిటెక్టర్‌తో కలిపి అధిక-పనితీరు గల ద్రవ క్రోమాటోగ్రఫీ ద్వారా కొలుస్తారు. * P <0.05, ** P <0.01, *** P <0.001, వాహనాన్ని స్వీకరించే నియంత్రణ ఎలుకలతో పోలిస్తే మరియు + P <0.05, ++ P <0.01, +++ P <0.001, వాహనాన్ని స్వీకరించే EGF ఎలుకలతో పోలిస్తే ఫిషర్ ఎల్‌ఎస్‌డి.

పూర్తి పరిమాణ చిత్రం

సాంప్రదాయిక యాంటిసైకోటిక్స్, హలోపెరిడోల్ మరియు రిస్పెరిడోన్ నుండి EGF ఎలుకలకు (మూర్తి 5 బి) సబ్‌క్రోనిక్ పరిపాలన తరువాత పాలిడల్ డిఎ జీవక్రియపై ఇలాంటి c షధ ప్రభావాలు గమనించబడ్డాయి. ఈ యాంటిసైకోటిక్స్ EGF ఎలుకల గ్లోబస్ పాలిడస్‌లో DA కంటెంట్ మరియు DOPAC స్థాయిలను సాధారణీకరించాయి. ఈ ఫలితాలు ఎర్బిబి 1 ఇన్హిబిటర్ ఈ మోడల్ యొక్క పాలిడల్ హైపర్‌డోపామినెర్జిక్ స్థితిని మెరుగుపర్చడానికి సాంప్రదాయ యాంటిసైకోటిక్‌లను అనుకరిస్తుందని సూచిస్తున్నాయి.

EGF ఎలుకల పాలిడల్ డోపామినెర్జిక్ సమలక్షణాలపై ZD1839 యొక్క ప్రభావాలు

మా మునుపటి కాగితంలో, డోపామినెర్జిక్ మార్కర్ల (అంటే టైరోసిన్ హైడ్రాక్సిలేస్, VMAT మరియు DA ట్రాన్స్పోర్టర్) యొక్క ప్రోటీన్ స్థాయిలు EGF ఎలుకల గ్లోబస్ పాలిడస్‌లో నియంత్రించబడిందని మేము చూపించాము. ప్రస్తుత అధ్యయనంలో, ఎర్బిబి 1 నిరోధకం ఈ గుర్తులపై వ్యతిరేక ప్రభావాలను ఉత్పత్తి చేయగలదా లేదా డీఏ జీవక్రియ మరియు సిగ్నలింగ్, కాటెకాల్- ఓ -మెథైల్ట్రాన్స్ఫేరేస్ మరియు డిఎఆర్పిపి 32 (మూర్తి 6) కు దోహదం చేసే అణువులపై ప్రభావం చూపుతుందా అని మేము పరిశీలించాము. అంతర్గత నియంత్రణల కోసం, కణజాల నమూనాలలో న్యూరాన్లు మరియు కణాల సాంద్రతను వరుసగా అంచనా వేయడానికి మేము న్యూరాన్-నిర్దిష్ట ఎనోలేస్ మరియు యూకారియోటిక్ పొడుగు కారకం 2 ను ఉపయోగించాము. వాహనాన్ని స్వీకరించే వారితో పోలిస్తే ZD1839 అందుకున్న EGF ఎలుకలలో టైరోసిన్ హైడ్రాక్సిలేస్ మరియు DA ట్రాన్స్పోర్టర్ స్థాయిలలో గణనీయమైన తగ్గుదల కనిపించింది. అదనంగా, ఎర్బిబి 1 ఇన్హిబిటర్ EGF ఎలుకలలో DARPP32 రోగనిరోధక శక్తిని తగ్గించింది. దీనికి విరుద్ధంగా, EGF ఎలుకలలో VMAT స్థాయిలలో బేసల్ పెరుగుదల ఉన్నప్పటికీ, కాటెకాల్- O- మెథైల్ట్రాన్స్ఫేరేస్ మరియు VMAT2 లేదా న్యూరాన్-స్పెసిఫిక్ ఎనోలేస్ మరియు యూకారియోటిక్ పొడుగు కారకం 2 యొక్క రోగనిరోధక శక్తిని నిరోధకం మార్చలేదు. [43] ZD1839 యొక్క ఇంట్రాసెరెబ్రోవెంట్రిక్యులర్ అడ్మినిస్ట్రేషన్ DA సంశ్లేషణ మరియు తీసుకునే చర్యలో పాల్గొన్న అణువుల వ్యక్తీకరణను తగ్గిస్తుందని ఈ ఫలితాలు సూచిస్తున్నాయి. ఏదేమైనా, ఎర్బిబి 1 ఇన్హిబిటర్ చేత ప్రభావితమైన వ్యక్తిగత అణువులు ఈ మోడల్ యొక్క పాలిడల్ న్యూరోపాథాలజీలో చిక్కుకున్న వాటికి సమానంగా లేవు. 43

Image

ఎపిడెర్మల్ గ్రోత్ ఫ్యాక్టర్ (ఇజిఎఫ్) ఎలుకల గ్లోబస్ పాలిడస్‌లోని డోపామినెర్జిక్ గుర్తులపై ZD1839 యొక్క ప్రభావాలు. ( ) ZD1839 లేదా వాహనం (8 వారాల వయస్సు, n = 6 ఎలుకలు) స్వీకరించే EGF ఎలుకల గ్లోబస్ పాలిడస్ నుండి ప్రోటీన్ సారం తయారు చేయబడింది మరియు SDS- పాలియాక్రిలమైడ్ జెల్ ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్‌కు లోబడి ఉంటుంది. టైరోసిన్ హైడ్రాక్సిలేస్ (TH), వెసిక్యులర్ మోనోఅమైన్ ట్రాన్స్పోర్టర్ 2 (VMAT2), డోపామైన్ ట్రాన్స్పోర్టర్ (DAT), DARPP32 మరియు కాటెకాల్- O- మెథైల్ట్రాన్స్ఫేరేస్ (COMT) లతో పాటు న్యూరాన్-స్పెసిఫిక్ ఎనోలేస్ (NSE) కు వ్యతిరేకంగా సూచించిన ప్రతిరోధకాలతో ఇమ్యునోబ్లోట్‌లను పరిశీలించారు. ) మరియు యూకారియోటిక్ పొడుగు కారకం 2 (eEF2; అంతర్గత నియంత్రణలు). బ్లాట్‌లోని ఇమ్యునోరేయాక్టివిటీని చల్లబడిన సిసిడి కెమెరా ద్వారా బంధించి ఇమేజింగ్ సాఫ్ట్‌వేర్ ద్వారా కొలుస్తారు. ( బి ) ఎలుకలను నియంత్రించడానికి సాధారణీకరించిన శాతం నిష్పత్తి లెక్కించబడుతుంది మరియు పన్నాగం చేయబడింది (సగటు ± సెమ్). * పి <0.05, *** పి <0.001 బై టెయిల్డ్ టి -టెస్ట్.

పూర్తి పరిమాణ చిత్రం

ZD1839 యొక్క ఇంట్రావెంట్రిక్యులర్ అడ్మినిస్ట్రేషన్ యొక్క పరిమిత భౌతిక ప్రభావాలు

శరీర బరువు పెరుగుటను పర్యవేక్షించడం ద్వారా మరియు లోకోమోటర్ కార్యకలాపాలను కొలవడం ద్వారా మేము ZD1839 యొక్క సంభావ్య విపరీత ప్రభావాలను అంచనా వేసాము. ZD1839 యొక్క సబ్‌క్రోనిక్ ఇంట్రావెంట్రిక్యులర్ ఇన్ఫ్యూషన్ ఒక అన్వేషణాత్మక ప్రవర్తన పరీక్ష (సప్లిమెంటరీ టేబుల్ 2) ద్వారా పర్యవేక్షించబడిన లోకోమోషన్‌ను మార్చలేదు. ప్రయాణ దూరం కోసం రెండు-మార్గం ANOVA EGF (F 1, 23 = 3.60, P = 0.071) లేదా ZD1839 (F 1, 23 = 0.327, P = 0.573) యొక్క ముఖ్యమైన ప్రభావాలను వెల్లడించలేదు మరియు పరస్పర చర్యలు లేవు (F 1, 23 = 0.035 పి = 0.852). అదేవిధంగా, 14 రోజుల మందుల కాలంలో సగటు బరువు పెరుగుట EGF (F 1, 23 = 0.184, P = 0.672) లేదా ZD1839 (F 1, 23 = 1.10, P = 0.306) ద్వారా గణనీయంగా ప్రభావితం కాలేదు, మరియు అక్కడ ఉంది పరస్పర చర్య లేదు (F 1, 23 = 1.31, P = 0.265; అనుబంధ పట్టిక 2). ఈ ఫలితాలు ZD1839 ఇన్ఫ్యూషన్ యొక్క విపరీత ప్రభావాలు ఇచ్చిన మోతాదులో మరియు ప్రస్తుత విధానంతో పరిమితం చేయబడినట్లు సూచిస్తున్నాయి.

చర్చా

మెదడు ErbB1 యొక్క ఉద్దీపన DA విడుదలను పెంచుతుంది మరియు యుక్తవయస్సులో DA- సంబంధిత ప్రవర్తనా లోటులను ఉత్పత్తి చేస్తుంది. 6, 8 ఈ విధంగా, ఎర్బ్‌బి 1 సిగ్నలింగ్ యొక్క అటెన్యుయేషన్ యాంటీ-డోపామినెర్జిక్ ఫార్మకాలజీని కలిగిస్తుందని మరియు DA- సంబంధిత ప్రవర్తనా బలహీనతలను మెరుగుపరుస్తుందని మేము hyp హించాము. 10, 39 ఈ పరికల్పనను పరీక్షించడానికి, మేము స్కిజోఫ్రెనియా కోసం జంతు నమూనాలో నిర్దిష్ట ఎర్బిబి 1 ఇన్హిబిటర్ (జెడ్డి 1839) మరియు విస్తృత ఎర్బిబి 1-4 ఇన్హిబిటర్ (పిడి 153035) యొక్క ఇంట్రావెంట్రిక్యులర్ ఇన్ఫ్యూషన్‌ను ప్రదర్శించాము మరియు డోపామినెర్జిక్ న్యూరాన్లు మరియు జీవక్రియపై మరియు డిఎపై వాటి ప్రభావాలను పరిశీలించాము. అనుబంధ సంఘాలు.

స్కిజోఫ్రెనియా కోసం సైటోకిన్ ప్రేరిత జంతు నమూనాను ఉపయోగించి, ప్రస్తుత ప్రయోగాల నుండి మేము ఈ క్రింది ఫలితాలను పొందాము. (1) ZD1839 మరియు PD153035 యొక్క సబ్‌క్రోనిక్ ఇంట్రావెంట్రిక్యులర్ ఇన్ఫ్యూషన్ PPI లోటులను మోతాదు-ఆధారిత పద్ధతిలో తగ్గించింది. (2) ఈ ఎర్బిబి ఇన్హిబిటర్లు ఈ జంతు నమూనా యొక్క పల్స్-ఒంటరిగా ఆశ్చర్యకరమైన పెరుగుదలను సాధారణీకరించాయి, అయినప్పటికీ నిరోధకాల యొక్క ప్రభావవంతమైన మోతాదు పల్స్-ఒంటరిగా స్టార్టెల్ మరియు పిపిఐల మధ్య గణనీయంగా తేడా ఉంది. (3) టోన్-జత చేసిన భయం కండిషనింగ్ ఉదాహరణలో ZD1839 నేర్చుకోవడం యొక్క గుప్త నిరోధం యొక్క అంతరాయాన్ని కూడా మెరుగుపరిచింది. (4) ZD1839 ఇన్ఫ్యూషన్ నైగ్రల్ DA న్యూరాన్ల యొక్క పేలుడు కాల్పుల రేటును గణనీయంగా తగ్గించింది. (5) ZGF1839 EGF ఎలుకల గ్లోబస్ పాలిడస్‌లో అనేక డోపామినెర్జిక్ గుర్తులను మరియు DA జీవక్రియను కూడా తగ్గించింది. సెన్సార్‌మోటర్ గేటింగ్‌లో ప్రవర్తనా లోపాలు మరియు అభ్యాసం యొక్క గుప్త నిరోధం అసాధారణమైన DA న్యూరోట్రాన్స్మిషన్‌ను కలిగి ఉన్నాయని మరియు స్కిజోఫ్రెనియా యొక్క సానుకూల లక్షణాలకు సంబంధించిన ప్రవర్తనా ఎండోఫెనోటైప్‌లను సూచిస్తుందని నివేదించబడింది. 44, 45 అయితే, ప్రస్తుత అధ్యయనంలో, ఈ నమూనా యొక్క సామాజిక పరస్పర లోటును తీర్చడంలో PD153035 విఫలమైంది (అనుబంధ మూర్తి 1). అందువల్ల, ఎర్బ్‌బి 1 నిరోధకాలు సానుకూల లక్షణాలకు సంబంధించిన ప్రవర్తనా ఎండోఫెనోటైప్‌లపై ప్రభావవంతంగా కనిపిస్తాయి.

ప్రస్తుత జంతు నమూనా EGF కు అస్థిరమైన బహిర్గతం ద్వారా స్థాపించబడింది మరియు నియోనాటల్ దశలో అసాధారణమైన ఎర్బిబి సిగ్నలింగ్‌ను ప్రేరేపించింది. 1, 6 అందువల్ల, ఇచ్చిన 6 వారాల విరామంతో యుక్తవయస్సులో EGF ఎక్స్పోజర్ మరియు ఎర్బిబి ఇన్హిబిటర్ ఛాలెంజ్ యొక్క ప్రత్యక్ష పరస్పర చర్య లేదని మేము అనుకుంటాము. మెదడులోని ఏదైనా భాగం (ల) లో యుక్తవయస్సు వచ్చే వరకు హైపర్ ఎర్బ్‌బి 1 సిగ్నల్స్ కొనసాగుతున్నప్పటికీ, మా ప్రాథమిక అధ్యయనాలు ఈ for హకు (డేటా చూపబడలేదు) ఆధారాలు పొందడంలో విఫలమవుతున్నాయి. ఈ ఫార్మకోలాజికల్ అధ్యయనంలో మేము EGF మోడల్‌ను ఉపయోగించాము, దీని యొక్క న్యూరోపాథాలజీ మరియు ప్రవర్తనా లోపాలు మనకు సాపేక్షంగా బాగా వర్ణించబడ్డాయి. 43, 46, 47, 48 దీనికి విరుద్ధంగా, న్యూరోపాథలాజికల్ అండర్ పిన్నింగ్స్ మరియు / లేదా ప్రభావిత మెదడు ప్రాంతం (లు) తరచుగా ఇతర జంతు నమూనాలలో పూర్తిగా వర్గీకరించబడవు. 48, 49, 50 వాస్తవానికి, నియోనాటల్ హిప్పోకాంపల్ లెసియన్ మరియు మెథాంఫేటమిన్ ఛాలెంజ్ ఉపయోగించి ఇతర మోడళ్లలో ఎర్బ్‌బి ఇన్హిబిటర్లను వారి యాంటిసైకోటిక్ లాంటి చర్యలను అంచనా వేయడానికి మేము గతంలో పరీక్షించాము. 24, 25 అందువల్ల, బహుళ జంతు నమూనాలలో ఎర్బ్‌బి 1 నిరోధకాల యొక్క ప్రభావ ప్రభావం వ్యక్తిగత జంతువుల నమూనాల ఎటియోలాజిక్ మూలాలతో సంబంధం లేకుండా, స్కిజోఫ్రెనియాకు సంబంధించిన ప్రవర్తనా ఎండోఫెనోటైప్‌లపై ఎర్బిబి నిరోధకాలు సార్వత్రిక యాంటీ-డోపామినెర్జిక్ ప్రభావాలను చూపుతాయని సూచిస్తున్నాయి.

నిగ్రల్ డిఎ న్యూరాన్లు ఎర్బిబి 1 మరియు ఎర్బిబి 4 గ్రాహకాలు మరియు వాటి ఎంఆర్ఎన్ఏలను వ్యక్తపరుస్తాయి. 4, 5 ఇంకా, EGF తో స్థానిక సవాలు అనేక మెదడు ప్రాంతాలలో DA విడుదల మరియు జీవక్రియను రేకెత్తిస్తుంది. ఈ నివేదికలను ధృవీకరిస్తూ, ప్రస్తుత అధ్యయనం ZD1839 తో ఎండోజెనస్ ఎర్బిబి 1 సిగ్నలింగ్ యొక్క దిగ్బంధం నైగ్రల్ డిఎ న్యూరాన్లు మరియు అటెన్యూయేటెడ్ పాలిడల్ డిఎ జీవక్రియ యొక్క పగిలిపోయే చర్యను తగ్గిస్తుందని నిరూపించింది. ఏదేమైనా, సింగిల్-యూనిట్ రికార్డింగ్ నుండి వచ్చిన ఫలితాలు ZD1839- ప్రేరేపిత మరియు వాహన-ప్రేరేపిత సమూహాల మధ్య వ్యక్తిగత కణాల పగిలిపోయే సూచికల పంపిణీలో గణనీయమైన అతివ్యాప్తులను చూపించాయి. అతివ్యాప్తులు నైగ్రల్ డిఎ న్యూరాన్‌ల యొక్క ఒక నిర్దిష్ట ఉప-జనాభా బహుశా ఈ నిరోధకానికి ప్రతిస్పందించాయని సూచిస్తున్నాయి. ఎర్బిబి 1 ఇన్హిబిటర్ యొక్క ఇంట్రావెంట్రిక్యులర్ అడ్మినిస్ట్రేషన్ వివిధ మెదడు ప్రాంతాలలో ఎర్బిబి 1 ఫాస్ఫోరైలేషన్ యొక్క అటెన్యుయేషన్కు కారణమైనప్పటికీ, గ్లోబస్ పాలిడస్ ఎర్బిబి 1-కినేస్ నిరోధం యొక్క లక్ష్య ప్రదేశంగా ఉంటుందని మేము మొదట్లో భావించాము మరియు ఈ పరికల్పనను పరీక్షించాము. అయితే, అది అలా కాదు; ZD1839 యొక్క ప్రత్యక్ష ఇంట్రాపాలిడల్ ఇన్ఫ్యూషన్ దాని ఇంట్రావెంట్రిక్యులర్ అడ్మినిస్ట్రేషన్ యొక్క చర్యను అనుకరించడంలో విఫలమైంది (అనుబంధ మూర్తి 2). ZD1839 యొక్క సబ్‌క్రోనిక్ ఇంట్రాపాలిడల్ ఇన్ఫ్యూషన్ EGF ఎలుకల PPI స్థాయిలపై గణనీయమైన ప్రభావాలను చూపలేదు. ఈ వ్యత్యాసం ZD1839 కట్టుబడి మరియు ప్రతిస్పందించిన ప్రాంతం (లు) ఈ మోడల్ యొక్క ప్రవర్తనా లోటులు మరియు న్యూరోపాథాలజీకి (అంటే గ్లోబస్ పాలిడస్) కారణమైన ప్రాంతానికి భిన్నంగా ఉంటుందని సూచిస్తుంది. 43, 51 ఈ సందర్భంలో, ఎర్బిబి 1-కినేస్ ఇన్హిబిటర్స్ యొక్క ఫార్మకోలాజికల్ మెకానిజానికి సంబంధించి అనేక ప్రశ్నలు ఇప్పటికీ ఉన్నాయి.

క్లోజాపైన్ లేదా రిస్పెరిడోన్‌తో సబ్‌క్రోనిక్ చికిత్స పిపిఐ యొక్క ప్రవర్తనా లోటులను మరియు ప్రస్తుత ఇజిఎఫ్ మోడల్ యొక్క గుప్త నిరోధాన్ని మెరుగుపరుస్తుంది. 6, 43 ఆసక్తికరంగా, క్వినజోలిన్ ఎర్బిబి 1 ఇన్హిబిటర్ మరియు సాంప్రదాయ యాంటిసైకోటిక్స్ పాలిడల్ డిఎ జీవక్రియలో ఇలాంటి ఫార్మకోలాజికల్ ప్రొఫైల్‌ను ప్రదర్శిస్తాయి. ZD1839 మరియు రిస్పెరిడోన్ రెండూ అధిక DA కంటెంట్‌ను సాధారణీకరించాయని మరియు EGF ఎలుకల గ్లోబస్ పాలిడస్‌లో స్థానిక DA జీవక్రియను ఆకర్షించాయని మేము కనుగొన్నాము. రిస్పెరిడోన్ యొక్క ఈ యాంటీ-డోపామినెర్జిక్ దృగ్విషయం మైక్రోడయాలసిస్ చేత కొలవబడినట్లుగా EGF ఎలుకల గ్లోబస్ పాలిడస్‌లో పెరిగిన DA విడుదలను ఈ యాంటిసైకోటిక్ సాధారణీకరిస్తుందని మా మునుపటి నివేదికకు అనుగుణంగా ఉంది. అయినప్పటికీ, ప్రభావిత DA జీవక్రియల యొక్క రసాయన స్వభావం ZD1839 మరియు రిస్పెరిడోన్ మధ్య విభిన్నంగా ఉంది; ErbB1 నిరోధకం DOPAC మరియు HVA విషయాలను గణనీయంగా తగ్గించింది, అయితే రిస్పెరిడోన్ DOPAC కంటెంట్ మాత్రమే తగ్గింది. అదనంగా, ఈ drugs షధాల మధ్య కొన్ని కార్యాచరణ వ్యత్యాసాలు ఉన్నాయి; రిస్పెరిడోన్ EGF ఎలుకల అధిక పల్స్-ఒంటరిగా ఆశ్చర్యపరిచే వ్యాప్తిపై మితమైన ప్రభావాలను కలిగి ఉంటుంది, అయితే ఎర్బిబి నిరోధకాలు ఆశ్చర్యకరమైన ఆమ్ప్లిట్యూడ్లను గణనీయంగా తగ్గించాయి. [43 ] అదనంగా, రిస్పెరిడోన్, కానీ పిడి 153035 కాదు, ఇజిఎఫ్ ఎలుకల (ఎంఎం, ప్రచురించని డేటా) యొక్క సామాజిక పరస్పర చర్యలో లోపాలను తగ్గించింది. అందువల్ల, క్వినజోలిన్ ఎర్బిబి 1 ఇన్హిబిటర్స్ యొక్క c షధ చర్యలు సారూప్యమైనవి కాని సాంప్రదాయ యాంటిసైకోటిక్స్‌తో సమానంగా ఉండవు.

ఎర్బిబి సిగ్నల్ మరియు సాంప్రదాయిక యాంటిసైకోటిక్స్ మధ్య సంభావ్య pharma షధ సంబంధాలు ఉన్నాయి. 52, 53 సాధారణ ఎలుకల ఫాంటల్ కార్టెక్స్‌లో, హలోపెరిడోల్ మరియు క్లోజాపైన్‌తో ఎలుకల దీర్ఘకాలిక చికిత్స వరుసగా ఎర్బిబి 4 స్థాయిలు మరియు న్యూరేగులిన్ -1 తగ్గింది. 54, 55 పెరీరా మరియు ఇతరులు. 19, 56 క్లోజాపైన్‌తో ఎర్బ్‌బి 1 సిగ్నలింగ్ నియామకాన్ని నివేదించింది; అనగా, క్లోజాపైన్ యొక్క ఒక షాట్ ఎలుకల ఫ్రంటల్ కార్టెక్స్‌లో సానుకూల ఎర్బ్‌బి 1 సిగ్నలింగ్‌ను ప్రేరేపిస్తుంది, రచయితలు ఈ of షధం యొక్క ప్రత్యేకమైన యాంటిసైకోటిక్ ప్రొఫైల్‌లో చిక్కుకున్నారు. యాంటిసైకోటిక్ పరిపాలన యొక్క వివిధ మోతాదులు మరియు రూపకల్పన తరచుగా వ్యతిరేక పరమాణు సంకేతాలు లేదా ప్రత్యేకమైన c షధ పరిణామాలకు దారితీస్తుంది. [57] అందువల్ల, ఈ మునుపటి నివేదికలు ప్రస్తుత ఫలితాలకు విరుద్ధంగా ఉండకపోవచ్చు మరియు రెండూ యాంటిసైకోటిక్ ఫార్మకాలజీలో ఎర్బిబి సిగ్నలింగ్ యొక్క ప్రమేయానికి మద్దతు ఇస్తాయి. డోపామినెర్జిక్ పనిచేయకపోవడం కలిగిన స్కిజోఫ్రెనియా లక్షణాలకు ఎర్బిబి ఇన్హిబిటర్లను నవల ప్రోడ్రగ్‌గా అభివృద్ధి చేయవచ్చని మేము ఆశిస్తున్నాము.

అనుబంధ సమాచారం

PDF ఫైళ్లు

  1. 1.

    అనుబంధ సమాచారం

    అనువాద సైకియాట్రీ వెబ్‌సైట్ (//www.nature.com/tp) లోని కాగితంతో అనుబంధ సమాచారం