ఎలెక్ట్రోకాన్వల్సివ్ థెరపీ మాంద్యం లో ప్లాస్మా పిగ్మెంట్ ఎపిథీలియం-ఉత్పన్న కారకాన్ని మాడ్యులేట్ చేస్తుంది: ఒక ప్రోటీమిక్స్ అధ్యయనం | అనువాద మనోరోగచికిత్స

ఎలెక్ట్రోకాన్వల్సివ్ థెరపీ మాంద్యం లో ప్లాస్మా పిగ్మెంట్ ఎపిథీలియం-ఉత్పన్న కారకాన్ని మాడ్యులేట్ చేస్తుంది: ఒక ప్రోటీమిక్స్ అధ్యయనం | అనువాద మనోరోగచికిత్స

Anonim

విషయము

  • విశ్లేషణ గుర్తులు
  • మాలిక్యులర్ న్యూరోసైన్స్

నైరూప్య

తీవ్రమైన మాంద్యానికి ఎలెక్ట్రోకాన్వల్సివ్ థెరపీ (ECT) అత్యంత ప్రభావవంతమైన చికిత్స, అయినప్పటికీ దాని చర్య యొక్క విధానం పూర్తిగా అర్థం కాలేదు. పరిధీయ రక్త ప్రోటీమిక్ విశ్లేషణలు ECT యొక్క పరమాణు విధానాలపై అంతర్దృష్టులను అందించవచ్చు. ఆరోగ్యకరమైన నియంత్రణలతో పాటు EFFECT-Dep ట్రయల్ (తీవ్రమైన మాంద్యంలో ఎలక్ట్రోకాన్వల్సివ్ థెరపీ యొక్క ప్రభావాన్ని పెంచుతుంది; ISRCTN23577151) లో భాగంగా పెద్ద డిప్రెసివ్ ఎపిసోడ్ ఉన్న రోగులను నియమించారు. డిస్కవరీ-ఫేజ్ స్టడీగా, జెల్ ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్ మరియు మాస్ స్పెక్ట్రోమెట్రీలో 2 డైమెన్షనల్ వ్యత్యాసాన్ని ఉపయోగించి రోగి ప్లాస్మా ప్రీ / పోస్ట్-ఇసిటి ( n = 30) విశ్లేషించబడింది. ఇమ్యునోడెటెక్షన్ పద్ధతులను ఉపయోగించి నిర్ధారణ అధ్యయనాల కోసం గుర్తించబడిన ప్రోటీన్లు ఎంపిక చేయబడ్డాయి. ధృవీకరించబడిన మార్పులను ధృవీకరించడానికి రోగుల ప్రత్యేక సమూహం (ప్రీ- / పోస్ట్-ఇసిటి; ఎన్ = 57) మరియు సరిపోలిన ఆరోగ్యకరమైన నియంత్రణలు ( ఎన్ = 43) నుండి నమూనాలు ఉపయోగించబడ్డాయి. టార్గెట్ ప్రోటీన్ mRNA స్థాయిలు ఎలుక మెదడు మరియు రక్తంలో ECT యొక్క జంతు నమూనా అయిన ఎలక్ట్రోకాన్వల్సివ్ స్టిమ్యులేషన్ (ECS) తరువాత అంచనా వేయబడ్డాయి. మాస్ స్పెక్ట్రోమెట్రీ ద్వారా గుర్తించబడిన 36 ప్రోటీన్లతో 121 ప్రోటీన్ మచ్చలను ECT గణనీయంగా మార్చిందని మేము కనుగొన్నాము. యాంటీఆన్జియోజెనిక్ మరియు న్యూరోప్రొటెక్టివ్ మధ్యవర్తి పిగ్మెంట్ ఎపిథీలియం-ఉత్పన్న కారకం (పిఇడిఎఫ్) లో పోస్ట్-ఇసిటి పెరుగుదల ( పి <0.01) ను నిర్ధారణ అధ్యయనాలు గుర్తించాయి. ధ్రువీకరణ పని అణగారిన రోగులలో ప్లాస్మా PEDF లో పెరుగుదల ( P <0.001) ను చూపించింది, ఇది నియంత్రణలతో పోలిస్తే ECT తరువాత ( P = 0.03) మరింత పెరిగింది. PEDF స్థాయిలు మూడ్ స్కోర్‌లతో సంబంధం కలిగి లేవు. దీర్ఘకాలిక, కానీ తీవ్రమైనది కాదు, ECS ఎలుక హిప్పోకాంపస్ ( P = 0.02) మరియు డెంటేట్ గైరస్ ( P = 0.03) లలో PEDF mRNA ని పెంచింది. ఈ అధ్యయనం అణగారిన రోగులలో పిఇడిఎఫ్ యొక్క రక్త స్థాయిలలో మార్పులు మరియు ఇసిటి తరువాత మరిన్ని మార్పులను గుర్తించింది, అలాగే ఇసిటి యొక్క జంతు నమూనాలో. ఈ పరిశోధనలు నిరాశకు ECT కి జీవ ప్రతిస్పందనలో PEDF ని సూచిస్తాయి.

పరిచయం

ఎలెక్ట్రోకాన్వల్సివ్ థెరపీ (ECT) అనేది తీవ్రమైన, తరచుగా చికిత్స-నిరోధక, మరియు కొన్నిసార్లు ప్రాణాంతక, నిరాశకు అత్యంత ప్రభావవంతమైన చికిత్స. 1, 2 గమనించదగినది, 1938 నుండి వాడుకలో ఉన్నప్పటికీ, దాని చర్య యొక్క విధానం ఇంకా పూర్తిగా అర్థం కాలేదు. ECT కి సమానమైన జంతు నమూనా అయిన ఎలెక్ట్రోకాన్వల్సివ్ స్టిమ్యులేషన్ (ECS) ECT యొక్క న్యూరోబయోలాజికల్ మెకానిజాలను విశదీకరించడానికి మాకు సహాయపడింది. ఈ విషయంలో, ECS మెదడులో విస్తృతమైన పరమాణు మరియు సెల్యులార్ మార్పులను తీసుకువస్తుందని తేలింది, దాని చర్యలో పాల్గొనవచ్చు. వీటిలో మోనోఅమైన్ న్యూరోట్రాన్స్మిటర్లలో మార్పులు, సినాప్టిక్ ప్లాస్టిసిటీ, న్యూరోజెనిసిస్, హైపోథాలమిక్-పిట్యూటరీ-అడ్రినల్-యాక్సిస్ యాక్టివిటీ మరియు న్యూరోఇన్ఫ్లమేటరీ స్పందన. 3, 4, 5, 6, 7 అయినప్పటికీ, రోగుల మెదడుల్లో పరమాణు మార్పులను కొలిచే క్లినికల్ యుటిలిటీ బయాప్సీలు లేదా సెరెబ్రోస్పానియల్ ఫ్లూయిడ్ (సిఎస్ఎఫ్) పొందే దురాక్రమణ స్వభావం ద్వారా పరిమితం చేయబడింది. ముఖ్యముగా, రక్తం మెదడుకు సంబంధించిన ప్రోటీన్ స్థాయిలను ప్రతిబింబిస్తుందని గతంలో చూపబడింది, మరియు ఆరోగ్యకరమైన మరియు వ్యాధి స్థితులలో రెండింటిలోనూ కేంద్ర నాడీ వ్యవస్థ మరియు అంచుల మధ్య మార్పిడి జరగవచ్చు. 8, 9 అందువల్ల, పరిధీయ రక్తం మరింత వైద్యపరంగా ప్రాప్తి చేయగల కణజాలాన్ని సూచిస్తుంది మరియు సాధారణ పరీక్ష కోసం మరింత తక్కువ గా as మైన, ఆమోదయోగ్యమైన మరియు చవకైన ఎంపికను అందిస్తుంది.

రోగి రక్తంలో నవల అభ్యర్థి ప్రోటీన్ మార్పులను గుర్తించడానికి ఒక నిష్పాక్షిక స్క్రీనింగ్ విధానం ప్రోటీమిక్ పద్ధతులను ఉపయోగించడం, అనగా, ఒక కణం, కణజాలం లేదా జీవిలో వ్యక్తీకరించబడిన అన్ని ప్రోటీన్లను నిర్ణీత పరిస్థితులలో ఒక నిర్దిష్ట సమయంలో అధ్యయనం చేయడం. [10] ప్రోటీమిక్ విశ్లేషణలను ఉపయోగించి, తీవ్రమైన దశ ప్రోటీన్లు, క్యారియర్ ప్రోటీన్లు, సెల్ సిగ్నలింగ్ ప్రోటీన్లు, న్యూరోట్రోఫిక్ కారకాలు మరియు సైటోస్కెలిటల్ మరియు జీవక్రియలలో నిరంతర మార్పులతో సహా ఎలుకల మెదడు మరియు రక్త ప్రోటీమ్‌లలో ECS అనేక రకాల మార్పులను ప్రేరేపిస్తుందని మేము మరియు ఇతరులు చూపించాము. సంబంధిత ప్రోటీన్లు. 11, 12, 13, 14 అయినప్పటికీ, మా జ్ఞానానికి, ECT తో చికిత్స పొందుతున్న అణగారిన రోగుల యొక్క సీరం ప్రోటీమ్‌ను పరిశోధించే ఒక చిన్న పైలట్ అధ్యయనం ( n = 12) మాత్రమే ఇప్పటి వరకు జరిగింది. [15] ఒకే ECT చికిత్స తరువాత, సీరం ప్రోటీన్లు మరియు చిన్న అణువులలో మార్పులు గుర్తించబడ్డాయి, ప్లేట్‌లెట్ కారకం 4 లో మార్పులు గణనీయంగా లక్షణాల మెరుగుదలకు సంబంధించినవి. ఆసక్తికరంగా, సీరం ప్రోటీన్ స్థాయిలలో ECT మార్పులు పూర్తి కోర్సు తర్వాత కూడా కనుగొనబడ్డాయి, అయితే వీటికి లక్షణాల మెరుగుదలకు సంబంధం లేదు. 15

మేము ఇప్పుడు జెల్ ఎలెక్ట్రోఫోరేసిస్ (2D-DIGE) మరియు మాస్ స్పెక్ట్రోమెట్రీలో 2-డైమెన్షనల్ వ్యత్యాసాన్ని ఉపయోగించి పెద్ద ప్రోటీమిక్ డిస్కవరీ-ఫేజ్ స్టడీని నిర్వహించాము. తీవ్ర నిరాశకు గురైన రోగుల నుండి (ముందు) మరియు తరువాత (పోస్ట్-) ECT యొక్క కోర్సు నుండి తీసుకున్న ప్లాస్మా నమూనాలు మరియు మాంద్యం కోసం ECT తో సంబంధం ఉన్న ప్లాస్మా ప్రోటీన్ మార్పులను గుర్తించడానికి చికిత్స తరువాత ఉపశమనం పొందిన వారు విశ్లేషించారు. ఇమ్యునోడెటెక్షన్ పద్ధతులను ఉపయోగించి ఈ ఫలితాలు నిర్ధారించబడ్డాయి. వయస్సు మరియు లైంగిక-సరిపోలిన ఆరోగ్యకరమైన నియంత్రణలతో పాటు ECT కి ముందు మరియు తరువాత తీవ్ర నిరాశకు గురైన రోగుల యొక్క రెండవ సమితి నుండి నమూనాలలో ధ్రువీకరణ పరిశోధనలు జరిగాయి. మేము అదనంగా మా విశ్లేషణలను ECT యొక్క జంతు నమూనాకు విస్తరించాము. అటువంటి ప్రోటీన్ మార్పులను అర్థం చేసుకోవడం ECT కి పరమాణు ప్రతిస్పందన మరియు దాని చర్య యొక్క యంత్రాంగానికి కొత్త అంతర్దృష్టిని అందిస్తుంది.

సామాగ్రి మరియు పద్ధతులు

మానవ పాల్గొనేవారు

ఈ అధ్యయనానికి సెయింట్ పాట్రిక్స్ యూనివర్శిటీ హాస్పిటల్ రీసెర్చ్ ఎథిక్స్ కమిటీ ఆమోదం తెలిపింది. పాల్గొనే వారందరూ వ్రాతపూర్వక సమాచార సమ్మతిని అందించారు. అణగారిన రోగులందరినీ EFFECT-Dep ట్రయల్ (తీవ్రమైన డిప్రెషన్‌లో ECT యొక్క ప్రభావాన్ని మెరుగుపరుస్తుంది; //www.isrctn.com/ISRCTN23577151) లో నియమించారు. [16 ] EFFECT-Dep ట్రయల్ అనేది ఒక వ్యావహారిక, రోగి మరియు రేటర్-బ్లైండ్డ్, పెద్ద మాంద్యం ఉన్న రోగుల యొక్క న్యూనత లేని విచారణ, ఇది వారానికి రెండుసార్లు మోడరేట్ డోస్ బిటెంపోరల్ (1.5 × నిర్భందించే పరిమితి) మరియు అధిక-మోతాదు ఏకపక్ష (6 Iz నిర్భందించే పరిమితి) వాస్తవ ప్రపంచ సాధనలో ECT. ఐర్లాండ్ యొక్క అతిపెద్ద ECT క్లినిక్ (//www.stpatricks.ie/) ను నడుపుతున్న స్వతంత్ర లాభాపేక్షలేని సంస్థ సెయింట్ పాట్రిక్స్ మెంటల్ హెల్త్ సర్వీసెస్‌లో 2008 మరియు 2012 మధ్య నియామకాలు జరిగాయి. ప్రధాన అధ్యయనం కోసం, ఒక పెద్ద నిస్పృహ ఎపిసోడ్ కోసం రోగనిర్ధారణ ప్రమాణాలను పొందిన 138 మంది పాల్గొనేవారు మొదటి ECT సెషన్‌కు ముందు ఒక చికిత్సా సమూహానికి నియమించబడ్డారు మరియు యాదృచ్ఛికంగా కేటాయించారు. విచారణలో చేర్చడానికి, పాల్గొనేవారు 18 ఏళ్లు పైబడి ఉండాలి, DSM-IV యాక్సిస్ I డిజార్డర్స్ 17 కొరకు స్ట్రక్చర్డ్ క్లినికల్ ఇంటర్వ్యూ ద్వారా నిర్ధారణ అయిన ఒక పెద్ద డిప్రెసివ్ ఎపిసోడ్ చికిత్స కోసం ECT కొరకు సూచించబడాలి మరియు ప్రీ-ట్రీట్మెంట్ 24- అంశం హామిల్టన్ డిప్రెషన్ రేటింగ్ స్కేల్ (HAM-D) స్కోరు 21. 18 రోగులు ఈ క్రింది వాటిని కలిగి ఉంటే విచారణలో పాల్గొనడానికి అర్హులు కాదు: సాధారణ అనస్థీషియా లేదా ECT పొందటానికి అనర్హమైన పరిస్థితులు; మునుపటి 6 నెలల్లో ECT; స్కిజోఫ్రెనియా, స్కిజోఆఫెక్టివ్ డిజార్డర్, లేదా న్యూరోడెజెనరేటివ్ లేదా ఇతర న్యూరోలాజికల్ డిజార్డర్ యొక్క చరిత్ర; మునుపటి ఆరు నెలల్లో మద్యం లేదా మాదకద్రవ్య దుర్వినియోగం; అసంకల్పిత స్థితి; సమ్మతిని అందించడానికి అసమర్థత లేదా తిరస్కరణ.

గతంలో వివరించిన విధంగా ECT వారానికి రెండుసార్లు చేతితో పట్టుకున్న ఎలక్ట్రోడ్లతో నిర్వహించబడుతుంది, మెథోహెక్సిటల్ (0.75–1 mg kg −1 ) అనస్థీషియా మరియు సక్సినైల్కోలిన్ (0.5–1 mg kg −1 ) ను కండరాల సడలింపుగా ఉపయోగిస్తుంది. 16, 19 రోగులు ECT సమయంలో వారి సాధారణ మందుల మీద ఉంచారు. ఉపశమన ప్రమాణాలు బేస్లైన్ HAM-D స్కోరులో 60% తగ్గుదల మరియు చికిత్స యొక్క HAM-D స్కోరు 10 వరుసగా రెండు వారాలు. ఉపవాస రక్త నమూనాలను మొదటి ECT చికిత్సకు 0730–0930 గంటలకు మరియు తుది చికిత్స తర్వాత 1–3 రోజుల తరువాత తీసుకున్నారు. మొత్తంమీద, K 2 EDTA గొట్టాలలో (BD, ఆక్స్ఫర్డ్, UK) 10 ml పరిధీయ రక్తాన్ని సేకరించారు. తయారీదారుల మార్గదర్శకాలను అనుసరించి 10 నిమిషాలు గొట్టాలు 2000 ఆర్‌పిఎమ్ వద్ద సెంట్రిఫ్యూజ్ చేయబడ్డాయి మరియు విశ్లేషణ వరకు ప్లాస్మాను −80 at C వద్ద ఆల్కాట్లలో సేకరించి నిల్వ చేశారు.

స్థానిక వార్తాపత్రికలు మరియు సోషల్ మీడియాలో ప్రకటనల ద్వారా ఆరోగ్యకరమైన నియంత్రణలను నియమించారు. ఉపవాస నియంత్రణ రక్త నమూనాలను అంచనా రోజులలో 0730 మరియు 0930 గంటల మధ్య తీసుకున్నారు.

స్టడీ డిజైన్

డిస్కవరీ-ఫేజ్ ప్రోటీమిక్స్ అధ్యయనం కోసం, ECT యొక్క చికిత్సా ప్రభావం కోసం నమూనాను సుసంపన్నం చేయడానికి 2008 నుండి 2010 వరకు ట్రయల్ మొదటి భాగంలో నియమించిన ECT రిమిటర్లను ( n = 30; టేబుల్ 1) ఎంచుకున్నాము. ప్రోటీమ్ మార్పులను గుర్తించడానికి పూర్వ మరియు పోస్ట్-ఇసిటి ప్లాస్మా నమూనాలను పోల్చారు మరియు నిర్ధారణ అధ్యయనాల కోసం అదే నమూనాలను ఉపయోగించారు.

పూర్తి పరిమాణ పట్టిక

EFFECT-Dep ట్రయల్‌లో పాల్గొని ECT ( n = 57) తో చికిత్స చేయబడిన, అలాగే వయస్సు మరియు లైంగిక-సరిపోలిన ఆరోగ్యకరమైన నియంత్రణల నుండి ( n = 43; జనాభా మరియు అనుబంధ పట్టిక 1 చూడండి) క్లినికల్ లక్షణాలు) ధృవీకరించబడిన ప్రోటీన్లను ధృవీకరించడానికి ఉపయోగించబడ్డాయి.

ప్రయోగశాల విశ్లేషణలు పరిశోధకుడితో సమూహానికి బంధించబడని నమూనాలు (అనగా నియంత్రణ, నిరాశకు గురైన ప్రీ-ఇసిటి, అణగారిన పోస్ట్-ఇసిటి) సమూహానికి చెందినవి కాని అన్ని క్లినికల్ మరియు డెమోగ్రాఫిక్ డేటాకు కంటిమీద కునుకు లేకుండా చేయబడ్డాయి.

2D-DIGE మరియు మాస్ స్పెక్ట్రోమెట్రీ

గతంలో వివరించిన విధంగా ప్లాస్మా నమూనాలను 2D-DIGE ద్వారా వేరు చేశారు. 11, 12 2D-DIGE విశ్లేషణకు ముందు, మానవ ప్లాస్మాలో (అల్బుమిన్, IgG, IgA, ట్రాన్స్‌ఫ్రిన్, హాప్టోగ్లోబిన్ మరియు యాంటిట్రిప్సిన్) కనుగొనబడిన ఆరు అత్యంత సమృద్ధిగా ఉన్న ప్రోటీన్లలో 85-90% తొలగించబడ్డాయి, ప్రతి ప్లాస్మా నమూనా నుండి రెండు ప్రోటీన్ భిన్నాలను ఇస్తుంది: తక్కువ -బండెన్స్ మరియు అధిక సమృద్ధి కలిగిన ప్రోటీన్లు. విభిన్నంగా వ్యక్తీకరించబడిన ప్రోటీన్ మచ్చలు వాటి గణాంక ప్రాముఖ్యత ( పి <0.05), సైడై-లేబుల్ చేయబడిన జెల్ చిత్రాల పోలిక తరువాత వాటి స్థానం / ఆకారం మరియు వెండి-తడిసిన సన్నాహక జెల్స్‌ను మాన్యువల్ తనిఖీ ఆధారంగా మాస్ స్పెక్ట్రోమెట్రీ ద్వారా గుర్తించడానికి లక్ష్యంగా పెట్టుకున్నాయి. చిన్న మచ్చలను ఎక్సైజ్ చేయడం కష్టం మరియు ఎక్సైజ్ చేయబడిన ప్రాంతం ప్రక్కనే ఉన్న మచ్చల నుండి ప్రోటీన్లను కలిగి ఉండకుండా చూసుకోవడం వలన మాస్ స్పెక్ట్రోమెట్రీ కోసం సులభంగా ఎక్సైజ్ చేయగల మచ్చలు మాత్రమే పరిగణించబడతాయి. వివరణాత్మక వివరణ కోసం, అనుబంధ పదార్థాలు మరియు పద్ధతులు చూడండి.

జీన్ ఆన్టాలజీ విశ్లేషణ

గుర్తించిన అన్ని ప్రోటీన్ల యొక్క యూనిప్రోట్ ప్రవేశ సంఖ్యలు గతంలో వివరించిన విధంగా డేటాబేస్ ఫర్ ఉల్లేఖన, విజువలైజేషన్ మరియు ఇంటిగ్రేటెడ్ డిస్కవరీ (డేవిడ్) (//david.abcc.ncifcrf.gov) 20, 21 లో అప్‌లోడ్ చేయబడ్డాయి. 12 మరిన్ని వివరాల కోసం అనుబంధ పదార్థాలు మరియు పద్ధతులు చూడండి.

భేదాత్మకంగా వ్యక్తీకరించిన ప్రోటీన్ల నిర్ధారణ మరియు ధృవీకరణ

2-పెప్టైడ్ కనీస ప్రమాణం ఆధారంగా మరియు మొదటి సందర్భంలో, గతంలో డిప్రెషన్ 22, 23, 24 లేదా యాంటిడిప్రెసెంట్ చికిత్సలో చిక్కుకున్న మచ్చల-మార్పు 1.1 ద్వారా మచ్చల నుండి ప్లాస్మా అధ్యయనాల కోసం ప్రోటీన్లు ఎంపిక చేయబడ్డాయి. . 11, 25 ఇమ్యునోఅస్సే కిట్లు తక్షణమే లభించే మూడు ప్రోటీన్లు, నిర్ధారణ మరియు ధ్రువీకరణ అధ్యయనాల కోసం ఎంపిక చేయబడ్డాయి. తక్కువ సమృద్ధి గల జెల్స్‌లో గుర్తించిన ప్రోటీన్ల నుండి పిఇడిఎఫ్ మరియు హాప్టోగ్లోబిన్ ఎంపిక చేయబడ్డాయి, అయితే అధిక సమృద్ధి గల జెల్స్‌లో గుర్తించిన ప్రోటీన్ల నుండి సెరోట్రాన్స్‌ఫెర్రిన్ ఎంపిక చేయబడింది. దశ పరిధి హాప్టోగ్లోబిన్ కిట్ (టిపి 801; ట్రైడెల్టా డెవలప్‌మెంట్, కిల్డేర్, ఐర్లాండ్) హాప్టోగ్లోబిన్ సాంద్రతలను నిర్ణయించడానికి ఉపయోగించబడింది. సెరోట్రాన్స్‌ఫెర్రిన్ (CSB-E13761h; కుసాబియో బయోటెక్, వుహాన్, చైనా) మరియు పిగ్మెంట్ ఎపిథీలియం-ఉత్పన్న కారకం (PEDF) (CYT420; మిల్లిపోర్, కార్క్, ఐర్లాండ్) సాంద్రతలను కొలవడానికి శాండ్‌విచ్ ELISA కిట్‌లను ఉపయోగించారు. అన్ని పరీక్షలకు ఇంట్రా-అస్సే% కోఎఫీషియంట్ <10, అయితే పిఇడిఎఫ్ కోసం ఇంటర్-అస్సే% కోఎఫీషియంట్ ఆఫ్ వైవిధ్యం <20.

PEDF mRNA స్థాయిల విశ్లేషణ

మెదడులోని PEDF mRNA స్థాయిలపై ECS యొక్క ప్రభావాలను అంచనా వేయడానికి, ఎలుకలను (సమూహానికి n = 7–8) ECS తో తీవ్రంగా (1 ×) లేదా దీర్ఘకాలికంగా (10 ×) చికిత్స చేశారు, మరియు మెదడు మరియు రక్త నమూనాలను గతంలో వివరించిన విధంగా పండించారు 26 (అనుబంధ పదార్థాలు మరియు పద్ధతులు). mRNA వెలికితీతలు, సిడిఎన్ఎ సంశ్లేషణ మరియు qRT-PCR అనుబంధ పదార్థాలు మరియు పద్ధతుల్లో వివరించిన విధంగా జరిగాయి.

గణాంక విశ్లేషణ

సాధారణీకరించిన ప్రోటీన్ స్పాట్ వ్యక్తీకరణలో ముందు / పోస్ట్-ఇసిటిలో తేడాలను నిర్ణయించడానికి ప్రొజెనిసిస్ సేమ్‌స్పాట్ సాఫ్ట్‌వేర్ (నాన్‌లీనియర్ డైనమిక్స్, న్యూకాజిల్ అపాన్ టైన్, యుకె) వన్-వే ANOVA ను వర్తింపజేసింది. పి <0.05 యొక్క విలువ గణాంకపరంగా ముఖ్యమైనదిగా పరిగణించబడింది.

SPSS వెర్షన్ 22.0 (IBM, న్యూయార్క్, NY, USA) ఉపయోగించి ధృవీకరణ మరియు ధ్రువీకరణ అధ్యయనం డేటా విశ్లేషణలు జరిగాయి. పేర్కొనకపోతే data 2 పరీక్షలను ఉపయోగించి వర్గీకరణ డేటా పరీక్షించబడింది. షాపిరో-విల్క్ పరీక్షను ఉపయోగించి అన్ని డేటా సాధారణం కోసం పరీక్షించబడింది మరియు అవసరమైన చోట లాగ్-ట్రాన్స్ఫార్మ్ చేయబడింది. సాధారణ పంపిణీలతో డేటాను రెండు-వైపుల విద్యార్థుల టి -టెస్ట్ లేదా విశ్లేషణ యొక్క విశ్లేషణ (ANOVA) ఉపయోగించి విశ్లేషించారు. జత చేసిన పోలికల కోసం విల్కాక్సన్ సంతకం చేసిన ర్యాంక్ పరీక్షతో పారామెట్రిక్ కాని డేటాను విశ్లేషించారు. పియర్సన్ యొక్క సహసంబంధ గుణకం r లేదా స్పియర్మాన్ యొక్క ర్యాంక్ సహసంబంధ గుణకం using ఉపయోగించి సహసంబంధ విశ్లేషణలు జరిగాయి. సంభావ్య గందరగోళకారులకు సంబంధించి, రోగులు మరియు నియంత్రణలు వయస్సు మరియు లింగంతో సరిపోలాయి. బాడీ మాస్ ఇండెక్స్ (బిఎమ్‌ఐ), ధూమపానం, మద్యపాన స్థాయి మరియు సామాజిక-ఆర్ధిక సమూహం వంటి ఇతర సంభావ్య గందరగోళదారులు సమూహాల మధ్య (అణగారిన మరియు నియంత్రణలు) మధ్య విభేదిస్తే మరియు డిపెండెంట్ వేరియబుల్ (పిఇడిఎఫ్ విలువలు) తో పరస్పర సంబంధం కలిగి ఉంటే వారు గందరగోళంగా భావిస్తారు.

కాలక్రమేణా మార్పులు మిశ్రమ-రూపకల్పన ANOVA ను సమయంతో కారకం మరియు ఉపశమన స్థితి, ధ్రువణత, సైకోసిస్ ఉనికి మరియు ఎలక్ట్రోడ్ స్థానం మధ్య విషయాల కారకాలుగా విశ్లేషించబడ్డాయి. డేటా సగటు (సెమ్) యొక్క ప్రామాణిక లోపంతో సాధనంగా ప్రదర్శించబడుతుంది. <0.05 యొక్క P- విలువ గణాంకపరంగా ముఖ్యమైనదిగా పరిగణించబడింది.

ఫలితాలు

2D-DIGE మరియు మాస్ స్పెక్ట్రోమెట్రీ

తక్కువ సమృద్ధిగా ఉన్న ప్రోటీన్ జెల్స్‌లో (సప్లిమెంటరీ ఫిగర్ 1) ECT తరువాత మొత్తం 47 ప్రోటీన్ మచ్చలు గణనీయంగా మార్చబడ్డాయి, వీటి నుండి మాస్ స్పెక్ట్రోమెట్రీని ఉపయోగించి గుర్తింపు కోసం 25 మచ్చలు ఎంపిక చేయబడ్డాయి మరియు 32 ప్రోటీన్లు చివరికి గుర్తించబడ్డాయి. అధిక-సమృద్ధి గల జెల్స్‌లో, 74 ప్రోటీన్ మచ్చలు ECT (సప్లిమెంటరీ ఫిగర్ 2) తరువాత గణనీయంగా మార్చబడ్డాయి, వీటి నుండి మాస్ స్పెక్ట్రోమెట్రీ ద్వారా గుర్తించడానికి 20 మచ్చలు ఎంపిక చేయబడ్డాయి మరియు చివరికి నాలుగు ప్రోటీన్లు గుర్తించబడ్డాయి. ఈ ప్రోటీన్లలో చాలా జెల్ల యొక్క రెండు సెట్లలో బహుళ మచ్చలలో గుర్తించబడ్డాయి. గుర్తించిన ప్రోటీన్లు అనుబంధ పట్టికలు 2 మరియు 3 లో ఇవ్వబడ్డాయి.

జీన్ ఆన్టాలజీ విశ్లేషణ

డేవిడ్ విశ్లేషణ బయోలాజికల్ ప్రాసెస్, మాలిక్యులర్ ఫంక్షన్ మరియు సెల్యులార్ కాంపోనెంట్ అనే జీన్ ఆన్టాలజీ నిబంధనల ప్రకారం తక్కువ-సమృద్ధి ప్రోటీన్లను వర్గీకరించింది. ప్రతి సుసంపన్న పదానికి ఉల్లేఖించిన ప్రోటీన్ల సంఖ్య ప్రతి వర్గంలో గుర్తించబడిన మొత్తం ప్రోటీన్ల శాతంలో వ్యక్తీకరించబడింది (అనుబంధ మూర్తి 3). డేవిడ్ చేత వర్గీకరించబడిన ప్రోటీన్ల యొక్క పి- విలువ, తప్పుడు ఆవిష్కరణ రేటు మరియు ప్రవేశ సంఖ్యలు అనుబంధ పట్టికలు 4 మరియు 5 లోని తక్కువ మరియు అధిక-సమృద్ధి కలిగిన ప్రోటీన్ల కోసం జాబితా చేయబడ్డాయి. ఒకే KEGG మార్గం, పూరక మరియు గడ్డకట్టే క్యాస్కేడ్లు ( P = 1.37E - 9 ; తప్పుడు-ఆవిష్కరణ రేటు P = 1.14E - 6), తక్కువ-సమృద్ధి కలిగిన ప్రోటీన్ల నుండి గుర్తించబడింది, అయితే అధిక-సమృద్ధి కలిగిన ప్రోటీన్ల నుండి ముఖ్యమైన KEGG మార్గం గుర్తించబడలేదు.

ప్రోటీన్ మార్పుల నిర్ధారణ

నిర్ధారణ అధ్యయనాల కోసం ఎంపిక చేసిన ప్రోటీన్లు PEDF, సెరోట్రాన్స్ఫెర్రిన్ మరియు హాప్టోగ్లోబిన్. పిఇడిఎఫ్ డేటా సాధారణంగా పంపిణీ చేయబడుతుంది, అయితే సెరోట్రాన్స్ఫెర్రిన్ మరియు హాప్టోగ్లోబిన్ కోసం డేటా లేదు. లాగ్ పరివర్తన తరువాత సెరోట్రాన్స్ఫెర్రిన్ డేటా సాధారణ స్థితిని పొందింది మరియు అందువల్ల సెరోట్రాన్స్ఫెర్రిన్ మరియు పిఇడిఎఫ్ రెండింటినీ విశ్లేషించడానికి పారామెట్రిక్ పరీక్ష ఉపయోగించబడింది. లాగ్ పరివర్తన తర్వాత కూడా హాప్టోగ్లోబిన్ సాధారణ స్థితిని పొందడంలో విఫలమైంది; అందువల్ల, పారామితి రహిత పరీక్ష ఉపయోగించబడింది. ECT తరువాత PEDF సాంద్రతలు పెరిగాయి (మూర్తి 1a; P = 0.003). సెరోట్రాన్స్ఫెర్రిన్ (మూర్తి 1 బి; పి = 0.36) లేదా హాప్టోగ్లోబిన్ (మూర్తి 1 సి; పి = 0.49) స్థాయిలలో ఎటువంటి మార్పు లేదు.

Image

భేదాత్మకంగా వ్యక్తీకరించిన ప్రోటీన్ల నిర్ధారణ అధ్యయనాలు. ECT యొక్క కోర్సును పూర్తి చేయడానికి ముందు మరియు తరువాత అణగారిన రోగుల నుండి సేకరించిన ప్లాస్మా నమూనాలు మరియు డిస్కవరీ-ఫేజ్ ప్రోటీమిక్ అధ్యయనంలో చేర్చబడ్డాయి ELISA మరియు కలర్మెట్రిక్ అస్సేలను ఉపయోగించి నిర్ధారణ అధ్యయనాల కోసం ఉపయోగించబడ్డాయి. ( ) ECT తరువాత ప్లాస్మా PEDF సాంద్రతలు గణనీయంగా పెరిగాయి. ECT తరువాత ( బి ) సెరోట్రాన్స్ఫెర్రిన్ లేదా ( సి ) హాప్టోగ్లోబిన్ గా ration తలో ఎటువంటి మార్పు లేదు. డేటా అంటే సెమ్ ** పి <0.01 వర్సెస్ ప్రీ-ఇసిటి కౌంటర్ (పిఇడిఎఫ్, సెరోట్రాన్స్ఫెర్రిన్: జత చేసిన టి -టెస్ట్; హాప్టోగ్లోబిన్: విల్కాక్సన్ సంతకం చేసిన ర్యాంక్ టెస్ట్). ECT, ఎలక్ట్రోకాన్వల్సివ్ థెరపీ; పిఇడిఎఫ్, పిగ్మెంట్ ఎపిథీలియం-ఉత్పన్న కారకం.

పూర్తి పరిమాణ చిత్రం

ప్లాస్మా PEDF ప్రోటీన్ స్థాయిలలో మార్పుల ధ్రువీకరణ

ECT తరువాత PEDF స్థాయిల పెరుగుదలను మేము ధృవీకరించినందున, వయస్సు- మరియు లైంగిక-సరిపోలిన ఆరోగ్యకరమైన నియంత్రణలతో ( n = 43) పోలిస్తే ECT కి ముందు ( n = 57) అణగారిన రోగులలో ప్లాస్మా PEDF స్థాయిలను పరిశీలించడానికి మేము ప్రయత్నించాము మరియు మార్పులను ధృవీకరించాము. PEDF పెద్ద స్వతంత్ర నమూనాలో ECT ను అనుసరించి గమనించబడింది (మూర్తి 2). నియంత్రణలతో పోలిస్తే అణగారిన రోగులలో PEDF స్థాయిలు గణనీయంగా ఎక్కువగా ఉన్నాయి (మూర్తి 2a; P <0.05). పిఎడిఎఫ్ స్థాయిలు మరియు బిఎమ్‌ఐ 27 ( ఆర్ = 0.15, పి = 0.15), ఆల్కహాల్ 28 ( ρ = .10.13, పి = 0.19) లేదా ధూమపానం 29 ( పి =) వంటి బేస్‌లైన్ పిఇడిఎఫ్ స్థాయిలపై సంభావ్య ప్రభావాన్ని కలిగి ఉన్న కారకాల మధ్య ముఖ్యమైన సంబంధం లేదు. 0.21).

Image

ప్రధాన నిస్పృహ ఎపిసోడ్ సమయంలో ప్లాస్మా పిఇడిఎఫ్ స్థాయిలు మరియు ECT ను అనుసరిస్తాయి. ధ్రువీకరణ అధ్యయనాలు ఆరోగ్యకరమైన నియంత్రణ పాల్గొనేవారితో ( n = 43) పోలిస్తే అణగారిన రోగులలో ( n = 57) ప్లాస్మా PEDF ఎక్కువగా ఉందని మరియు ECT తరువాత పెరుగుతుందని చూపిస్తుంది. డేటా సగటు లాగ్ 10 ng ml −1 ± sem * P <0.05 వర్సెస్ హెల్తీ కంట్రోల్స్ (జతచేయని టి -టెస్ట్), + P <0.05 ప్రీ-ఇసిటి వర్సెస్ పోస్ట్-ఇసిటి-డిప్రెస్డ్ రోగులు (జత చేసిన టి -టెస్ట్). ECT, ఎలక్ట్రోకాన్వల్సివ్ థెరపీ; పిఇడిఎఫ్, పిగ్మెంట్ ఎపిథీలియం-ఉత్పన్న కారకం.

పూర్తి పరిమాణ చిత్రం

అణగారిన రోగులలో, ECT ( P = 0.03) తరువాత PEDF స్థాయిలు గణనీయంగా పెరిగాయి. మిశ్రమ-రూపకల్పన ANOVA ఉపశమన స్థితి (F (1, 55) = 0.48, P = 0.49), నిరాశ ధ్రువణత (F (1, 55) = 0.32, P = 0.57), ఉనికి ఆధారంగా విషయాల మధ్య తేడాలు ఏవీ లేవు. సైకోసిస్ (ఎఫ్ (1, 55) = 0.01, పి = 0.94) లేదా ఎలక్ట్రోడ్ ప్లేస్‌మెంట్ (ఎఫ్ (1, 55) = 0.15, పి = 0.70).

PEDF మరియు క్లినికల్ ఫలితం

మా డిస్కవరీ-గ్రూప్ రిమిటర్లను మాత్రమే కలిగి ఉంది, అయితే మా ధ్రువీకరణ సమూహంలో 16% రిమిటర్లు ఉన్నాయి. అందువల్ల, ప్లాస్మా PEDF స్థాయిలు మరియు క్లినికల్ ఫలితాల మధ్య సంబంధాన్ని అన్వేషించడానికి, మేము PEDF ప్రోటీన్ డేటా ( n = 87; అనుబంధ పట్టిక 6) నిర్ధారణ మరియు ధ్రువీకరణను పూల్ చేసాము. ఈ పూల్ చేయబడిన సమూహం సగటు వయస్సు 55.5 ± 14.6 సంవత్సరాలు, సగటు బేస్లైన్ HAM-D 30.7 ± 7.1, 11.2 ± 8.5 యొక్క పోస్ట్-ఇసిటి HAM-D, మరియు 46% రిమిటర్లను కలిగి ఉంది, ఇది మొత్తం ప్రభావానికి సమానంగా ఉంటుంది -డెప్ ట్రయల్ గ్రూప్. PEDF యొక్క బేస్లైన్ స్థాయిలు ప్రీ-ECT HAM-D స్కోర్‌లతో ( r = 0.11, P = 0.32) సంబంధం కలిగి లేవు లేదా PEDF స్థాయిలలో మార్పులు HAM-D ( r = 0.05, P = 0.67) లో మార్పులతో సంబంధం కలిగి లేవు. మిశ్రమ-రూపకల్పన ANOVA PEDF స్థాయిలలో (F (1, 85) = 1.23, P = 0.23) మార్పుపై ఉపశమన స్థితి యొక్క ప్రభావాన్ని చూపించలేదు.

ECS- చికిత్స చేసిన ఎలుకలలో PEDF mRNA మార్పులు

రక్తంలో పిఇడిఎఫ్ యొక్క మూలం స్పష్టంగా లేదు. అందువల్ల మెదడు PEDF mRNA పై తీవ్రమైన (1 ×) మరియు దీర్ఘకాలిక (10 ×) ECS సెషన్ల ప్రభావాలను అంచనా వేయడానికి మేము అమాయక ఎలుకలలో ECS ను ఉపయోగించాము. దీర్ఘకాలిక చికిత్స వ్యవధిలో (F (9, 117) = 1.66, P = 0.11) నిజమైన మరియు షామ్-చికిత్స ECS సమూహాల మధ్య శరీర బరువులో తేడా లేదు. పిడిఎఫ్ ఎంఆర్ఎన్ఎ స్థాయిలు గణనీయంగా హిప్పోకాంపస్ ( పి = 0.02) మరియు డెంటేట్ గైరస్ ( పి = 0.03) ఎలుకలలో దీర్ఘకాలికంగా ECS తో చికిత్స చేయబడ్డాయి, ఫ్రంటల్ కార్టెక్స్ ( పి = 0.26) లేదా సెరెబెల్లమ్ ( పి = 0.48) (మూర్తి) 3A). దీర్ఘకాలిక ECS తరువాత రక్తంలో PEDF mRNA స్థాయిలు పెరిగినప్పటికీ, మార్పు గణాంకపరంగా ముఖ్యమైనది కాదు (మూర్తి 3a: P = 0.18). తీవ్రమైన ECS తరువాత, సెరెబెల్లమ్ ( P = 0.04) లో PEDF mRNA స్థాయిలు గణనీయంగా తగ్గాయి, అయితే హిప్పోకాంపస్ ( P = 0.16), డెంటేట్ గైరస్ ( P = 0.21), ఫ్రంటల్ కార్టెక్స్ ( P = 0.92) లేదా రక్తంలో ఎటువంటి మార్పు కనిపించలేదు. ( పి = 0.55) (మూర్తి 3 బి).

Image

తీవ్రమైన మరియు దీర్ఘకాలిక ECS తరువాత ఎలుక మెదడు మరియు రక్తంలో PEDF mRNA మార్పులు. ఎలుకలను ECS తో దీర్ఘకాలికంగా (10 ×) లేదా తీవ్రంగా (1 ×) చికిత్స చేసి 4 h పోస్ట్ చికిత్సను చంపారు. ( ) హిప్పోకాంపస్ (సమూహానికి n = 7) మరియు డెంటేట్ గైరస్ (సమూహానికి n = 7–8) లో దీర్ఘకాలిక (10 ×) ECS తరువాత PEDF mRNA స్థాయిలు గణనీయంగా పెరిగాయి కాని ఫ్రంటల్ కార్టెక్స్‌లో (సమూహానికి n = 7) ), సెరెబెల్లమ్ (సమూహానికి n = 7–8) లేదా రక్తం (సమూహానికి n = 5–6). ( బి ) సెరెబెల్లమ్‌లోని తీవ్రమైన (1 ×) ECS (సమూహానికి n = 8) తరువాత పిఇడిఎఫ్ ఎమ్‌ఆర్‌ఎన్ఎ స్థాయిలు గణనీయంగా తగ్గాయి, కానీ హిప్పోకాంపస్‌లో (సమూహానికి n = 8), డెంటేట్ గైరస్ (సమూహానికి n = 8), ఫ్రంటల్ వల్కలం (సమూహానికి n = 8) లేదా రక్తం (సమూహానికి n = 6-7). డేటా సగటు ± sem * P <0.05 వర్సెస్ షామ్ ఇసిఎస్ కంట్రోల్ (స్టూడెంట్స్ టి -టెస్ట్) గా వ్యక్తీకరించబడింది. ECS, ఎలక్ట్రోకాన్వల్సివ్ స్టిమ్యులేషన్; పిఇడిఎఫ్, పిగ్మెంట్ ఎపిథీలియం-ఉత్పన్న కారకం.

పూర్తి పరిమాణ చిత్రం

చర్చా

మా ప్రోటీమిక్ స్క్రీన్ యొక్క ఫలితాలు ECT ను అనుసరించి తీవ్రంగా నిరాశకు గురైన రోగులలో అధిక మరియు తక్కువ-సమృద్ధిగా ఉన్న ప్లాస్మా ప్రోటీన్లలో గణనీయమైన మార్పులను చూపించాయి, అధిక-సమృద్ధిగల జెల్ మచ్చలలో మాస్ స్పెక్ట్రోమెట్రీ ద్వారా గుర్తించబడిన నాలుగు ప్రోటీన్లు మరియు తక్కువ-సమృద్ధిగల జెల్ మచ్చలలో 32 ప్రోటీన్లు. ఈ ప్రోటీన్లలో మార్పులు ముఖ్యంగా రోగనిరోధక ప్రతిస్పందనను సూచిస్తాయి. 2D-DIGE ఉపయోగించి ఎక్కువ మచ్చలలో బహుళ ప్రోటీన్లు గుర్తించబడినందున, మరింత లక్ష్యంగా ఉన్న ఇమ్యునోడెటెక్షన్ విధానాన్ని ఉపయోగించి ప్రోటీమిక్ ఫలితాల నిర్ధారణ అవసరం. 30

ప్రాధమిక నిర్ధారణ అధ్యయనాల కోసం, మేము గతంలో మాంద్యం 22, 23, 24 లేదా యాంటిడిప్రెసెంట్ చికిత్సలలో చిక్కుకున్న మూడు ప్రోటీన్లను ఎంచుకున్నాము, 11, 25 ఈ ప్రోటీన్లలో మార్పులు సంబంధితంగా ఉండవచ్చనే జీవసంబంధమైన ఆమోదానికి తోడ్పడతాయి. ఈ ప్రాతిపదికన, మేము సెరోట్రాన్స్ఫెర్రిన్, హాప్టోగ్లోబిన్ మరియు పిఇడిఎఫ్లను ఎంచుకున్నాము; కనుగొనబడిన ఇతర ప్రోటీన్లలో మార్పులను పరిశోధించడానికి కొనసాగుతున్న పని జరుగుతోంది. సెరోట్రాన్స్ఫెర్రిన్ అనేది ప్రతికూల అక్యూట్ ఫేజ్ ప్రోటీన్, ఇది మొదటి-ప్రారంభ, drug షధ అమాయక మేజర్ డిప్రెసివ్ డిజార్డర్ (MDD) రోగులలో తగ్గుతుంది. హాప్టోగ్లోబిన్ అనేది సానుకూల తీవ్రమైన దశ ప్రోటీన్, ఇది MDD 24 లో పెరుగుతుంది మరియు దీర్ఘకాలిక ECS తరువాత ఎలుక ప్లాస్మాలో తగ్గుతుంది. PEDF అనేది యాంటీఆన్జియోజెనిక్, న్యూరోట్రోఫిక్ మరియు న్యూరోప్రొటెక్టివ్ ప్రభావాలను ప్రదర్శించే సెరైన్ ప్రోటీజ్ ఇన్హిబిటర్. మునుపటి అధ్యయనాలు MDD రోగుల యొక్క CSF లో PEDF ను పెంచినట్లు కనుగొన్నాయి, అయితే ఈ రోగులు యాంటిడిప్రెసెంట్స్ తీసుకుంటున్నారో లేదో స్పష్టంగా తెలియదు, [ 22] మరియు దీర్ఘకాలిక ఫ్లూక్సేటైన్ బహిర్గతం తరువాత మౌస్ హిప్పోకాంపస్‌లో నియంత్రించబడింది. సెరోట్రాన్స్ఫెర్రిన్ లేదా హాప్టోగ్లోబిన్లలో మాకు ఎటువంటి మార్పు కనిపించలేదు కాని ECT తరువాత PEDF ప్రోటీన్ గణనీయంగా పెరిగింది.

మా ఆవిష్కరణ మరియు నిర్ధారణ అధ్యయనాల ఫలితాలు ECT కి జీవ ప్రతిస్పందనలో PEDF ఒక నవల సహకారి అని సూచిస్తుంది. చిన్న నమూనా సమితిలో గుర్తించిన మార్పులు వేరే నమూనాలో కూడా ఉన్నాయో లేదో తెలుసుకోవడం అత్యవసరం. [32] అందువల్ల మేము ఈ ఫలితాలను పెద్ద సంఖ్యలో రోగులలో ధృవీకరించాము మరియు ఆరోగ్యకరమైన నియంత్రణలతో పోల్చితే అణగారిన రోగులలో ప్లాస్మా PEDF ప్రోటీన్ స్థాయిలు గణనీయంగా పెరిగాయని మేము కనుగొన్నాము, ఈ పెరుగుదల ECT ద్వారా పెరిగింది. మునుపటి నివేదికలు BMI, 27 ఆల్కహాల్ 28 మరియు ధూమపానం 29 PEDF యొక్క బేస్లైన్ స్థాయిలను ప్రభావితం చేస్తాయని సూచిస్తున్నాయి. అయితే, ఈ కారకాల యొక్క గణనీయమైన ప్రభావాన్ని మేము గుర్తించలేదు. మా రోగులందరూ ECT సమయంలో యథావిధిగా c షధ చికిత్స పొందుతున్నారు. అందువల్ల, రోగులలో గమనించిన PEDF యొక్క పెరిగిన బేస్‌లైన్ స్థాయిలు వారు అందుకుంటున్న ఫార్మకోలాజికల్ యాంటిడిప్రెసెంట్ చికిత్సల ప్రభావం, మరియు ఈ యాంటిడిప్రెసెంట్ ప్రభావాన్ని పెంచడానికి ECT పనిచేస్తుంది. అందువల్ల, యాంటిడిప్రెసెంట్ చికిత్సలకు ముందు మరియు తరువాత మాంద్యం ఉన్న drug షధ అమాయక రోగుల నుండి నమూనాలను కలిగి ఉన్న మరిన్ని అధ్యయనాలు రోగులలో PEDF స్థాయిలను పూర్తిగా అంచనా వేయడానికి అవసరం. అదనంగా, మా రోగులు ECT సమయంలో అనస్థీషియా మరియు కండరాల సడలింపులను కూడా స్వీకరిస్తున్నారు, ఇది PEDF స్థాయిలను కూడా ప్రభావితం చేస్తుంది. అందువల్ల, PEDF పై ECT యొక్క ప్రభావాలను స్పష్టం చేసే ప్రయత్నంలో, ECS తో చికిత్స చేయబడిన ఎలుకలలో PEDF mRNA వ్యక్తీకరణను పరిశీలించాము. రోగులు ఇతర యాంటిడిప్రెసెంట్ చికిత్సలు, అనస్థీషియా మరియు కండరాల సడలింపులను ECT సమయంలో పొందినప్పటికీ, మా ECS- బహిర్గతమైన ఎలుకలు చేయలేదు. PEDF mRNA దీర్ఘకాలికమైన తరువాత పెరిగినట్లు కనుగొనబడింది, కానీ తీవ్రమైనది కాదు, ECS, ఇది రక్తంలో సంబంధిత పెరుగుదలతో హిప్పోకాంపల్ ఏర్పడటానికి ఎంపిక చేయబడింది. అందువల్ల, ECS / ECT కూడా PEDF స్థాయిలలో మార్పులను ప్రేరేపిస్తుంది.

PEDF నిస్పృహలో మరియు ECT చేత మార్చబడినప్పటికీ, మూడ్ స్కోర్‌లతో మాకు సంబంధం లేదు. స్టెల్జమ్మర్ మరియు ఇతరుల నుండి మునుపటి ప్రోటీమిక్ నివేదిక . 15 ECT కోర్సు తరువాత ఇలాంటి ఫలితాలను చూపించింది. ఆరు ECT సెషన్ల తరువాత, రోగులు HAM-D స్కేల్‌లో స్కోర్‌లలో గణనీయమైన మెరుగుదలలను చూపించారు. అదనంగా, దీర్ఘకాలిక ECT తరువాత నాలుగు సీరం ప్రోటీన్లలో గణనీయమైన మార్పులు కనిపించాయి, అనగా ఆల్ఫా 1-యాంటిచైమోట్రిప్సిన్, అపోలిపోప్రొటీన్ A2, క్లస్టరిన్ మరియు ఆసక్తికరంగా, సెరోట్రాన్స్ఫెర్రిన్. అయినప్పటికీ, మా ఫలితాలతో PEDF తో పోల్చవచ్చు, ఈ ప్రోటీన్లలో మార్పులు లక్షణాల మెరుగుదలకు సంబంధించినవి కావు. ఈ ఫలితాలు న్యూరోట్రోఫిన్ మెదడు-ఉత్పన్నమైన న్యూరోట్రోఫిక్ కారకం (బిడిఎన్ఎఫ్) తో ఇటీవలి ఫలితాలను అనుకరిస్తాయి. ఉద్భవిస్తున్న డేటా BDNF యొక్క వ్యక్తీకరణను పెంచడం ద్వారా ECT దాని క్లినికల్ ప్రభావాన్ని ప్రేరేపించగలదనే సిద్ధాంతానికి దారితీసింది, ఇది నిరాశలో తగ్గుతుంది మరియు తద్వారా న్యూరోనల్ ప్లాస్టిసిటీని పెంచుతుంది. 33, 34 ఇటీవలి మెటా-విశ్లేషణ ప్రకారం, ప్రీ-క్లినికల్ అధ్యయనాలలో మెదడులోని ECS- ప్రేరిత BDNF ఎలుకలలో ప్రవర్తనా మార్పులతో సంబంధం కలిగి ఉంది, అయినప్పటికీ కొద్దిగా. [33 ] అయితే, దీనికి విరుద్ధంగా, అందుబాటులో ఉన్న మానవ డేటా యొక్క మెటా-విశ్లేషణ రక్తంలో BDNF పెరిగినట్లు చూపిస్తుంది, ప్రత్యేకించి ప్లాస్మాలో, ECT తో చికిత్సను అనుసరిస్తుంది, అయితే ఇది ECT యొక్క క్లినికల్ ఎఫిషియసీతో సంబంధం లేదు. [33] PEDF వంటి ప్రోటీన్లలో మార్పులు మాంద్యం యొక్క వ్యాధికారకంలో మరియు ECT యొక్క చర్య యొక్క పరమాణు యంత్రాంగాలలో ముఖ్యమైనవి కావచ్చని ఇది సూచిస్తుంది, కానీ అవి ECT కి చికిత్సా ప్రతిస్పందనతో తప్పనిసరిగా అనుగుణంగా ఉండవు. ఆసక్తికరంగా, ECT చికిత్స తరువాత PEDF స్థాయిలు సాధారణీకరించబడలేదు కాని బదులుగా మరింత పెంచబడ్డాయి, ECT యొక్క యంత్రాంగంలో PEDF మధ్యవర్తిత్వ అణువుగా పనిచేస్తుందని సూచిస్తుంది. అంతిమంగా, ఇది PEDF మరియు మానసిక స్థితి మధ్య సంక్లిష్ట సంబంధాన్ని సూచిస్తుంది, దీనికి మరింత దర్యాప్తు మరియు స్పష్టత అవసరం.

PEDF అనేది ఎండోజెనిస్‌గా వ్యక్తీకరించబడిన 418 అమైనో ఆమ్లం 50 kDa గ్లైకోప్రొటీన్, ఇది క్రోమోజోమ్ 17p13 పై సెర్పిన్ పెప్టిడేస్ ఇన్హిబిటర్, క్లాడ్ ఎఫ్, సభ్యుడు 1 ( SERPINF1 ) జన్యువు ద్వారా ఎన్కోడ్ చేయబడింది. ఇది మొదట మానవ పిండం కంటి వర్ణద్రవ్యం ఎపిథీలియం ద్వారా స్రవించే ప్రోటీన్‌గా గుర్తించబడింది. PEDF విస్తృతంగా వ్యక్తీకరించబడింది మరియు రక్తం, 36 CSF, 37 సజల హాస్యం 38 మరియు ఇతర శరీర ద్రవాలు శారీరకంగా సంబంధిత సాంద్రతలలో కనుగొనబడ్డాయి. [31] ఇది సెరైన్ ప్రోటీజ్ ఇన్హిబిటర్ (సెర్పిన్) కుటుంబానికి చెందినది, అయితే, ఇది ఇతర సెర్పిన్‌లతో నిర్మాణాత్మక హోమోలజీని కలిగి ఉన్నప్పటికీ, ఇది నిరోధకం కానిది, బహుశా దాని రియాక్టివ్ సెంటర్ లూప్‌లోని తేడాలు కారణంగా, ఇది క్రియాత్మక విశిష్టతను నిర్ణయిస్తుంది. [39] PEDF ప్రధానంగా PEDF రిసెప్టర్ (PEDF-R) ద్వారా సంకేతాలు ఇస్తుంది, ఇది ట్రాన్స్మెంబ్రేన్ ప్రోటీన్, పటాటిన్ లాంటి ఫాస్ఫోలిపేస్ డొమైన్ చేత ఎన్కోడ్ చేయబడిన 2 ( PNPLA2 ) కణ ఉపరితలంపై ఉంటుంది మరియు ఇది ఫాస్ఫోలిపేస్ A2 (PLA2) కార్యాచరణను ప్రదర్శిస్తుంది. 40 పిఎన్‌పిఎల్‌ఎ 2 రక్త కణాలపై, 41, 42 అడిపోసైట్లు, 43 మరియు మెదడులోని న్యూరాన్లు 44 మరియు గ్లియా 45 పై వ్యక్తీకరించబడింది. పిఇడిఎఫ్ నుండి పొందిన పెప్టైడ్లు న్యూరోప్రొటెక్టివ్ లేదా యాంటీఆన్జియోజెనిక్ ఫంక్షన్లను కలిగి ఉంటాయి. PEDF-R తో PEDF బంధించడం PLA2 చర్యను ప్రేరేపిస్తుంది, దీనివల్ల కొవ్వు ఆమ్లాలు, ఒమేగా -3 డోకోసాహెక్సనోయిక్ ఆమ్లం లేదా ఒమేగా -6 అరాకిడోనిక్ ఆమ్లం మరియు పొర ఫాస్ఫోలిపిడ్ల నుండి లైసోఫాస్ఫాటిడిక్ ఆమ్లం విడుదల అవుతాయి. ఎలివేటెడ్ డోకోసాహెక్సనోయిక్ ఆమ్లం అరాకిడోనిక్ ఆమ్లాన్ని వ్యతిరేకిస్తుంది, ఇది ప్రకృతిలో ట్యూమోరిజెనిక్, మరియు కొవ్వు ఆమ్లం డెరివేటివ్ న్యూరోప్రొటెక్టిన్ డి 1 విడుదలను పెంచుతుంది, ఇది పిఇడిఎఫ్ యొక్క న్యూరోట్రోఫిక్ మరియు శోథ నిరోధక చర్యలకు మధ్యవర్తిత్వం చేస్తుంది. [31] పిఇడిఎఫ్ యాంటీఆన్జియోజెనిక్ మరియు యాంటిట్యూమోరిజెనిక్ అని కూడా పిలుస్తారు మరియు టిష్యూ హోమియోస్టాసిస్‌లో పనిచేస్తుంది. [46] ఇది వాస్కులర్ ఎండోథెలియల్ గ్రోత్ ఫ్యాక్టర్‌తో కౌంటర్ బ్యాలెన్స్ ద్వారా సంభవిస్తుంది, ఇది యాంజియోజెనిక్ అనుకూల 47 మరియు గతంలో మాంద్యంలో చిక్కుకుంది. [48] ముఖ్యంగా, PEDF చాలా క్యాన్సర్లలో నియంత్రించబడలేదు. 31

ECS / ECT అనేక న్యూరోట్రోఫిన్ల యొక్క వ్యక్తీకరణను మారుస్తుంది 26, 49, 50 మరియు PEDF అనేది ECS / ECT తరువాత నియంత్రించబడిన మరొక న్యూరోట్రోఫిన్, ఇది మాంద్యం యొక్క న్యూరోట్రోఫిక్ పరికల్పనకు మరింత ఆధారాలను జోడించవచ్చు. [51 ] PEDF యొక్క న్యూరోట్రోఫిక్ మరియు న్యూరోప్రొటెక్టివ్ కార్యకలాపాలు 78–121 స్థానాలకు అనుగుణంగా 44-అమైనో-ఆమ్ల భాగం నుండి రావాలని సూచించారు. [52 ] రోగనిరోధక-సంబంధిత ట్రాన్స్క్రిప్షన్ కారకం NFkB యొక్క క్రియాశీలతను కూడా PEDF ప్రోత్సహిస్తుంది, [ 39] ఇది యాంటీఆప్టోటిక్ ప్రోటీన్లు, మనుగడకు అనుకూలమైన జన్యువులు లేదా న్యూరోనల్ కణాలలో న్యూరోట్రోఫిన్‌ల పెరుగుదలను ప్రేరేపిస్తుంది. [39] PEDF Y79 రెటినోబ్లాస్టోమా కణాలలో న్యూరైట్ పెరుగుదలను ప్రోత్సహిస్తుంది మరియు వెన్నెముక మోటారు న్యూరాన్లు అభివృద్ధి చెందుతుంది, [ 54] మరియు వివిధ నమూనాలలో న్యూరోనల్ క్షీణతను నివారించడానికి కూడా చూపబడింది. [39] ఆసక్తికరంగా, పున omb సంయోగం చేసే మానవ PEDF మైక్రోగ్లియా 55, 56 మరియు ఆస్ట్రోసైట్స్ 57 విట్రోలో శోథ నిరోధక సైటోకిన్ మరియు కెమోకిన్ వ్యక్తీకరణను ప్రేరేపిస్తుంది , PEDF CNS లో న్యూరోఇమ్యూన్ మాడ్యులేటర్‌గా పనిచేస్తుందని సూచిస్తుంది. కలిసి చూస్తే, పిఇడిఎఫ్ దాని ప్రభావాలను న్యూరోట్రోఫిక్, యాంటీఆన్జియోజెనిక్ మరియు / లేదా ఇమ్యునోలాజికల్ మెకానిజమ్స్ ద్వారా మధ్యవర్తిత్వం చేయవచ్చు, ఇవన్నీ డిప్రెషన్ న్యూరోబయాలజీకి సంబంధించినవి. [58] ఈ వ్యవస్థలు ఒకదానికొకటి ప్రభావితం చేస్తున్నందున, 4, 59, 60 మాంద్యంలో PEDF యొక్క ప్రభావాలకు మరియు యాంటిడిప్రెసెంట్ ప్రతిస్పందనకు వాటి మధ్య సంక్లిష్ట పరస్పర చర్య కారణం కావచ్చు; ఏది ఏమయినప్పటికీ, ఖచ్చితమైన యంత్రాంగాలను నిర్ణయించడానికి మరింత పని అవసరం.

ప్లాస్మాలో పిఇడిఎఫ్ యొక్క మూలం తెలియదు. మునుపటి అధ్యయనాలు PEDF ఆస్ట్రోగ్లియల్ ఎక్సోసోమ్‌లలో, 61 నానోమీటర్-పరిమాణ వెసికిల్స్ ~ 30–100 nm వ్యాసంలో ఎండోసైటిక్ కంపార్ట్‌మెంట్ల నుండి ఉద్భవించి, సెల్ నుండి స్రవిస్తాయి. ఎక్సోసోమ్‌లు వాటి మాతృ కణాల ప్రోటీన్లు, లిపిడ్లు మరియు ఆర్‌ఎన్‌ఏలను కలిగి ఉన్నట్లు కనుగొనబడింది. మెదడులో, ఎక్సోసోమ్ విడుదల డిపోలరైజేషన్ మరియు న్యూరోట్రాన్స్మిటర్ సిగ్నలింగ్‌తో సంబంధం కలిగి ఉంటుంది. ముఖ్యంగా, న్యూరాన్లు మరియు గ్లియా నుండి ఎక్సోసోమ్‌లు CSF లో కనుగొనబడతాయని మరియు మెదడు నుండి రక్తం-మెదడు అవరోధం ద్వారా ప్రసరణలోకి వెళ్ళవచ్చని ఆధారాలు సూచిస్తున్నాయి. [9] అయితే, దీనికి సంబంధించిన విధానం పూర్తిగా అర్థం కాలేదు. ఇటువంటి అధ్యయనాలు మా అధ్యయనంలో ప్లాస్మా పిఇడిఎఫ్ మెదడు నుండి వస్తున్నాయని సూచిస్తున్నాయి, అయితే ఈ అవకాశాన్ని పూర్తిగా పరిశోధించడానికి మరింత కృషి అవసరం.

ప్రస్తుత అధ్యయనంలో కనిపించే PEDF లో మార్పులకు కారణమైన ఖచ్చితమైన యంత్రాంగాలు నిర్ణయించబడుతున్నాయి. ట్రాన్స్‌క్రిప్షన్‌లో మార్పు, ప్రోటీన్ యొక్క టర్నోవర్ తగ్గడం, దాని సగం జీవితంలో పెరుగుదల, క్షీణత లేదా గ్లైకోసైలేషన్ 36 లేదా ఫాస్ఫోరైలేషన్ వంటి అనువాదానంతర మార్పుల వల్ల పిఇడిఎఫ్ పెరుగుదల సంభవిస్తుందని మేము ulate హిస్తున్నాము. 62

ఈ అధ్యయనం యొక్క పరిమితి ఏమిటంటే, ఇప్పటికే చెప్పినట్లుగా, మా రోగులందరూ ECT సమయంలో యథావిధిగా c షధ చికిత్స పొందుతున్నారు. అందువల్ల, అణగారిన రోగులలో PEDF పెరుగుదల యాంటిడిప్రెసెంట్ చికిత్స యొక్క ప్రభావం అని మరియు ఈ యాంటిడిప్రెసెంట్ ప్రభావాన్ని పెంచడానికి ECT పనిచేస్తుందని కొట్టిపారేయలేము. మునుపటి అధ్యయనం రిపోర్టింగ్ అణగారిన రోగుల యొక్క CSF లో PEDF యొక్క బేసల్ స్థాయిలను పెంచింది, రోగులు యాంటిడిప్రెసెంట్స్ తీసుకుంటున్నారా లేదా అనే విషయాన్ని వివరించలేదు. 22 అంతేకాకుండా, మా రోగులు ECT సమయంలో అనస్థీషియా మరియు కండరాల సడలింపులను పొందుతున్నారు. PEDF పై ECT యొక్క ప్రభావాలను స్పష్టం చేసే ప్రయత్నంలో, ECS తో చికిత్స చేయబడిన ఎలుకలలో PEDF mRNA వ్యక్తీకరణను పరిశీలించాము. ఇప్పటికే చెప్పినట్లుగా, రోగులు ఇతర యాంటిడిప్రెసెంట్ చికిత్సలు, అనస్థీషియా మరియు కండరాల సడలింపులను ECT సమయంలో పొందినప్పటికీ, మా ECS- బహిర్గతమైన ఎలుకలు చేయలేదు. రక్తంలో సంబంధిత పెరుగుదలతో హిప్పోకాంపల్ ఏర్పడటానికి ఎంపికైన దీర్ఘకాలిక, కాని తీవ్రమైన, ECS తరువాత PEDF mRNA లో పెరుగుదల మేము కనుగొన్నాము. అయినప్పటికీ, ఈ పని యొక్క పరిమితి ఏమిటంటే, కణజాల నమూనాలు అందుబాటులో లేనందున మేము ECS మోడల్‌లో PEDF ప్రోటీన్ స్థాయిలను విశ్లేషించలేదు. ముఖ్యముగా, రియల్ లేదా షామ్ ఇసిఎస్‌తో చికిత్స చేయబడిన ఎలుకల శరీర బరువులో తేడా లేదు, ఈ చికిత్సా విధానం జంతువులకు ఒత్తిడి కలిగించదని సూచిస్తుంది. ఒత్తిడి కూడా పిఇడిఎఫ్‌ను పెంచలేదని ఇది సూచిస్తుంది. దీర్ఘకాలిక ECT మానవ పరిధీయ PEDF లో మార్పులను ప్రేరేపిస్తుందని మరియు ECT ఎలుక నమూనా యొక్క మెదడులో కూడా ఇలాంటి మార్పులు సంభవిస్తాయని ఈ పరిశోధనలు మరింత ఆధారాలు ఇస్తాయి. భవిష్యత్ అధ్యయనాలు PEDF ప్రోటీన్ స్థాయిల విశ్లేషణలను మరియు నిరాశ నమూనాలను కూడా కలిగి ఉండాలి. Moreover, further work is required to examine levels of PEDF in unmedicated depressed patients, both at baseline compared with the controls and pre-/post-antidepressant treatment, to gain better insight into the changes that occur in PEDF in depression and the therapeutic response. A further limitation of this study is the time point at which plasma samples were collected post-ECT, which ranged from 1–3 days. This may have led to variation in our dataset resulting in the lack of correlation of PEDF changes with mood score changes. Bumb et al. 63 have previously reported that peak BDNF levels only occur after a latency of a number of days following a course of ECT. Moreover, an animal study of ECS showed that there is a time delay in the increase in peripheral BDNF levels following the ECS-induced increase in central levels, indicating that it takes time for peripheral levels to equilibrate with central levels. 64 Thus, to fully evaluate the impact of the time point for blood collection on PEDF levels a time-course study will be useful in the future; however, this was beyond the scope of the current work.

Our results provide some novel insights into the biological response to ECT for depression and possibly its mechanism of action. Evidence now exists to suggest that alterations in PEDF are a common molecular response to antidepressant treatments. Further work is required to fully explore the role of PEDF in both depression and antidepressant treatments.

అనుబంధ సమాచారం

పద పత్రాలు

  1. 1.

    అనుబంధ సమాచారం

    అనువాద సైకియాట్రీ వెబ్‌సైట్ (//www.nature.com/tp) లోని కాగితంతో అనుబంధ సమాచారం